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黑芥和埃塞俄比亚芥PAP2基因克隆及B基因组PAP2功能验证
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作者 谢娜娜 黄伟 +6 位作者 高国应 张大为 周定港 吴金锋 向建华 刘丽莉 严明理 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期274-283,共10页
PAP2(Production of anthocyanin pigment 2)编码MYB转录因子,与bHLH、WD40形成MYB-bHLH-WD40复合体来调控花青素合成。本研究从埃塞俄比亚芥和黑芥中分别克隆出2个和1个PAP2基因拷贝,分别命名为BcaB.PAP2、BcaC.PAP2、BniB.PAP2,这三... PAP2(Production of anthocyanin pigment 2)编码MYB转录因子,与bHLH、WD40形成MYB-bHLH-WD40复合体来调控花青素合成。本研究从埃塞俄比亚芥和黑芥中分别克隆出2个和1个PAP2基因拷贝,分别命名为BcaB.PAP2、BcaC.PAP2、BniB.PAP2,这三个基因均由3个外显子和2个内含子组成,均编码247个氨基酸。基于本研究克隆的PAP2基因序列和已报道的其他芸薹属PAP2基因序列,设计了3对能分别检测A、B、C基因组PAP2基因的引物,通过等位特异PCR可以区分芸薹属禹氏三角中的6个物种PAP2的基因组来源。选取芥菜型油菜B基因组的BjuB.PAP2基因构建过表达载体,转化拟南芥,其叶片变紫,表明PAP2基因正调控花青素合成。遮光处理10天后紫叶埃塞俄比亚芥的叶片紫色变淡,花青素含量下降了41.22%。荧光定量PCR和转录组研究表明,遮光处理植株叶片中BcaB.PAP2和BcaC.PAP2表达量均下降,花青素合成的结构基因查尔酮合成酶基因(CHS)、查尔酮异构酶基因(CHI)、黄烷酮3-羟化酶基因(F3H)、二氢黄酮醇还原酶基因(DFR)、花青素合成酶基因(ANS)、类黄酮3-葡糖基转移酶基因(UFGT)等基因的表达量也下降。本研究完成了对芸薹属植物中埃塞俄比亚芥和黑芥PAP2基因的克隆,并对其进行进化分析。根据本实验中克隆及其他已报道的PAP2基因序列设计等位基因特异性PCR引物,为芸薹属种间杂交后代PAP2基因的基因组传递鉴定提供了分子标记。通过BjuB.PAP2基因转拟南芥植株结果表明PAP2基因参与花青素的积累。紫叶埃塞俄比亚芥经遮光处理后,发现BcaPAP2基因及花青素合成结构基因的表达受光照的诱导。本研究在芸薹属中克隆PAP2基因,并初步验证PAP2的功能,为进一步解析芸薹属植物花青素合成的调控机制提供参考。 展开更多
关键词 PAP2基因 花青素 芸薹属 克隆 功能验证
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镉胁迫对甘蓝型油菜幼苗生长及基因表达的影响 被引量:13
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作者 张大为 杜云燕 +4 位作者 吴金锋 周定港 刘丽莉 刘忠松 严明理 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期613-622,共10页
为明晰镉胁迫对甘蓝型油菜幼苗生长的影响,通过盆栽实验,探讨了油菜在不同浓度镉胁迫下表型、生理响应、镉积累特征及基因表达变化。结果表明油菜对5mg/kg镉处理有一定耐受能力,表型相比对照差异不显著;但较高浓度的镉胁迫(30,50 mg/kg... 为明晰镉胁迫对甘蓝型油菜幼苗生长的影响,通过盆栽实验,探讨了油菜在不同浓度镉胁迫下表型、生理响应、镉积累特征及基因表达变化。结果表明油菜对5mg/kg镉处理有一定耐受能力,表型相比对照差异不显著;但较高浓度的镉胁迫(30,50 mg/kg)会显著抑制油菜幼苗生长,主要表现为株高、鲜重、叶面积、叶绿素、可溶性糖含量相比对照显著降低,同时SOD、POD酶活性、可溶性蛋白含量相比对照显著升高。油菜幼苗中镉含量随着处理浓度增大而逐步增加,且镉胁迫会显著影响油菜对Mn、Mg、Zn、Cu等必需金属离子的吸收。比较转录组分析发现镉胁迫下差异表达基因主要富集在抗氧化活性、光合作用、ATP酶活性、细胞壁形成等途径。对HMA基因家族表达模式分析表明镉胁迫下油菜根中HMA3基因上调表达,HMA2和HMA4基因下调表达,上述基因的差异协调表达可能对油菜适应镉胁迫发挥了重要作用。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 镉处理 表型 生理响应 比较转录组分析
