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人CIDE3基因克隆和真核表达载体构建及促凋亡作用的研究 被引量:5
1
作者 王淑芳 李青 +5 位作者 姚丽 程虹 张静 叶菁 李繁烦 李南林 《医学研究生学报》 CAS 2007年第7期682-684,688,787,共5页
目的:克隆人诱导细胞死亡的DFF45样效应因子3(CIDE3)全长基因,构建真核表达质粒pcDNA3.l(+)-CIDE3,并检测其促凋亡作用。方法:①提取人腹部皮下白色脂肪组织的总RNA,经RT-PCR获得CIDE3全长基因,克隆入真核表达载体pcDNA3.l(+),构建重组... 目的:克隆人诱导细胞死亡的DFF45样效应因子3(CIDE3)全长基因,构建真核表达质粒pcDNA3.l(+)-CIDE3,并检测其促凋亡作用。方法:①提取人腹部皮下白色脂肪组织的总RNA,经RT-PCR获得CIDE3全长基因,克隆入真核表达载体pcDNA3.l(+),构建重组质粒pcDNA3.l(+)-CIDE3,并进行序列测定。②用脂质体法将pcDNA3.l(+)-CIDE3转染人宫颈癌细胞系HeLa细胞,通过TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果:①经RT-PCR扩增得到特异性717 bp的目的片段,构建的重组质粒pcDNA3.l(+)-CIDE3经序列测定,结果与Genbank发表的序列完全一致。②转染Hela细胞后,经Tunel染色法检测发现,转染pcDNA3.l(+)-CIDE3后有大约25%的细胞发生了凋亡,与转染空质粒pcDNA3.l(+)(<5%)及未转染质粒的细胞相比,其凋亡细胞明显增多。结论:成功克隆了人CIDE3全长基因,构建了真核表达质粒pcDNA3.l(+)-CIDE3,并验证了CIDE3基因可诱导细胞发生凋亡的生物学作用,为进一步研究CIDE3的生物学功能奠定了坚实基础。 展开更多
关键词 人诱导细胞死亡的DFF45样效应因子3 基因克隆 真核表达 凋亡
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放疗前后宫颈鳞癌组织凋亡指数与bcl-2、bax基因表达的相关性研究 被引量:2
2
作者 郭万峰 郭国祯 +4 位作者 韩良辅 丁桂荣 惠延平 郭燕 马海昕 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期55-60,共6页
检测了宫颈鳞癌患者放疗前和放疗中凋亡指数 (AI)及bcl- 2、bax的基因表达 ,探讨了宫颈癌组织中基因表达与凋亡之间的关系。采用免疫组化SABC法检测bcl- 2和bax基因的表达 ,TUNEL法检测宫颈癌活检组织的细胞凋亡水平。在此基础上分析bcl... 检测了宫颈鳞癌患者放疗前和放疗中凋亡指数 (AI)及bcl- 2、bax的基因表达 ,探讨了宫颈癌组织中基因表达与凋亡之间的关系。采用免疫组化SABC法检测bcl- 2和bax基因的表达 ,TUNEL法检测宫颈癌活检组织的细胞凋亡水平。在此基础上分析bcl- 2和bax基因表达的细胞阳性率与凋亡指数的关系。结果表明 ,X射线照射 10Gy后 ,宫颈癌组织bax基因表达增强 (p<0 .0 5 ) ,凋亡指数亦明显增加 (p <0 .0 1) ,bcl- 2基因表达的细胞阳性率水平无明显改变 (p >0 .0 5 )。照射前宫颈癌组织bcl- 2和bax的基因综合表达细胞阳性率与自发凋亡相关性较差 (p >0 .0 5 ,r=0 .370 3,其上界为 0 .70 71) ,而 10Gy照射后 ,宫颈癌组织中bcl- 2和bax的综合表达细胞阳性率与辐射诱导的凋亡具有明显的相关性 (p <0 .0 5 ,r =0 .5 2 6 4,其上界为 0 .70 71)。 展开更多
关键词 宫颈鳞癌 凋亡指数 AI BCL-2基因 BAX基因 放疗 放射治疗 细胞凋亡 基因表达
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血管内皮生长因子在子宫内膜异位症中的表达及意义 被引量:4
3
