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DARPP-32基因对SH-SY5Y细胞药物敏感性的调节作用
1
作者
张宏卫
刘丽华
李伟
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第5期977-981,共5页
目的:探讨DARPP-32基因对人神经母细胞瘤细胞药物敏感性的调节作用。方法:构建DARPP-32基因的真核表达载体和小干扰RNA载体,并将它们转导入人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y,G418筛选后获得稳定转染的阳性克隆后,应用RT-PCR和Western blottin...
目的:探讨DARPP-32基因对人神经母细胞瘤细胞药物敏感性的调节作用。方法:构建DARPP-32基因的真核表达载体和小干扰RNA载体,并将它们转导入人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y,G418筛选后获得稳定转染的阳性克隆后,应用RT-PCR和Western blotting进行鉴定;MTT法检测细胞转染前后药物敏感性的变化;流式细胞仪检测细胞转染前后对阿霉素的蓄积浓度的变化;RT-PCR和Western blotting检测细胞转染前后耐药相关蛋白P-gp、MRP和凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达变化。结果:成功构建了DARPP-32基因的真核表达载体和小干扰RNA载体;筛选到稳定的DARPP-32高/低表达的神经母细胞瘤细胞模型;MTT试验和流式细胞仪检测结果显示,上调DARPP-32的表达能够显著增强神经母细胞瘤细胞对长春新碱、阿霉素、5-氟尿嘧啶和顺铂的敏感性,提高细胞内阿霉素的蓄积(P<0.05),转染DARPP-32小干扰RNA后的细胞对化疗药物的敏感性降低,细胞内的阿霉素蓄积量显著减少(P<0.05);RT-PCR和Westernblotting结果显示,DARPP-32能够下调P-gp和Bcl-2的表达。结论:DARPP-32基因能够调节神经母细胞瘤细胞对化疗药物的敏感性,具有较好的临床应用前景。
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关键词
神经母细胞瘤
基因
DARPP-32
RNA干扰
SH—SY5Y细胞
在线阅读
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职称材料
TSG101小干扰RNA对SH-SY5Y细胞生长和药物敏感性的作用
2
作者
刘丽华
张宏卫
王承忠
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第9期1734-1739,共6页
目的:探讨TSG101基因对人神经母细胞瘤细胞生长和药物敏感性的调节作用。方法:构建TSG101基因的小干扰RNA载体并将其转导入SH-SY5Y细胞,G418筛选后获得稳定转染的阳性克隆后,应用RT-PCR和Western blotting进行鉴定;MTT法和流式细胞仪检...
目的:探讨TSG101基因对人神经母细胞瘤细胞生长和药物敏感性的调节作用。方法:构建TSG101基因的小干扰RNA载体并将其转导入SH-SY5Y细胞,G418筛选后获得稳定转染的阳性克隆后,应用RT-PCR和Western blotting进行鉴定;MTT法和流式细胞仪检测细胞转染前后生长速度和细胞周期的变化;DNAlad-der法和流式细胞仪检测细胞转染前后对顺铂诱导的凋亡的变化;Western blotting检测细胞转染前后凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax,耐药相关蛋白P-gp、MRP的表达变化。结果:成功构建了TSG101的小干扰RNA载体并将其转染SH-SY5Y细胞;筛选到稳定的TSG101低表达的神经母细胞瘤细胞模型;MTT和流式细胞仪检测结果显示,转染TSG101小干扰RNA后的细胞的生长速度显著减慢于对照组(P<0·05),且G1期的细胞比率显著高于对照组(P<0·05);DNAladder法和流式细胞仪检测结果显示,用10mg/LCDDP处理36h后,转染TSG101小干扰RNA后的细胞的凋亡数显著多于对照组(P<0·05),形成DNA条带;Western blotting显示,转染TSG101小干扰RNA后的细胞中Bcl-2和P-gp的表达明显低于对照组。结论:下调TSG101基因能抑制神经母细胞瘤细胞生长,增加细胞对化疗药物的敏感性,提示TSG101在基因治疗中具有较好的临床应用前景。
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关键词
神经母细胞瘤
基因
TSG101
RNA干扰
SH-SY5Y细胞
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职称材料
题名
DARPP-32基因对SH-SY5Y细胞药物敏感性的调节作用
