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rd12小鼠短波长敏感的视锥细胞变性过程研究
被引量：
1
1
作者
黎霞
张华
+1 位作者
戴旭锋
庞继景
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第11期970-975,共6页
背景视网膜色素变性是先天性盲的重要原因之一，由于视网膜色素变性患者视杆细胞为原发性变性，因此无法了解视细胞变性的机制和过程。研究发现Leber先天性黑矇（LCA）自发突变小鼠具有与视网膜色素变性类似的自然过程，有助于深入探讨...
背景视网膜色素变性是先天性盲的重要原因之一，由于视网膜色素变性患者视杆细胞为原发性变性，因此无法了解视细胞变性的机制和过程。研究发现Leber先天性黑矇（LCA）自发突变小鼠具有与视网膜色素变性类似的自然过程，有助于深入探讨视网膜色素变性的发病机制及确定疾病基因治疗靶点。目的研究视网膜色素变性模型LCA自发突变小鼠视网膜短波长敏感的视锥细胞自然变性过程。方法按出生后天数（P）取P14、P21、P35、P90的遗传性视网膜疾病LCA的自发突变动物模型Rpe65rd12（B6[A]-Rpe65rd12/J，rd12）小鼠各5只，同时选择鼠龄匹配的野生型C57BL/6J（B6）小鼠作为对照。采用Roland Q450SC UV视觉电生理检测仪行小鼠视网膜电图（ERG）检查，采用单次白色发光二极管（LED）闪光刺激记录总视锥细胞反应，刺激强度分别为1.00 cds/m2和1.96 cds/m2；采用紫外光闪光刺激记录短波长紫外光（UV）敏感的视锥细胞反应，刺激波长为（363±6）nm，刺激强度分别为2.0 mWs/m2和3.0 mWs/m2。ERG记录后次日处死小鼠并制备视网膜铺片，分别采用FITC荧光标记的花生凝集素（FITC-PNA）和Cy3荧光染色法检测2个组不同鼠龄小鼠视网膜中总视锥细胞和UV敏感的视锥细胞的分布和数量变化。结果P14 rd12小鼠明适应ERG反应为负波型，各波潜伏期延长，UV敏感的视锥细胞ERG各波记录不到。P21 rd12小鼠视锥细胞ERG b波振幅较野生型B6小鼠下降了约75%，b波潜伏期为（102.80±11.39）ms，较B6小鼠的（43.40±5.60）ms明显延长，差异有统计学意义（t＝－8.106，P＝0.001）；P21、P35和P90野生型B6小鼠UV敏感的视锥细胞ERG b波振幅分别为（59.60±36.00）、（82.40±12.22）和（68.43±17.63）μV，P21、P35和P90 rd12小鼠UV敏感的视锥细胞反应均记录不到。免疫荧光检测显示，P14野生型B6小鼠视网膜视锥细胞较多，呈绿色荧光，大量的视蛋白主要分布在视网膜腹部鼻侧象限UV敏感的视锥细胞中，呈红色荧光，P14、P21、P35 rd12小鼠视网膜中视锥细胞逐渐减少，绿色荧光逐渐减弱，UV敏感的视锥细胞呈散在表达。结论rd12小鼠出生后早期即出现视锥细胞的数量减少和功能异常，短波长敏感的视锥细胞的丢失和功能异常更早于中长波长的视锥细胞。
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关键词
视网膜变性/先天性
眼蛋白/代谢
光感受器/异常
视网膜电图
荧光抗体技术
LEBER
先天性黑噱
近交系C57BL小鼠
动物模型
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职称材料
题名
rd12小鼠短波长敏感的视锥细胞变性过程研究
被引量：
1
1
作者
黎霞
张华
戴旭锋
庞继景
机构
广西医科
大学
第一附属医院
眼科
温州医科
大学
眼视光学院
美国佛罗里达大学眼科
出处
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第11期970-975,共6页
基金
国家自然科学基金项目（81260155）
广西省自然科学基金项目（2012GXNSFAA053096）
文摘
背景视网膜色素变性是先天性盲的重要原因之一，由于视网膜色素变性患者视杆细胞为原发性变性，因此无法了解视细胞变性的机制和过程。研究发现Leber先天性黑矇（LCA）自发突变小鼠具有与视网膜色素变性类似的自然过程，有助于深入探讨视网膜色素变性的发病机制及确定疾病基因治疗靶点。目的研究视网膜色素变性模型LCA自发突变小鼠视网膜短波长敏感的视锥细胞自然变性过程。方法按出生后天数（P）取P14、P21、P35、P90的遗传性视网膜疾病LCA的自发突变动物模型Rpe65rd12（B6[A]-Rpe65rd12/J，rd12）小鼠各5只，同时选择鼠龄匹配的野生型C57BL/6J（B6）小鼠作为对照。采用Roland Q450SC UV视觉电生理检测仪行小鼠视网膜电图（ERG）检查，采用单次白色发光二极管（LED）闪光刺激记录总视锥细胞反应，刺激强度分别为1.00 cds/m2和1.96 cds/m2；采用紫外光闪光刺激记录短波长紫外光（UV）敏感的视锥细胞反应，刺激波长为（363±6）nm，刺激强度分别为2.0 mWs/m2和3.0 mWs/m2。ERG记录后次日处死小鼠并制备视网膜铺片，分别采用FITC荧光标记的花生凝集素（FITC-PNA）和Cy3荧光染色法检测2个组不同鼠龄小鼠视网膜中总视锥细胞和UV敏感的视锥细胞的分布和数量变化。结果P14 rd12小鼠明适应ERG反应为负波型，各波潜伏期延长，UV敏感的视锥细胞ERG各波记录不到。P21 rd12小鼠视锥细胞ERG b波振幅较野生型B6小鼠下降了约75%，b波潜伏期为（102.80±11.39）ms，较B6小鼠的（43.40±5.60）ms明显延长，差异有统计学意义（t＝－8.106，P＝0.001）；P21、P35和P90野生型B6小鼠UV敏感的视锥细胞ERG b波振幅分别为（59.60±36.00）、（82.40±12.22）和（68.43±17.63）μV，P21、P35和P90 rd12小鼠UV敏感的视锥细胞反应均记录不到。免疫荧光检测显示，P14野生型B6小鼠视网膜视锥细胞较多，呈绿色荧光，大量的视蛋白主要分布在视网膜腹部鼻侧象限UV敏感的视锥细胞中，呈红色荧光，P14、P21、P35 rd12小鼠视网膜中视锥细胞逐渐减少，绿色荧光逐渐减弱，UV敏感的视锥细胞呈散在表达。结论rd12小鼠出生后早期即出现视锥细胞的数量减少和功能异常，短波长敏感的视锥细胞的丢失和功能异常更早于中长波长的视锥细胞。
关键词
视网膜变性/先天性
眼蛋白/代谢
光感受器/异常
视网膜电图
荧光抗体技术
LEBER
先天性黑噱
近交系C57BL小鼠
动物模型
Keywords
Retinal degeneration/congenital
Eye proteins/metabolism
Photoreceptor/pathology
Electroretinography
Fluorescent antibody technique
Leber congenital amaurosis
Mice, inbred C57BL
Diseasemodels, animal
分类号
R774.13 [医药卫生—眼科]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
rd12小鼠短波长敏感的视锥细胞变性过程研究
黎霞
张华
戴旭锋
庞继景
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017
1
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