作者 齐璇 辛晓燕 +2 位作者 常吉庆 王德堂 郭会玲 《医学研究生学报》 CAS 2003年第3期180-181,184,F002,共4页
目的 :探讨血管内皮生长因子 (VEGF)在子宫内膜异位症发生、发展中的作用。 方法 :应用免疫组织化学(SABC)法 ,检测 70例异位内膜组织和 30例正常子宫内膜组织 (对照组 )中VEGF的表达。 结果 :VEGF在异位内膜组织及对照组中的阳性表... 目的 :探讨血管内皮生长因子 (VEGF)在子宫内膜异位症发生、发展中的作用。 方法 :应用免疫组织化学(SABC)法 ,检测 70例异位内膜组织和 30例正常子宫内膜组织 (对照组 )中VEGF的表达。 结果 :VEGF在异位内膜组织及对照组中的阳性表达率分别为 77.14 %和 4 3.33% (P <0 .0 0 1) ,强阳性表达率分别为 2 5 .71%和 3.3%(P <0 .0 1)。而VEGF在卵巢子宫内膜异位症组和子宫腺肌症组中的阳性表达率分别为 77.78%和 76 .4 7% (P >0 .0 5 )。 结论 :异位内膜组织中VEGF的过度表达与异位内膜组织的血管生成密切相关 ,VEGF在子宫内膜异位症的发生发展中发挥作用。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 血管生成 血管内皮生长因子
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乙型肝炎病毒X蛋白与核转录因子NF-κB在肝癌细胞程序性死亡中的作用 被引量:3
4
作者 郭双平 翟宇强 +1 位作者 王文亮 赵一岭 《医学研究生学报》 CAS 2002年第1期1-5,共5页
目的 :研究乙型肝炎病毒X蛋白与核转录因子NF κB的关系及其在肝癌细胞程序性死亡中的作用。 方法 :用脂质体介导的基因转染法 ,将乙型肝炎病毒X基因真核表达载体pCDNA 3.1 HBX转染入人肝癌细胞系HCC- 92 0 4 ,用免疫组化SP法和免疫荧... 目的 :研究乙型肝炎病毒X蛋白与核转录因子NF κB的关系及其在肝癌细胞程序性死亡中的作用。 方法 :用脂质体介导的基因转染法 ,将乙型肝炎病毒X基因真核表达载体pCDNA 3.1 HBX转染入人肝癌细胞系HCC- 92 0 4 ,用免疫组化SP法和免疫荧光法对细胞内源性核转录因子NF κB进行定位 ,然后用蛋白酶抑制剂ALLN作用于细胞 ,抑制核转录因子NF κB的活化 ,阿霉素诱导肝癌细胞程序性死亡 ,检测肝癌细胞程序性死亡率的变化。 结果 :未进行基因转染的人肝癌细胞系HCC 92 0 4的内源性核转录因子NF κB仅位于胞质 ,胞核中无表达 ;转染乙型肝炎病毒x基因真核表达载体pCDNA 3.1 HBX肝癌细胞的胞质和胞核同时有核转录因子NF κB的表达 ;而在经抑制剂ALLN作用的转染乙型肝炎病毒真核表达载体pCDNA 3.1 HBX的人肝癌细胞HCC 92 0 4 ,核转录因子NF κB仅定位于肝癌细胞的胞质内 ,而且细胞程序性死亡率由 8.1%增高至 5 1.8%。 结论 :乙型肝炎病毒X蛋白可激活肝癌细胞转录因子NF κB ,使其从胞质中转位于胞核 ;乙型肝炎病毒X蛋白通过活化核转录因子NF κB而抑制肝癌细胞的程序性死亡。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 X蛋白 核转录因子NF-ΚB 肝癌细胞 程序性死亡
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EGFP-CIDE-3及D sRed1-CIDE-3融合基因真核表达载体的构建及其在293T细胞中的表达和定位 被引量:2
5
作者 谷雨 李青 +6 位作者 叶菁 李烦繁 闵婕 张丽英 马钰 李航 刘芳 《医学研究生学报》 CAS 2008年第9期911-914,I0002,共5页
