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人骨髓基质干细胞在不同诱导环境下向软骨细胞的分化 被引量:2
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作者 戴洪山 刘建 +3 位作者 袁志 孟国林 吕荣 胡蕴玉 《医学研究生学报》 CAS 2006年第8期688-691,i0012,共5页
目的:探索重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)诱导建系的人骨髓基质干细胞(hBMSC,专利名缩写为MSCxj)生成软骨的可行性、最佳剂量及适宜的诱导环境。方法:rhBMP-2分为六组:空白组、100 ng/m l组、200ng/m l组、400 ng/m l组、600 ng/m l组... 目的:探索重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)诱导建系的人骨髓基质干细胞(hBMSC,专利名缩写为MSCxj)生成软骨的可行性、最佳剂量及适宜的诱导环境。方法:rhBMP-2分为六组:空白组、100 ng/m l组、200ng/m l组、400 ng/m l组、600 ng/m l组和800 ng/m l组。血清浓度分为三组:无血清组、2%血清组和5%血清组。根据rhBMP-2和血清不同浓度间的组合,设计18种诱导模式。一部分MSCxj制成微球,模拟三维模式进行细胞爬片培养,另一部分MSCxj直接用96孔板培养,10 d后,检测MSCxj的数量、总蛋白生成量和碱性磷酸酶生成量,并行甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原mRNA检测,利用MPS60病理图像软件分析各组Ⅱ型胶原mRNA染色后的灰度,比较各组Ⅱ型胶原mRNA的生成量。结果:血清浓度越高细胞生成的数量越多,细胞合成的总蛋白无显著差异,rhBMP-2对细胞数量和总蛋白的合成无明显影响。2%的血清浓度比其他血清浓度更利于软骨生成。在该血清浓度下rhBMP-2为400 ng/m l时,细胞特异性基质Ⅱ型胶原生成最多(F=19.56,P<0.05)。结论:rhBMP-2能诱导MSCxj生成软骨,在血清浓度为2%、自身浓度为400 ng/m l水平下诱导MSCxj生成软骨能力最强。 展开更多
关键词 微粒培养 骨形态发生蛋白-2 软骨诱导 血清浓度 量效关系
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