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具有G-CSF抗原结合活性的三个重组噬菌体单链抗体基因的筛选及序列测定
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作者 贾松惠 郭鹞 +2 位作者 范灵芝 梁米芳 侯云德 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1999年第3期161-164,共4页
利用固相化GCSF亲和吸附法,从已构建的抗rhGCSF全套单链抗体(ScFv)噬菌体表面展示文库中,筛选出含有特异抗体片段的噬菌体颗粒。结合直接感染法和酸性洗脱液洗脱法,进行4轮亲和富集筛选,并通过ELISA法结合双酶切鉴定,共筛选出9个具有GCS... 利用固相化GCSF亲和吸附法,从已构建的抗rhGCSF全套单链抗体(ScFv)噬菌体表面展示文库中,筛选出含有特异抗体片段的噬菌体颗粒。结合直接感染法和酸性洗脱液洗脱法,进行4轮亲和富集筛选,并通过ELISA法结合双酶切鉴定,共筛选出9个具有GCSF结合活性的完整的重组噬菌粒克隆。对其中3个阳性克隆进行了ScFv基因全序列测定,获得6个抗体可变区基因的全序列。计算机分析表明,它们均为新发现的小鼠免疫球蛋白可变区基因。 展开更多
关键词 G-CSF 重组噬菌体抗体 可变区基因 序列分析
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重组人G—CSF免疫小鼠全套单链抗体噬菌体表面展示文库的构建 被引量:2
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作者 贾松惠 郭鹞 +2 位作者 范灵芝 梁米芳 侯云德 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1999年第1期21-24,共4页
利用全套噬菌体抗体表面展示技术,绕过杂交瘤技术,从重组人G-CSF免疫的小鼠脾淋巴细胞中提取总RNA,反转录成cDNA后,用抗体可变区PCR混合引物进行全套抗体重、轻链可变区(VH和VL)基因的扩增。经重叠延伸反应,在体外随机装配成单... 利用全套噬菌体抗体表面展示技术,绕过杂交瘤技术,从重组人G-CSF免疫的小鼠脾淋巴细胞中提取总RNA,反转录成cDNA后,用抗体可变区PCR混合引物进行全套抗体重、轻链可变区(VH和VL)基因的扩增。经重叠延伸反应,在体外随机装配成单链抗体(ScFv)。将其克隆至噬菌粒载体pCANTAB5E中,电转化含SupE的E.Coli菌株,以辅助噬菌体M13K07超感染噬菌粒文库,构建成全套ScFv表面展示文库。为利用亲和富集筛选技术,获得具有G-CSF结合活性的完整重组噬菌粒克隆奠定了基础。 展开更多
关键词 G-CSF 单链抗体 噬菌体 表面展示 基因文库
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小鼠^(60)Co-γ射线照射后空肠组织中NO和cGMP含量变化 被引量:1
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作者 丁桂荣 郭鹞 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第6期711-713,共3页
目的和方法:选用BALB/c小鼠,采用一氧化氮荧光分光光度法和放射免疫测定法,对不同剂量60Co-γ射线(8Gy、12Gy、14Gy)照射后的小鼠和8Gy照射后不同时间(分别为24h、48h、72h)小鼠空肠组织中N... 目的和方法:选用BALB/c小鼠,采用一氧化氮荧光分光光度法和放射免疫测定法,对不同剂量60Co-γ射线(8Gy、12Gy、14Gy)照射后的小鼠和8Gy照射后不同时间(分别为24h、48h、72h)小鼠空肠组织中NO-2和cGMP含量进行了测定。结果:8Gyγ射线全身照射后,小鼠空肠组织中NO-2含量增加,照后48h含量最高,cGMP含量在照后24h最高,48h降至接近对照水平,在48h处,cGMP含量与照射剂量呈依赖性正相关。 展开更多
关键词 一氧化氮 空肠 放射损伤 CGMP 钴60 Γ射线
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电离辐射对大鼠胃肠D细胞数量及胃肠和下丘脑生长抑素含量的影响
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作者 孙诚 郭鹞 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第1期18-22,共5页
本文用免疫细胞化学(ICC)方法对4Gy、8Gy ̄60Cor线一次全身照射后大鼠胃窦和十二指肠生长抑素(SS)免疫反应性内分泌细胞(D细胞)作了动态半定量分析,用放射免疫测定(RIA)技术对胃窦、十二指肠和下丘脑SS... 本文用免疫细胞化学(ICC)方法对4Gy、8Gy ̄60Cor线一次全身照射后大鼠胃窦和十二指肠生长抑素(SS)免疫反应性内分泌细胞(D细胞)作了动态半定量分析,用放射免疫测定(RIA)技术对胃窦、十二指肠和下丘脑SS含量作了动态定量分析。结果发现:受照射后各时点胃肠道D细胞数目均有增加;胃肠和下丘脑组织中SS含量均有增高趋势。二者增高的峰值均出现于照后第1天。结合SS的生理功能和D细胞数目及SS含量的变化规律,作者推测上述改变属机体的应激反应,可能具有抗放射损伤意义。 展开更多
关键词 放射损伤 幽门窦 十二指肠 下丘脑
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