目的:分别构建EGFP、DsRed1与CIDE-3的融合基因真核表达载体,观察其在人胚肾上皮细胞293T中的表达,确定CIDE-3的亚细胞定位。方法:分别以质粒pEGFP-C3、pDsRed1-N1及本实验室克隆得到的质粒pET28a(+)-CIDE-3为模板,PCR扩增EGFP、DsRed1 ... 目的:分别构建EGFP、DsRed1与CIDE-3的融合基因真核表达载体,观察其在人胚肾上皮细胞293T中的表达,确定CIDE-3的亚细胞定位。方法:分别以质粒pEGFP-C3、pDsRed1-N1及本实验室克隆得到的质粒pET28a(+)-CIDE-3为模板,PCR扩增EGFP、DsRed1 DNA片段及人CIDE-3基因的CDS序列,再分别将EGFP、CIDE-3及DsRed1、CIDE-3克隆入真核表达载体pShuttle-CMV中。酶切、测序鉴定后,经磷酸钙转染入293T细胞,通过荧光显微镜观察其在293T细胞中的表达,并利用荧光染料Bodipy 493/503定位脂滴,探讨CIDE-3与脂滴之间的关系。结果:酶切及DNA测序证实,重组质粒pShuttle-CMV-EGFP-CIDE-3和pShuttle-CMV-DsRed1-CIDE-3构建成功。荧光显微镜观察显示,pShuttle-CMV-EGFP-CIDE-3融合蛋白定位于细胞质,pShuttle-CMV-DsRed1-CIDE-3融合蛋白也定位于细胞质,并与脂滴存在共定位关系。结论:成功构建了重组质粒pShuttle-CMV-EGFP-CIDE-3和pShuttle-CMV-DsRed1-CIDE-3;两者均可在239T细胞中表达,融合蛋白分布于细胞质,并与脂滴存在共定位关系。 展开更多
关键词 CIDE-3 融合蛋白 EGFP DsRed1 293T细胞
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构建人补体衰变加速因子真核载体并转染NIH/3T3成纤维细胞 被引量:2
6
作者 乔庆 陈勇 +2 位作者 窦科峰 张静 李剑平 《医学研究生学报》 CAS 2006年第4期302-305,i0012,共5页
目的:构建人补体衰变加速因子(DAF)真核表达载体pSecTag2/HygroBDAF,并利用壳聚糖组装成纳米微粒复合体,转染小鼠NIH/3T3成纤维细胞。方法:应用PCR方法,从DAFpGEMTEasyVector克隆相关的DNA序列,插入具有相应酶切位点的真核表达载体pSecT... 目的:构建人补体衰变加速因子(DAF)真核表达载体pSecTag2/HygroBDAF,并利用壳聚糖组装成纳米微粒复合体,转染小鼠NIH/3T3成纤维细胞。方法:应用PCR方法,从DAFpGEMTEasyVector克隆相关的DNA序列,插入具有相应酶切位点的真核表达载体pSecTag2/HygroB中,构建pSecTag2/HygroBDAF真核表达质粒,并进行酶切鉴定及序列测定;利用壳聚糖包裹质粒,转染小鼠NIH/3T3细胞,并对转染细胞用抗DAF进行免疫组化染色。结果:DAF基因大小为1049bp,与基因序列数据库中记载的人DAFcDNA序列结果完全一致;利用壳聚糖DAF纳米微粒转染NIH/3T3细胞24h后,免疫组化染色显示细胞质弥漫染色阳性。结论:成功构建了人DAF真核表达载体并通过壳聚糖介导转染NIH/3T3细胞。 展开更多
关键词 补体衰变加速因子 壳聚糖 纳米微粒 基因克隆 基因转染
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人肝癌HepG2细胞超微弱发光的观察 被引量:4
7
作者 马世荣 惠延平 +1 位作者 郭双平 程虹 《医学研究生学报》 CAS 2006年第2期100-103,共4页
目的:探讨人肝癌HepG2细胞系超微弱发光的特征。方法:用IFFM-D型流动式化学发光仪检测人肝细胞株QZG及人肝癌HepG2细胞系超微弱发光的强度以及不同浓度鲁米诺(Lum inol)和双氧水(H2O2)对其超微弱发光的影响。结果:在10-4mol/L鲁米诺及0... 目的:探讨人肝癌HepG2细胞系超微弱发光的特征。方法:用IFFM-D型流动式化学发光仪检测人肝细胞株QZG及人肝癌HepG2细胞系超微弱发光的强度以及不同浓度鲁米诺(Lum inol)和双氧水(H2O2)对其超微弱发光的影响。结果:在10-4mol/L鲁米诺及0.3%双氧水条件下,人肝癌HepG2细胞超微弱发光强度明显高于人肝细胞株QZG(P<0.05),并随细胞浓度增高其超微弱发光强度呈线性增高,其差异显著(P<0.05);提高鲁米诺浓度为10-3mol/L时,人肝癌HepG2细胞发光强度明显增加(P<0.05);提高双氧水浓度为3%时,其超微弱发光强度的变化无显著差异(P>0.05)。结论:人肝癌HepG2细胞的超微弱发光强度明显高于人肝细胞株QZG,细胞浓度及鲁米诺、双氧水浓度变化能影响细胞超微弱发光强度。超微弱发光反映了肿瘤细胞的功能状态,检测肿瘤细胞超微弱发光强度可作为一项敏感的肿瘤细胞生理及代谢指标。 展开更多
