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鲤鱼春季病毒血症病毒磷蛋白基因的克隆与原核表达
被引量：
2
1
作者
李月红
付云红
+2 位作者
Julia Pridgeon
宋琳
张东鸣
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2012年第7期59-63,共5页
【目的】克隆鲤鱼春季病毒血症病毒(SVCV)的磷蛋白(P蛋白)基因,并对其进行原核表达,为进一步制备SVCV P蛋白单克隆抗体及建立新的SVCV诊断方法奠定基础。【方法】采用RT-PCR方法扩增SVCV P蛋白基因,将其克隆入pET-28a(+)载体中,获得原...
【目的】克隆鲤鱼春季病毒血症病毒(SVCV)的磷蛋白(P蛋白)基因,并对其进行原核表达,为进一步制备SVCV P蛋白单克隆抗体及建立新的SVCV诊断方法奠定基础。【方法】采用RT-PCR方法扩增SVCV P蛋白基因,将其克隆入pET-28a(+)载体中,获得原核重组表达质粒pET28-P,进行原核表达。将该重组原核表达质粒转化至大肠杆菌Rosetta感受态细胞中,用0.4mmol/L IPTG进行诱导表达,用镍亲和层析试剂盒对表达产物进行纯化,分别用SDS-PAGE和Western Blotting方法对表达产物进行鉴定。【结果】成功克隆了SVCV P蛋白基因,该基因长度为933bp。成功构建了原核重组表达质粒pET28-P,其诱导表达产物分子质量约为37ku;表达的重组P蛋白可被SVCV阳性血清所识别。【结论】成功克隆了SVCV P蛋白基因,获得了分子质量约为37ku的重组P蛋白。
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关键词
鲤春病毒血症病毒
P蛋白
原核表达
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职称材料
题名
鲤鱼春季病毒血症病毒磷蛋白基因的克隆与原核表达
被引量：
2
1
作者
李月红
付云红
Julia Pridgeon
宋琳
张东鸣
机构
吉林
农业
大学
动物
科技学院
美国农业部水产动物健康研究实验室
出处
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2012年第7期59-63,共5页
基金
国家自然科学基金项目(30972191
30671621)
+1 种基金
吉林省科技发展计划项目(20100232)
吉林省产业技术研究与开发项目(2011-002-1)
文摘
【目的】克隆鲤鱼春季病毒血症病毒(SVCV)的磷蛋白(P蛋白)基因,并对其进行原核表达,为进一步制备SVCV P蛋白单克隆抗体及建立新的SVCV诊断方法奠定基础。【方法】采用RT-PCR方法扩增SVCV P蛋白基因,将其克隆入pET-28a(+)载体中,获得原核重组表达质粒pET28-P,进行原核表达。将该重组原核表达质粒转化至大肠杆菌Rosetta感受态细胞中,用0.4mmol/L IPTG进行诱导表达,用镍亲和层析试剂盒对表达产物进行纯化,分别用SDS-PAGE和Western Blotting方法对表达产物进行鉴定。【结果】成功克隆了SVCV P蛋白基因,该基因长度为933bp。成功构建了原核重组表达质粒pET28-P,其诱导表达产物分子质量约为37ku;表达的重组P蛋白可被SVCV阳性血清所识别。【结论】成功克隆了SVCV P蛋白基因,获得了分子质量约为37ku的重组P蛋白。
关键词
鲤春病毒血症病毒
P蛋白
原核表达
Keywords
spring viremia of carp virus（SVCV）； phosphoprotein； prokaryotic expression
分类号
S941.41 [农业科学—水产养殖]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
鲤鱼春季病毒血症病毒磷蛋白基因的克隆与原核表达
李月红
付云红
Julia Pridgeon
宋琳
张东鸣
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2012
2
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