1
作者
张宏卫
刘丽华
李伟
机构
绍兴文理学院医学院附属医院神经科
绍兴
文理
学院
医学院
分子诊断实验室
四川大学华西
医院
神经科
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第5期977-981,共5页
文摘
目的:探讨DARPP-32基因对人神经母细胞瘤细胞药物敏感性的调节作用。方法:构建DARPP-32基因的真核表达载体和小干扰RNA载体,并将它们转导入人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y,G418筛选后获得稳定转染的阳性克隆后,应用RT-PCR和Western blotting进行鉴定;MTT法检测细胞转染前后药物敏感性的变化;流式细胞仪检测细胞转染前后对阿霉素的蓄积浓度的变化;RT-PCR和Western blotting检测细胞转染前后耐药相关蛋白P-gp、MRP和凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达变化。结果:成功构建了DARPP-32基因的真核表达载体和小干扰RNA载体;筛选到稳定的DARPP-32高/低表达的神经母细胞瘤细胞模型;MTT试验和流式细胞仪检测结果显示,上调DARPP-32的表达能够显著增强神经母细胞瘤细胞对长春新碱、阿霉素、5-氟尿嘧啶和顺铂的敏感性,提高细胞内阿霉素的蓄积(P<0.05),转染DARPP-32小干扰RNA后的细胞对化疗药物的敏感性降低,细胞内的阿霉素蓄积量显著减少(P<0.05);RT-PCR和Westernblotting结果显示,DARPP-32能够下调P-gp和Bcl-2的表达。结论:DARPP-32基因能够调节神经母细胞瘤细胞对化疗药物的敏感性,具有较好的临床应用前景。
关键词
神经母细胞瘤
基因
DARPP-32
RNA干扰
SH—SY5Y细胞
Keywords
Neuroblastoma
Genes, DARPP-32
RNA interference
SH-SY5Y cells
分类号
R363 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
TSG101小干扰RNA对SH-SY5Y细胞生长和药物敏感性的作用
2
作者
刘丽华
张宏卫
王承忠
机构
绍兴
文理
学院
医学院
分子诊断实验
绍兴文理学院医学院附属医院神经科
中国科
学院
神经科
学研究所
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第9期1734-1739,共6页
文摘
目的:探讨TSG101基因对人神经母细胞瘤细胞生长和药物敏感性的调节作用。方法:构建TSG101基因的小干扰RNA载体并将其转导入SH-SY5Y细胞,G418筛选后获得稳定转染的阳性克隆后,应用RT-PCR和Western blotting进行鉴定;MTT法和流式细胞仪检测细胞转染前后生长速度和细胞周期的变化;DNAlad-der法和流式细胞仪检测细胞转染前后对顺铂诱导的凋亡的变化;Western blotting检测细胞转染前后凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax,耐药相关蛋白P-gp、MRP的表达变化。结果:成功构建了TSG101的小干扰RNA载体并将其转染SH-SY5Y细胞;筛选到稳定的TSG101低表达的神经母细胞瘤细胞模型;MTT和流式细胞仪检测结果显示,转染TSG101小干扰RNA后的细胞的生长速度显著减慢于对照组(P<0·05),且G1期的细胞比率显著高于对照组(P<0·05);DNAladder法和流式细胞仪检测结果显示,用10mg/LCDDP处理36h后,转染TSG101小干扰RNA后的细胞的凋亡数显著多于对照组(P<0·05),形成DNA条带;Western blotting显示,转染TSG101小干扰RNA后的细胞中Bcl-2和P-gp的表达明显低于对照组。结论:下调TSG101基因能抑制神经母细胞瘤细胞生长,增加细胞对化疗药物的敏感性,提示TSG101在基因治疗中具有较好的临床应用前景。
关键词
神经母细胞瘤
基因
TSG101
RNA干扰
SH-SY5Y细胞
Keywords
Neuroblastoma
Genes, TSG101
RNA interference
SH-SY5Y cells
分类号
R363 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
DARPP-32基因对SH-SY5Y细胞药物敏感性的调节作用
张宏卫
刘丽华
李伟
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
TSG101小干扰RNA对SH-SY5Y细胞生长和药物敏感性的作用
刘丽华
张宏卫
王承忠
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006
0
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