关键词 人肝癌HepG2细胞系 超微弱发光
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超抗原葡萄球菌肠毒素A对体内T细胞无能的诱导规律 被引量:2
8
作者 黄杨 尹文 +5 位作者 张秀敏 司少艳 葛伟 胡沛臻 李侠 隋延仿 《医学研究生学报》 CAS 2009年第9期904-907,共4页
目的:通过不同的间隔天数,连续多次给予小鼠腹腔注射超抗原葡萄球菌肠毒素A(SEA),观察注射后T细胞的表型变化,并找寻SEA在小鼠体内对T细胞无能的诱导规律。方法:将80只小鼠随机分为4组:间隔3d组、间隔28 d组、阳性对照组和阴性对照组,每... 目的:通过不同的间隔天数,连续多次给予小鼠腹腔注射超抗原葡萄球菌肠毒素A(SEA),观察注射后T细胞的表型变化,并找寻SEA在小鼠体内对T细胞无能的诱导规律。方法:将80只小鼠随机分为4组:间隔3d组、间隔28 d组、阳性对照组和阴性对照组,每组20只小鼠。每组于末次注射后的不同天数,用流式细胞术检测小鼠脾淋巴细胞上CD3、CD4、CD8、CD69、CD25的表达,并将细胞体外继续培养72 h,用单四唑(MTT)法测定细胞的增殖能力。结果:间隔3 d组和间隔28 d组中,连续3次注射SEA后,小鼠脾淋巴细胞中CD3的表达均显著下降(P<0.01),2组中CD8的表达水平基本相似;但间隔3 d组中,CD4的表达在末次注射后3 d内明显降低(P<0.05);末次注射后3 d内,CD25的表达明显高于末次注射后第7 d(P<0.05)。间隔28 d组中CD4的表达较稳定,无显著升降;CD25的表达水平较低。SEA连续3次注射后,间隔3 d组的细胞从第21 d开始出现较弱的增殖反应,至第28 d增殖反应明显提高。间隔28 d组的细胞在第28 d始出现较弱的应答反应。结论:小鼠体内反复注射超抗原SEA可诱导T细胞无能,注射间隔时间的长短可能与无能的触发无关,但影响了CD4亚群的克隆清除,即间隔时间越短,被清除的CD4 T细胞越多;间隔时间越长,CD4 T细胞清除的程度越小。尽管CD25与T细胞无能的诱导密切相关,但CD25可能不参与无能状态的维持。T细胞的免疫无反应性并不是绝对的和持久的,在一定条件下,它可再次对超抗原的刺激出现反应。 展开更多
关键词 超抗原 T细胞 无能
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BALB/c小鼠肝肿瘤模型建立过程中胰腺的改变及肝脏超微结构特点 被引量:2
9
作者 信波 殷继鹏 +3 位作者 王艳霞 崔颖 张立成 王瑞安 《山西医科大学学报》 CAS 2013年第3期174-177,245,246,共6页
目的在建立诱发性BALB/c小鼠肝肿瘤动物模型过程中,研究胰腺的改变及肝组织超微结构的特点。方法将78只正常成年BALB/c雄性小鼠完全随机化分为5组,即实验1,2,3,4组和对照组,实验组每组14只和对照组22只,采用二乙基亚硝胺(DEN)/四氯化碳(... 目的在建立诱发性BALB/c小鼠肝肿瘤动物模型过程中,研究胰腺的改变及肝组织超微结构的特点。方法将78只正常成年BALB/c雄性小鼠完全随机化分为5组,即实验1,2,3,4组和对照组,实验组每组14只和对照组22只,采用二乙基亚硝胺(DEN)/四氯化碳(CCl4)/乙醇的联合诱导方式喂养实验组小鼠。于第60,90,120,150天取材小鼠,分别观察肝脏的形态学、超微结构的改变,以及胰腺的形态学和血糖值的改变。结果实验组存活小鼠肝脏组织出现肿瘤性改变,胰腺发生脂肪变性;第150天时,其血糖值较对照组降低(P<0.05),肝脏组织超微结构形态改变符合肿瘤性病变的特征。结论BALB/c小鼠肝肿瘤动物模型肝脏组织超微结构的改变类似于人类肝癌;且小鼠胰腺脂肪变性、血糖值降低。 展开更多
