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Dok4和Dok5 PTB结构域融合蛋白的表达和纯化
被引量：
3
1
作者
阎志勇
吴爱群
+4 位作者
张勇
由振东
路长林
周明明
何成
《河南医学研究》
CAS
2003年第2期100-103,共4页
目的 :制备Dok4和Dok5PTB结构域的GST融合蛋白。方法 :用PCR方法分别扩增编码Dok4、Dok5PTB结构域的cDNA ,并将其克隆入表达载体pGEX 4T 3中 ,转化大肠杆菌BL 2 1,构建成表达GST PTB融合蛋白的菌株。经IPTG诱导表达后 ,经Glutathion Sep...
目的 :制备Dok4和Dok5PTB结构域的GST融合蛋白。方法 :用PCR方法分别扩增编码Dok4、Dok5PTB结构域的cDNA ,并将其克隆入表达载体pGEX 4T 3中 ,转化大肠杆菌BL 2 1,构建成表达GST PTB融合蛋白的菌株。经IPTG诱导表达后 ,经Glutathion Sepharose 4B亲和层析柱纯化 ,用SDS PAGE进行分析 ,该融合蛋白的表达量超过菌体总蛋白的 2 5 %。结果 :获得重组的GST 4PTB和GST 5PTB融合蛋白 ,纯度在 95 %以上 ,产物得率约 75 %。结论 :成功制备高纯度Dok4和Dok5PTB结构域的GST融合蛋白 ,为进一步研究磷酸化酪氨酸结合结构域 (PTB)
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关键词
Dook4
DOK5
PTB结构域
融合蛋白
酪氨酸激酶受体
大肠杆菌
纯化
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职称材料
题名
Dok4和Dok5 PTB结构域融合蛋白的表达和纯化
被引量：
3
1
作者
阎志勇
吴爱群
张勇
由振东
路长林
周明明
何成
机构
郑州
大学
医学院
解剖学教研室
第二军医
大学
神经
生物
学教研室
纽约大学mount sinai医学院生理与生物物理学系
出处
《河南医学研究》
CAS
2003年第2期100-103,共4页
基金
国家自然科学基金 ( 3 0 0 70 167)
海外青年学者合作研究基金 ( 3 0 0 2 80 0 3 )
国家 973项目 (G19990 5 40 0 0 )
文摘
目的 :制备Dok4和Dok5PTB结构域的GST融合蛋白。方法 :用PCR方法分别扩增编码Dok4、Dok5PTB结构域的cDNA ,并将其克隆入表达载体pGEX 4T 3中 ,转化大肠杆菌BL 2 1,构建成表达GST PTB融合蛋白的菌株。经IPTG诱导表达后 ,经Glutathion Sepharose 4B亲和层析柱纯化 ,用SDS PAGE进行分析 ,该融合蛋白的表达量超过菌体总蛋白的 2 5 %。结果 :获得重组的GST 4PTB和GST 5PTB融合蛋白 ,纯度在 95 %以上 ,产物得率约 75 %。结论 :成功制备高纯度Dok4和Dok5PTB结构域的GST融合蛋白 ,为进一步研究磷酸化酪氨酸结合结构域 (PTB)
关键词
Dook4
DOK5
PTB结构域
融合蛋白
酪氨酸激酶受体
大肠杆菌
纯化
Keywords
Dok4
Dok5
PTB domain
recombinant protein
分类号
Q51 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Dok4和Dok5 PTB结构域融合蛋白的表达和纯化
阎志勇
吴爱群
张勇
由振东
路长林
周明明
何成
《河南医学研究》
CAS
2003
3
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