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人DNA聚合酶δ结合蛋白PDIP38的克隆、表达和纯化
被引量：
1
1
作者
翁云
Rakhee Gupte
+1 位作者
Marietta Y.W.T.Lee
梁念慈
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第1期29-33,共5页
[目的]克隆表达和纯化野生型及3种缺失突变型人PDIP38谷胱甘肽S转移酶(glutathion S trans-ferase,GST)融合蛋白。[方法]采用常规PCR扩增法得到野生型及3种缺失突变型人PDIP38的cDNA;4种cD-NA与GST融合载体pGEX-4T-1重组并转化大肠杆菌...
[目的]克隆表达和纯化野生型及3种缺失突变型人PDIP38谷胱甘肽S转移酶(glutathion S trans-ferase,GST)融合蛋白。[方法]采用常规PCR扩增法得到野生型及3种缺失突变型人PDIP38的cDNA;4种cD-NA与GST融合载体pGEX-4T-1重组并转化大肠杆菌DH5α;采用BamH Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切鉴定插入的DNA序列;采用谷胱甘肽-sepharose 4B亲和层析柱纯化重组蛋白。[结果]野生型和3种缺失突变型人PDIP38 GST融合蛋白在DH5α中高效表达;经谷胱甘肽-sepharose 4B亲和层析柱一步纯化后,4种蛋白的纯度均达到85％以上。[结论]pGEX-4T-1 GST蛋白融合载体可高效表达人PDIP38蛋白;用谷胱甘肽-sepharose 4B亲和层析柱一步纯化法可简单、快速地得到高纯度的蛋白。
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关键词
PDIP38
谷胱甘肽s转移酶融合蛋白
克隆
纯化
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职称材料
题名
人DNA聚合酶δ结合蛋白PDIP38的克隆、表达和纯化
被引量：
1
1
作者
翁云
Rakhee Gupte
Marietta Y.W.T.Lee
梁念慈
机构
中山大学中山
医学院
生化教研室
纽约医学院生物化学与分子生物学系
广东
医学院
生化教研室
出处
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第1期29-33,共5页
基金
美国National Institutes of Health Grant NIHgrant(No:41-04-96)
广东省高等学校重点学科(C类)基金资助项目(1999-2002)
文摘
[目的]克隆表达和纯化野生型及3种缺失突变型人PDIP38谷胱甘肽S转移酶(glutathion S trans-ferase,GST)融合蛋白。[方法]采用常规PCR扩增法得到野生型及3种缺失突变型人PDIP38的cDNA;4种cD-NA与GST融合载体pGEX-4T-1重组并转化大肠杆菌DH5α;采用BamH Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切鉴定插入的DNA序列;采用谷胱甘肽-sepharose 4B亲和层析柱纯化重组蛋白。[结果]野生型和3种缺失突变型人PDIP38 GST融合蛋白在DH5α中高效表达;经谷胱甘肽-sepharose 4B亲和层析柱一步纯化后,4种蛋白的纯度均达到85％以上。[结论]pGEX-4T-1 GST蛋白融合载体可高效表达人PDIP38蛋白;用谷胱甘肽-sepharose 4B亲和层析柱一步纯化法可简单、快速地得到高纯度的蛋白。
关键词
PDIP38
谷胱甘肽s转移酶融合蛋白
克隆
纯化
Keywords
PDIP38
glutathion S transferase (GST) fusion protein
clone
express
purify
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人DNA聚合酶δ结合蛋白PDIP38的克隆、表达和纯化
翁云
Rakhee Gupte
Marietta Y.W.T.Lee
梁念慈
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2004
1
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