关键词 肝肿瘤 动物模型 超微结构 脂肪变性 血糖
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人黑色素瘤特异性抗原基因的克隆及其在原核系统中的表达 被引量:1
10
作者 王莉 郭爱林 +2 位作者 秦叔逵 李青 王琳 《医学研究生学报》 CAS 2005年第4期298-301,共4页
目的:克隆及表达特异性抗原(PRAME)基因的cDNA片段。方法:从人急性髓细胞白血病细胞系HL60提取总RNA,用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)从中扩增出PRAME基因cDNA片段。将PRAME基因cDNA片段插入载体pGEM T easy中,经全自动序列分析仪测序正确... 目的:克隆及表达特异性抗原(PRAME)基因的cDNA片段。方法:从人急性髓细胞白血病细胞系HL60提取总RNA,用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)从中扩增出PRAME基因cDNA片段。将PRAME基因cDNA片段插入载体pGEM T easy中,经全自动序列分析仪测序正确后,再克隆至表达载体pGEX4T2中,构建高效表达克隆,并转化大肠杆菌进行表达。结果:1mmol/L异丙基βD硫代半乳糖苷(IPTG)诱导5h,PRAME蛋白表达即达高峰。结论:PRAME基因在极少数正常组织中低表达,而在白血病患者高表达,并编码被自体细胞毒T淋巴细胞识别的抗原,所以该基因有望成为肿瘤免疫治疗的新成员。 展开更多
关键词 人黑色素瘤特异性抗原基因 白血病 微小残留病灶 基因克隆 表达
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乙型肝炎病毒感染对肾小球肾炎致病作用的比较分析 被引量:2
11
作者 于艳 张静 +4 位作者 王汉民 陈威 连耀国 刘宏宝 刘彦仿 《中国中西医结合肾病杂志》 2006年第6期342-344,374,共4页
目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)感染对肾小球肾炎(GN)的致病作用。方法:应用免疫组织化学方法,检测49例血清HBV阳性和15例HBV阴性患者肾组织内HBV标志物(HBsAg、HBeAg、HBcAg)分布的状况,并对比两组患者的临床表现、化验检查和肾组织病理... 目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)感染对肾小球肾炎(GN)的致病作用。方法:应用免疫组织化学方法,检测49例血清HBV阳性和15例HBV阴性患者肾组织内HBV标志物(HBsAg、HBeAg、HBcAg)分布的状况,并对比两组患者的临床表现、化验检查和肾组织病理类型。结果:(1)两组在性别、年龄、24h尿蛋白定量、合并血尿、肝功能受损、肾功能受损和血清免疫学指标方面无明显差异(P>0.05);(2)HBV标志物阳性组肾组织内HBV标志物检出率与阴性组相比无明显差异(P>0.05);(3)两组所致肾小球肾炎的病理类型方面无统计学差异(P>0.05)。结论:HBV可能直接感染肾组织细胞导致肾炎的发生。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒相关性肾炎 膜性肾病 临床表现 肾脏病理
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细胞密度与细胞增殖关系的初步分析 被引量:1
12
作者 张丰 李青 +5 位作者 秦绪军 王文勇 张丽英 赵一岭 洪柳 聂蕾 《医学研究生学报》 CAS 2006年第1期23-25,33,共4页
