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百日咳毒素S1亚单位的分子修饰及在重组杆状病毒中的表达
被引量：
4
1
作者
于康震
Burnette WN
+3 位作者
Kaslow HR
Mar VL
Ahmad S
Yilma TD
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1999年第2期52-55,共4页
目的：百日咳毒素既是百日咳杆菌的主要毒性因子，又是重要的保护性抗原，其Ｓ１亚单位具有ＡＤＰ核糖转移酶活性和免疫保护性决定簇。为高效表达前构建的一个丧失酶活性但仍保持保护决定簇的Ｓ１变异子，开展了本研究。方法：通过添加...
目的：百日咳毒素既是百日咳杆菌的主要毒性因子，又是重要的保护性抗原，其Ｓ１亚单位具有ＡＤＰ核糖转移酶活性和免疫保护性决定簇。为高效表达前构建的一个丧失酶活性但仍保持保护决定簇的Ｓ１变异子，开展了本研究。方法：通过添加人流感病毒血凝素基因信号序列或嵌膜序列的方法，对天然和变异Ｓ１亚单位基因片段作了遗传学修饰。然后使用重组杆状病毒技术使这些Ｓ１亚单位在昆虫细胞和昆虫幼虫中实现了高水平表达。结果：这些重组Ｓ１的表达水平介于每万个昆虫卵细胞０１８～１９３μｇ或每只昆虫幼虫０４６～４９８ｍｇ之间。天然信号肽和ＨＡ信号肽均可完整表达，但后者的切割效率（６１％～８１％）比前者（１６％～１９％）更高。所有带信号肽的Ｓ１亚单位均呈异质性表达（双带）。结论：重组Ｓ１亚单位的表达是高效和正确的，表达的异质性是由于信号肽切割不完全的缘故。
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关键词
百日咳毒素
S1亚单位
重组杆状病毒
分子修饰
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职称材料
低氧对LLC-PK_1细胞增殖及去分化的影响
2
作者
梅长林
陈蕾
宋吉
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
1999年第2期84-86,共3页
目的：研究低氧对近端肾小管细胞株（ＬＬＣ－ＰＫ１）细胞增殖和去分化的作用。方法：ＬＬＣ－ＰＫ１细胞分别置于低氧（３％Ｏ２）和正常氧（１８％Ｏ２）孵箱中培养，用３Ｈ－胸腺嘧啶掺入法和细胞计数，观察细胞增殖情况；以钠依赖...
目的：研究低氧对近端肾小管细胞株（ＬＬＣ－ＰＫ１）细胞增殖和去分化的作用。方法：ＬＬＣ－ＰＫ１细胞分别置于低氧（３％Ｏ２）和正常氧（１８％Ｏ２）孵箱中培养，用３Ｈ－胸腺嘧啶掺入法和细胞计数，观察细胞增殖情况；以钠依赖葡萄糖和氨基异丁酸（ＡＩＢ）转运为指标，观察细胞分化程度；用放射核素法测定蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）活性。结果：与正常氧培养比较，低氧培养１６ｈ，３Ｈ－胸腺嘧啶掺入显著增加；培养２４ｈ，细胞数显著增加；培养７２ｈ，细胞摄取α－甲基糖甙和ＡＩＢ显著降低。细胞低氧培养４ｈ，细胞膜与细胞质ＰＫＣ活性比率增高，随后降至原先水平；但继续培养至２４ｈ，ＰＫＣ活性再次增高，直至７２ｈ，表明ＰＫＣ呈急性和持续双相激活。ＰＫＣ抑制剂可显著抑制低氧诱导的３Ｈ－胸腺嘧啶掺入，并显著增加α－甲基糖甙和ＡＩＢ转运。结论：慢性低氧可诱导ＬＬＣ－ＰＫ１细胞的增殖和去分化。
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关键词
低氧
LLC-PK1细胞
细胞增殖
细胞分化
肾疾病
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职称材料
题名
百日咳毒素S1亚单位的分子修饰及在重组杆状病毒中的表达
被引量：
4
1
作者
于康震
Burnette WN
Kaslow HR
Mar VL
Ahmad S
Yilma TD
机构
中国农业科
学院
哈尔滨兽医研究所
美国
加利福尼亚大学
兽
医学院
美国南加利福尼亚大学医学院
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1999年第2期52-55,共4页