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生物有机肥对龙须草修复重金属污染土壤效率的影响 被引量:1
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作者 于辉 《湖南农业科学》 2021年第5期34-37,共4页
将生物有机肥与龙须草联合修复重金属污染土壤,研究生物有机肥对污染土壤的营养成分、重金属含量、微生物生物量、酶活性以及龙须草重金属积累量的影响。结果表明:与未施加生物有机肥的龙须草对照相比,施加生物有机肥的龙须草生长360 d... 将生物有机肥与龙须草联合修复重金属污染土壤,研究生物有机肥对污染土壤的营养成分、重金属含量、微生物生物量、酶活性以及龙须草重金属积累量的影响。结果表明:与未施加生物有机肥的龙须草对照相比,施加生物有机肥的龙须草生长360 d后,土壤有机质含量增加了68.6%,总氮、总磷和总钾含量分别是对照的4.5、2.5和1.8倍。土壤微生物生物量增加,土壤酶活性均有不同程度提高。龙须草生物量和地上部镉铅吸收总量分别比对照高34.7%和41.2%,土壤中镉铅有效态则显著下降。由此可见,在龙须草修复重金属污染土壤中,可添加生物有机肥来提升修复效率。 展开更多
关键词 生物有机肥 龙须草 修复 重金属
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湘莲根际促生菌的筛选及其效应研究
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作者 于辉 肖璐 《湖南农业科学》 2023年第8期50-53,57,共5页
为获得湘莲根际促生菌(Plantgrowth promoting rhizobacteria,PGPR)并明确其促生特性,试验从湘莲根际土壤中分离出7株固氮解磷菌,通过对其功能指标的对比挑选出菌株XL7,其具有良好的固氮解磷和产IAA能力。经鉴定该菌株为高地芽孢杆菌(Ba... 为获得湘莲根际促生菌(Plantgrowth promoting rhizobacteria,PGPR)并明确其促生特性,试验从湘莲根际土壤中分离出7株固氮解磷菌,通过对其功能指标的对比挑选出菌株XL7,其具有良好的固氮解磷和产IAA能力。经鉴定该菌株为高地芽孢杆菌(Bacillus altitudinis)。通过种子萌发、盆栽试验测定菌株对湘莲的促生效应。结果表明:接种XL7能促进种子的萌发,发芽势、发芽率、苗长、苗重和不定根重均高于对照;土壤中矿质态氮、速效磷和速效钾分别提高了5.3%、31.8%和26.1%;莲幼苗植株生物量、全氮、全磷和全钾分别增加了25.0%、18.3%、80.5%和38.7%。这表明该多功能菌株对湘莲具有良好的促生作用。 展开更多
关键词 湘莲 根际促生菌 筛选 促生
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甘蓝型油菜秸秆水浸液对水稻萌发和生长的化感作用 被引量:4
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作者 邹子湘 刘营 +5 位作者 周定港 刘丽莉 张大为 吴金锋 李莓 严明理 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期1286-1295,共10页
为探究油-稻种植制度中甘蓝型油菜秸秆对水稻的影响,研究了不同浓度(0、25%、50%和75%)的3种油菜(沣油737、湘杂油553和中双11)秸秆水浸液处理下,五优308和C两优343两个水稻品种种子萌发和幼苗生长的情况。结果表明,与对照相比,秸秆水... 为探究油-稻种植制度中甘蓝型油菜秸秆对水稻的影响,研究了不同浓度(0、25%、50%和75%)的3种油菜(沣油737、湘杂油553和中双11)秸秆水浸液处理下,五优308和C两优343两个水稻品种种子萌发和幼苗生长的情况。结果表明,与对照相比,秸秆水浸液总体增加了幼苗的苗高和鲜重,低浓度(25%)下会提高水稻种子的发芽率、发芽指数和幼苗的根长,高浓度(50%和75%)下则起抑制作用。随着浓度增加,湘杂油553的秸秆水浸液提高了五优308幼苗的可溶性蛋白含量,同时降低了其总超氧化物歧化酶(T-SOD)和过氧化物酶(POD)活力;但对C两优343幼苗表现相反的化感作用,显著降低了其可溶性蛋白含量,而提高了其T-SOD和POD活力,25%浓度下显著降低了其丙二醛(MDA)含量。75%浓度的中双11水浸液显著提高了五优308幼苗的MDA含量,并降低了POD活力。25%浓度的沣油737显著降低了C两优343的可溶性蛋白含量而提高了T-SOD和POD活力。综合结果表明,油菜秸秆水浸液浓度越高,对水稻的化感作用越强,且不同油菜品种水浸液对不同水稻品种的化感作用存在差异,本研究中沣油737和五优308是比较适合油-稻轮作的组合。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜秸秆 水浸液 种子萌发 幼苗生长