目的:探讨细胞密度对细胞克隆形成能力的影响。方法:利用平板克隆形成实验检测五种细胞系BT325、786-0、293、C6和NIH3T3的克隆形成能力,分析细胞密度或细胞数量对这些细胞系的克隆形成能力及细胞周期的影响。结果:细胞密度增加时,明显... 目的:探讨细胞密度对细胞克隆形成能力的影响。方法:利用平板克隆形成实验检测五种细胞系BT325、786-0、293、C6和NIH3T3的克隆形成能力,分析细胞密度或细胞数量对这些细胞系的克隆形成能力及细胞周期的影响。结果:细胞密度增加时,明显降低NIH3T3和786-0细胞系中具有克隆形成能力的细胞数,更高的细胞密度才能导致293细胞系的克隆形成能力下降。细胞密度的增加对BT325和C6这两种细胞系的克隆形成能力无明显影响。细胞周期分析表明,细胞密度对于BT325、C6以及293的细胞周期无明显影响,但能明显增加786-0和NIH3T3的G1期细胞比例,减少S期细胞比例。细胞密度可影响这五种细胞系的细胞周期和克隆形成能力,且两者关系密切。结论:可能存在一种与细胞数量相关的因素能抑制干细胞(包括肿瘤干细胞)的扩增。另外,在永生化细胞系中,干细胞的扩增频率与细胞的有丝分裂频率基本一致。 展开更多
关键词 细胞密度 细胞周期 克隆形成能力
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外源性APMCF1基因转染对人肝癌细胞系细胞生长和细胞周期的影响 被引量:1
13
作者 李擒龙 王文亮 +3 位作者 晏伟 成胜权 王文勇 张志培 《医学研究生学报》 CAS 2005年第12期1069-1072,共4页
目的:探讨外源性APMCF1基因对人肝癌细胞系(HHCC)细胞生长和细胞周期的影响。方法:将人全长APMCF1基因经脂质体包裹转染肝细胞肝癌HHCC细胞,经G418筛选获得转基因癌细胞克隆,采用半定量RT-PCR方法检测APMCF1的表达情况。通过单四唑(MTT... 目的:探讨外源性APMCF1基因对人肝癌细胞系(HHCC)细胞生长和细胞周期的影响。方法:将人全长APMCF1基因经脂质体包裹转染肝细胞肝癌HHCC细胞,经G418筛选获得转基因癌细胞克隆,采用半定量RT-PCR方法检测APMCF1的表达情况。通过单四唑(MTT)比色,绘制生长曲线,观察APMCF1基因对HHCC细胞生长的影响,流式细胞仪检测HHCC细胞周期的变化。结果:半定量RT-PCR结果显示,APMCF1基因被成功地转染至HHCC细胞。稳定表达外源性APMCF1基因的HHCC细胞生长速度明显慢于亲代细胞;细胞周期发生明显改变,G1期细胞比例明显增多,S期细胞比例明显减少。结论:外源性APMCF1基因对HHCC细胞生长和细胞周期有明显的抑制作用,可能是一个细胞周期调节基因。 展开更多
关键词 APMCF1基因 肝细胞肝癌 细胞周期
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鼠源化抗肝癌免疫毒素的导向研究 被引量:1
14
作者 张静 刘彦仿 +4 位作者 杨守京 乔庆 程虹 张素珍 马福成 《肝胆外科杂志》 2003年第3期223-226,共4页
目的 构建表达鼠源化抗肝癌重组免疫毒素 m sc Fv2 5- TNFα(鼠源化单链抗体 m sc Fv2 5融合人突变型 TNFα) ,对荷肝癌 (SMMC- 772 1 )裸鼠进行体内杀伤活性实验。方法 运用 PCR方法扩增 TNFα并在其 5’和 3’端增添相应酶切位点 ,... 目的 构建表达鼠源化抗肝癌重组免疫毒素 m sc Fv2 5- TNFα(鼠源化单链抗体 m sc Fv2 5融合人突变型 TNFα) ,对荷肝癌 (SMMC- 772 1 )裸鼠进行体内杀伤活性实验。方法 运用 PCR方法扩增 TNFα并在其 5’和 3’端增添相应酶切位点 ,经限制性内切酶酶切后 ,构建成 PGEX4 T- 1 / msc Fv2 5- TNFα融合蛋白表达载体 ,转化大肠杆菌 JM1 0 9,通过 IPTG诱导进行表达 ,在经过蛋白纯化及 Western bolt鉴定之后 ,将重组免疫毒素经尾静脉注射治疗荷肝癌裸鼠 ,2周后处死裸鼠 ,观察肿瘤的体积、质量 ,并对瘤组织进行 TNFα免疫组化染色。结果  m sc Fv2 5- TNFα治疗组对荷肝癌裸鼠的有效率为 5 / 5 ,其中 2 / 5为完全缓解 ,3/ 5为部分缓解 ,与 TNFα对照组相比 ,疗效明显高于对照组 (χ2 =4 .6 2 ,P<0 .0 5 ) ,经 m sc Fv2 5- TNFα治疗后的瘤组织 ,TNFα呈弥漫性阳性反应 ,阳性颗粒主要存在于瘤组织的胞质中。结论 鼠源化抗肝癌重组免疫毒素 msc Fv2 5- 展开更多