基金
国家自然科学基金
文摘
目的：百日咳毒素既是百日咳杆菌的主要毒性因子，又是重要的保护性抗原，其Ｓ１亚单位具有ＡＤＰ核糖转移酶活性和免疫保护性决定簇。为高效表达前构建的一个丧失酶活性但仍保持保护决定簇的Ｓ１变异子，开展了本研究。方法：通过添加人流感病毒血凝素基因信号序列或嵌膜序列的方法，对天然和变异Ｓ１亚单位基因片段作了遗传学修饰。然后使用重组杆状病毒技术使这些Ｓ１亚单位在昆虫细胞和昆虫幼虫中实现了高水平表达。结果：这些重组Ｓ１的表达水平介于每万个昆虫卵细胞０１８～１９３μｇ或每只昆虫幼虫０４６～４９８ｍｇ之间。天然信号肽和ＨＡ信号肽均可完整表达，但后者的切割效率（６１％～８１％）比前者（１６％～１９％）更高。所有带信号肽的Ｓ１亚单位均呈异质性表达（双带）。结论：重组Ｓ１亚单位的表达是高效和正确的，表达的异质性是由于信号肽切割不完全的缘故。
关键词
百日咳毒素
S1亚单位
重组杆状病毒
分子修饰
Keywords
Pertussis toxin(PT) S1 subunit Recombinant baculovirus(rBV) Expression
分类号
R516.602Q7 [医药卫生—内科学]
Q784 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
低氧对LLC-PK_1细胞增殖及去分化的影响
2
作者
梅长林
陈蕾
宋吉
机构
第二军医
大学
长征医院肾内科
美国南加利福尼亚大学医学院
内科系
出处
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
1999年第2期84-86,共3页
文摘
目的：研究低氧对近端肾小管细胞株（ＬＬＣ－ＰＫ１）细胞增殖和去分化的作用。方法：ＬＬＣ－ＰＫ１细胞分别置于低氧（３％Ｏ２）和正常氧（１８％Ｏ２）孵箱中培养，用３Ｈ－胸腺嘧啶掺入法和细胞计数，观察细胞增殖情况；以钠依赖葡萄糖和氨基异丁酸（ＡＩＢ）转运为指标，观察细胞分化程度；用放射核素法测定蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）活性。结果：与正常氧培养比较，低氧培养１６ｈ，３Ｈ－胸腺嘧啶掺入显著增加；培养２４ｈ，细胞数显著增加；培养７２ｈ，细胞摄取α－甲基糖甙和ＡＩＢ显著降低。细胞低氧培养４ｈ，细胞膜与细胞质ＰＫＣ活性比率增高，随后降至原先水平；但继续培养至２４ｈ，ＰＫＣ活性再次增高，直至７２ｈ，表明ＰＫＣ呈急性和持续双相激活。ＰＫＣ抑制剂可显著抑制低氧诱导的３Ｈ－胸腺嘧啶掺入，并显著增加α－甲基糖甙和ＡＩＢ转运。结论：慢性低氧可诱导ＬＬＣ－ＰＫ１细胞的增殖和去分化。
关键词
低氧
LLC-PK1细胞
细胞增殖
细胞分化
肾疾病
Keywords
anoxia
LLC PK 1 cells
proliferation
differentiation
分类号
R594.3 [医药卫生—内科学]
R692 [医药卫生—泌尿科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
百日咳毒素S1亚单位的分子修饰及在重组杆状病毒中的表达
于康震
Burnette WN
Kaslow HR
Mar VL
Ahmad S
Yilma TD
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1999
4
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下载PDF
职称材料
2
低氧对LLC-PK_1细胞增殖及去分化的影响
梅长林
陈蕾
宋吉
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
1999
0
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职称材料
已选择
0
条
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引证文献
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