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甘蓝型油菜ZIP基因家族全基因组鉴定与表达分析 被引量:3
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作者 贺丹 杨太桦 +6 位作者 黎婷 吴金锋 彭佳师 刘丽莉 张大为 严明理 李再云 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期392-404,共13页
ZIP基因家族是重要的转运蛋白类基因家族,主要参与金属阳离子的吸收和转运,在植物生长发育和重金属胁迫响应中发挥重要作用。为解析甘蓝型油菜中ZIP基因家族,采用生物信息学方法在甘蓝型油菜中鉴定到51个ZIP基因家族成员,对比芸薹属三... ZIP基因家族是重要的转运蛋白类基因家族,主要参与金属阳离子的吸收和转运,在植物生长发育和重金属胁迫响应中发挥重要作用。为解析甘蓝型油菜中ZIP基因家族,采用生物信息学方法在甘蓝型油菜中鉴定到51个ZIP基因家族成员,对比芸薹属三个基本种发现ZIP基因家族在A、C亚基因组上有串联重复现象。以甘蓝型油菜品种中双11(ZS11)全基因组为参考基因组,将ZIP基因家族定位到17条染色体上,预测到10种Motif基序,均包含ZIP结构域,并对ZIP基因家族上游3 kb的启动子区域进行了顺式作用元件测序。通过系统进化树分析,将甘蓝型油菜ZIP基因家族分成3大类,在芸薹属三个基本种的进化具有保守性。此外,ZIP基因家族在甘蓝型油菜中表现出组织特异性表达特点,并且在油菜不同组织和不同发育时期中BnaZIP1、BnaZIP4、BnaZIP5、BnaZIP6、BnaZIP10、BnaZIP11和BnaIRT3基因。用不同浓度镉处理油菜,发现在叶和根中都被诱导表达的基因是BnaIRT1.A01a,该基因在油菜重金属镉胁迫响应中可能发挥重要作用。本研究结果为后续ZIP基因家族生物学功能研究提供了一定的参考。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 ZIP基因家族 镉处理 全基因组分析
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甘蓝型油菜BnFUL基因家族全基因组鉴定与表达分析 被引量:3
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作者 刘营 江姚兰 +6 位作者 尹泽 刘佳 张大为 吴金锋 邹子湘 周定港 严明理 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期35-44,共10页
甘蓝型油菜(Brassicanapus L.)成熟后期角果易开裂,导致减产并严重阻碍机械化收割进程。为挖掘油菜角果抗裂角基因资源,解析抗裂分子机制,采用生物信息学方法,研究MADS-box类转录因子基因FUL在油菜抗裂角性状中的作用,在品种中双11号(ZS... 甘蓝型油菜(Brassicanapus L.)成熟后期角果易开裂,导致减产并严重阻碍机械化收割进程。为挖掘油菜角果抗裂角基因资源,解析抗裂分子机制,采用生物信息学方法,研究MADS-box类转录因子基因FUL在油菜抗裂角性状中的作用,在品种中双11号(ZS11)中鉴定到5个BnFUL基因,分布于A02、A03、C02、C07和C09号染色体上,所编码的蛋白质理化性质相近,蛋白二级结构以α-螺旋为主;基因结构分析表明BnFUL基因均含有8个外显子;5个家族成员均有1个MADS_MEF2_like结构域和1个K-box结构域;家族成员均含有7个Motif;进化树和共线性分析表明,在进化过程中BnFUL基因家族十分保守;表达模式上,基因家族成员在生长发育后期及茎、叶和果实中可高量表达。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 FRUITFULL(FUL) 角果 中双11号(ZS11) 抗裂角性
