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岩藻多糖通过抑制PI3K/Akt通路诱导人骨肉瘤143B细胞铁死亡
1
作者
林巧
王琪琪
+5 位作者
鲍欣怡
王钰婷
章璐冰
范怡宁
方剑
张云
《中国生物化学与分子生物学报》
北大核心
2025年第9期1298-1309,共12页
岩藻多糖(fucoidan,FUC)是一种天然的海藻类药物。本文前期研究发现,岩藻多糖能显著抑制人骨肉瘤143B细胞活性并诱导其死亡,但是其作用机制不详。铁死亡(ferroptosis)是一种新型细胞死亡方式,目前已经成为治疗肿瘤的重要靶点。本研究旨...
岩藻多糖(fucoidan,FUC)是一种天然的海藻类药物。本文前期研究发现,岩藻多糖能显著抑制人骨肉瘤143B细胞活性并诱导其死亡,但是其作用机制不详。铁死亡(ferroptosis)是一种新型细胞死亡方式,目前已经成为治疗肿瘤的重要靶点。本研究旨在探究FUC诱导143B细胞铁死亡情况,并阐明其潜在的分子机制。采用不同浓度岩藻多糖(0、10、100、400μg/mL)处理143B细胞48 h,每个浓度设4个复孔,每组实验至少重复3次。CCK-8和LDH检测结果显示,岩藻多糖(10、100、400μg/mL)可显著降低143B细胞活力并诱导其死亡;钙黄绿素-乙酰氧基甲酯(calcein-AM)染色、FeRhoNox-1染色和C11 BODIPY 581/591染色结果表明,岩藻多糖显著增加143B细胞内不稳定铁池(LIP)、Fe^(2+)和脂质活性氧(Lip ROS)水平;谷胱甘肽(GSH)检测结果显示,岩藻多糖明显降低细胞内谷胱甘肽含量;RT-qPCR结果显示,岩藻多糖显著降低铁死亡相关因子溶质载体家族7成员11(SLC7A11)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的mRNA水平,增加前列腺素内过氧化物合成酶2(PTGS2)和酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)的mRNA水平;Western印迹分析发现,岩藻多糖显著降低SLC7A11和GPX4蛋白质水平,增加ACSL4蛋白质水平,并减少p-PI3K/PI3K比值、p-AktSer473/Akt和p-AktThr308/Akt比值;免疫荧光染色结果发现,岩藻多糖显著抑制p-AktSer473的核转位。铁死亡抑制剂ferrostatin-1(Fer-1)和铁螯合剂deferoxamine(DFO)可明显抑制岩藻多糖诱导的143B细胞死亡;此外,PI3K/Akt通路的激活剂740Y-P显著抑制岩藻多糖诱导的143B细胞铁超载和脂质过氧化,并恢复SLC7A11和GPX4蛋白质水平。以上结果表明,岩藻多糖可通过抑制PI3K/Akt信号通路诱导143B细胞铁死亡,这可能是预防和治疗骨肉瘤疾病的潜在靶点。
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关键词
岩藻多糖
143B细胞
铁死亡
PI3K/AKT信号通路
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职称材料
题名
岩藻多糖通过抑制PI3K/Akt通路诱导人骨肉瘤143B细胞铁死亡
1
作者
林巧
王琪琪
鲍欣怡
王钰婷
章璐冰
范怡宁
方剑
张云
机构
绍兴文理学院医学院生理学教研室
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
北大核心
2025年第9期1298-1309,共12页
基金
浙江省公益技术应用研究计划(No.LGF18H060006)
绍兴市级医卫生类科技计划项目(No.2020A13064)
+1 种基金
绍兴市级科技计划项目(No.2023A14001)
浙江省大学生科技创新活动计划(No.2023R465021)资助。
文摘
岩藻多糖(fucoidan,FUC)是一种天然的海藻类药物。本文前期研究发现,岩藻多糖能显著抑制人骨肉瘤143B细胞活性并诱导其死亡,但是其作用机制不详。铁死亡(ferroptosis)是一种新型细胞死亡方式,目前已经成为治疗肿瘤的重要靶点。本研究旨在探究FUC诱导143B细胞铁死亡情况,并阐明其潜在的分子机制。采用不同浓度岩藻多糖(0、10、100、400μg/mL)处理143B细胞48 h,每个浓度设4个复孔,每组实验至少重复3次。CCK-8和LDH检测结果显示,岩藻多糖(10、100、400μg/mL)可显著降低143B细胞活力并诱导其死亡;钙黄绿素-乙酰氧基甲酯(calcein-AM)染色、FeRhoNox-1染色和C11 BODIPY 581/591染色结果表明,岩藻多糖显著增加143B细胞内不稳定铁池(LIP)、Fe^(2+)和脂质活性氧(Lip ROS)水平;谷胱甘肽(GSH)检测结果显示,岩藻多糖明显降低细胞内谷胱甘肽含量;RT-qPCR结果显示,岩藻多糖显著降低铁死亡相关因子溶质载体家族7成员11(SLC7A11)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的mRNA水平,增加前列腺素内过氧化物合成酶2(PTGS2)和酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)的mRNA水平;Western印迹分析发现,岩藻多糖显著降低SLC7A11和GPX4蛋白质水平,增加ACSL4蛋白质水平,并减少p-PI3K/PI3K比值、p-AktSer473/Akt和p-AktThr308/Akt比值;免疫荧光染色结果发现,岩藻多糖显著抑制p-AktSer473的核转位。铁死亡抑制剂ferrostatin-1(Fer-1)和铁螯合剂deferoxamine(DFO)可明显抑制岩藻多糖诱导的143B细胞死亡;此外,PI3K/Akt通路的激活剂740Y-P显著抑制岩藻多糖诱导的143B细胞铁超载和脂质过氧化,并恢复SLC7A11和GPX4蛋白质水平。以上结果表明,岩藻多糖可通过抑制PI3K/Akt信号通路诱导143B细胞铁死亡,这可能是预防和治疗骨肉瘤疾病的潜在靶点。
关键词
岩藻多糖
143B细胞
铁死亡
PI3K/AKT信号通路
Keywords
fucoidan(FUC)
143B cells
ferroptosis
PI3K/Akt signaling pathway
分类号
Q255 [生物学—细胞生物学]
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作者
出处
发文年
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1
岩藻多糖通过抑制PI3K/Akt通路诱导人骨肉瘤143B细胞铁死亡
林巧
王琪琪
鲍欣怡
王钰婷
章璐冰
范怡宁
方剑
张云
《中国生物化学与分子生物学报》
北大核心
2025
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