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丙型肝炎病毒NS5A基因的克隆以及在原核和昆虫细胞中表达的研究
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作者 梁昌镛 He Bin +2 位作者 胡志红 王汉中 陈新文 《华中师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期236-241,共6页
克隆了丙型肝炎病毒的NS5A基因,并在细菌和昆虫两种不同的系统中成功地进行了该基因的表达.利用PCR方法获得了NS5A完整的编码区并克隆到原核表达载体pGEX-KG上,在大肠杆菌中诱导表达了78kDa的NS5A与GST的融合蛋白.同时发现,融合蛋白被... 克隆了丙型肝炎病毒的NS5A基因,并在细菌和昆虫两种不同的系统中成功地进行了该基因的表达.利用PCR方法获得了NS5A完整的编码区并克隆到原核表达载体pGEX-KG上,在大肠杆菌中诱导表达了78kDa的NS5A与GST的融合蛋白.同时发现,融合蛋白被部分切割为50kDa的NS5A和28kDa的GST.在原核细胞中表达的78kDa和50kDa两种蛋白均具有较高的免疫原性,通过免疫家兔获得了高特异性的兔抗血清.另外,利用两种昆虫表达系统,即AcMN-PV和HaSNPV的Bac-to-Bac系统对NS5A进行了表达,表达产物为58kDa. 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 NS5A基因 基因克隆 原核细胞 昆虫细胞 基因表达 免疫原性
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