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食糜样本中11种生物胺同步检测方法的建立 被引量:3
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作者 任梦雅 冯潇慧 +3 位作者 解竞静 文晓宾 孟庆石 刘丽莉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1320-1331,共12页
旨在建立一种利用液质联用(liquid chromatography mass spectrometry,LC-MS)技术实现对猪肠道食糜中多种生物胺进行同步检测的方法。试验首先优化了丹磺酰氯(dansyl chloride,DNS)对生物胺的衍生条件,并进一步确定了肠道食糜样品中生... 旨在建立一种利用液质联用(liquid chromatography mass spectrometry,LC-MS)技术实现对猪肠道食糜中多种生物胺进行同步检测的方法。试验首先优化了丹磺酰氯(dansyl chloride,DNS)对生物胺的衍生条件,并进一步确定了肠道食糜样品中生物胺的最佳净化方法。结果显示,衍生条件在衍生剂浓度为8 mg·mL^-1,衍生温度为40℃的条件下,衍生90 min为最佳。生物胺净化方法确定为先用乙酸乙酯进行提取,衍生结束后再用乙酸乙酯进行萃取的组合方式提取生物胺的效果最好;11种生物胺在5~1000μg·L^-1的质量浓度范围内定量结果呈良好的线性关系(R^2>0.99),检出限和定量限分别为0.01~0.23μg·L^-1和0.03~0.76μg·L^-1;各生物胺的日内相对标准偏差在0.73%~7.92%,日间相对标准偏差在0.07%~8.67%。最后采用本方法对仔猪回肠、盲肠、结肠和直肠食糜样品中的生物胺进行检测,初步确定了11种生物胺在不同肠段食糜中的含量分布。通过对仔猪回肠、盲肠、结肠和直肠中的食糜样品进行检测,发现食糜中的生物胺主要为亚精胺、腐胺、尸胺、精胺和组胺,而酪胺、1,7-二氨基庚烷、5-羟色胺和胍基丁胺4种生物胺含量较少,色胺和苯乙胺未检出。综上所述,本试验建立的方法具有结果准确、灵敏度高、重现性好等优点,可用于仔猪不同肠道段食糜中多种生物胺的同步检测。 展开更多
关键词 肠道食糜 生物胺 检测方法 液质联用
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芥菜型油菜NRAMP基因家族的鉴定与表达分析 被引量:1
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作者 黎婷 王家琪 +5 位作者 霍卫聪 吴金锋 彭佳师 周定港 严明理 张大为 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期711-719,共9页
芥菜型油菜(Brassica juncea)对重金属有一定的耐受和积累能力,NRAMP(natural resistance associated macrophage protein,天然抗性相关巨噬细胞蛋白)蛋白参与金属离子的吸收和转运,在植物应对重金属胁迫响应中发挥重要作用。本研究以6... 芥菜型油菜(Brassica juncea)对重金属有一定的耐受和积累能力,NRAMP(natural resistance associated macrophage protein,天然抗性相关巨噬细胞蛋白)蛋白参与金属离子的吸收和转运,在植物应对重金属胁迫响应中发挥重要作用。本研究以6个拟南芥NRAMP同源基因为参考,从芥菜型油菜中鉴定出18个BjNRAMP基因家族成员,分别定位在12条染色体上。系统进化分析结果表明BjNRAMP基因分属两个进化枝,其基因拷贝数目相比拟南芥增多可能是由于芥菜型油菜基因组三倍化所导致。对芥菜型油菜在不同浓度镉胁迫下根和叶的转录组测序数据进行分析发现,BjNRAMP基因的表达表现出组织特异性,其中BjNRAMP1.4基因在镉浓度为30 mg/kg胁迫下在根中被诱导表达;BjNRAMP2.2基因在镉浓度为10 mg/kg胁迫下在叶片中被诱导表达,而在根中的表达则受到抑制。克隆上述基因并转化至酵母,结果表明过表达BjNRAMP1.4可显著提高镉敏感型突变体酵母对镉的耐受性,而过表达BjNRAMP2.2提升作用有限,不及BjNRAMP1.4。本研究将为研究芥菜型油菜NRAMP基因家族成员结构以及功能提供一定的参考。 展开更多
关键词 芥菜型油菜 NRAMP基因家族 重金属 基因表达
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