关键词 肝细胞肝癌 单链抗体 鼠源化 肿瘤坏死因子 免疫毒素
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原发骨淋巴瘤42例临床分析 被引量:1
15
作者 郝彩霞 王健红 +13 位作者 张娜 刘祥祥 贾卫静 唐海龙 董宝侠 顾宏涛 张涛 杨岚 白庆咸 闫庆国 高广勋 王哲 陈协群 梁蓉 《中华老年多器官疾病杂志》 2016年第11期841-844,共4页
目的:探讨原发骨淋巴瘤( PBL)的临床特点及预后。方法入选西京医院2006年至2014年期间收治的PBL患者42例,男24例,女18例,中位年龄45.6(11~78)岁,收集患者的临床资料,包括性别、年龄、有无全身症状、发病部位、临床分期、病... 目的:探讨原发骨淋巴瘤( PBL)的临床特点及预后。方法入选西京医院2006年至2014年期间收治的PBL患者42例,男24例,女18例,中位年龄45.6(11~78)岁,收集患者的临床资料,包括性别、年龄、有无全身症状、发病部位、临床分期、病理类型、治疗方案、疗效评价等,进行回顾性分析,通过电话和门诊随访至2015年3月。结果42例患者均以病变部位疼痛或牵涉性麻木为首发临床表现。病理分型均为非霍奇金淋巴瘤( NHL ),50%(21/42)为弥漫大 B 细胞淋巴瘤(DLBCL)。其中17例患者接受了治疗,5例放化疗联合,12例单纯化疗,两组比较,近期疗效差异无统计学意义(P>0.05)。4个疗程后评估近期疗效,年龄、性别、分期、乳酸脱氢酶(LDH)水平、有无全身症状、病理分型、美国东部肿瘤协作组(ECOG)评分、国际预后指数( IPI )评分、是否应用利妥昔单抗治疗、是否联合放疗等对完全缓解率( CR )的影响无统计学意义(P>0.05)。中位随访时间13(2~48)个月,无进展生存期>3年的4例患者中3例应用了利妥昔单抗。结论42例PBL患者病理类型主要为DLBCL,治疗以化疗为主,联合放疗未明显提高疗效,应用利妥昔单抗可能会改善预后,尚需扩大样本量进行研究。 展开更多
关键词 淋巴瘤 原发骨淋巴瘤 临床特点
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14-3-3-zeta在Ⅲ/Ⅳ期套细胞淋巴瘤患者中的表达及其临床意义 被引量:1
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作者 朱米娜 王健红 +12 位作者 郝彩霞 王文勇 张娜 贾卫静 唐海龙 董宝侠 顾宏涛 张涛 杨岚 高广勋 陈协群 王哲 梁蓉 《中华老年多器官疾病杂志》 2016年第11期801-804,共4页
目的:探讨14-3-3zeta蛋白表达与套细胞淋巴瘤(MCL)患者疗效和预后的关系。方法收集2007年3月至2012年3月期间于第四军医大学病理科确诊、血液科住院治疗的12例MCL患者的临床资料,采用免疫组织化学染色方法检测14-3-3zeta蛋白在1... 目的:探讨14-3-3zeta蛋白表达与套细胞淋巴瘤(MCL)患者疗效和预后的关系。方法收集2007年3月至2012年3月期间于第四军医大学病理科确诊、血液科住院治疗的12例MCL患者的临床资料,采用免疫组织化学染色方法检测14-3-3zeta蛋白在12例MCL患者中的表达情况,分析其与MCL预后的关系。结果与淋巴结反应性增生相比,12例MCL患者中8例细胞浆中表达14-3-3zeta阳性,阳性表达率为66.7%。14-3-3zeta阳性表达患者总反应率(ORR)、2年总生存(OS)率、2年无进展生存(PFS)率(62.5%,50.0%,37.5%)均低于14-3-3zeta阴性表达患者(75.0%,100.0%,75.0%),有待扩大样本量深入研究。结论 MCL中存在14-3-3zeta蛋白的异常高表达,其表达强弱可能与预后相关。 展开更多
关键词 14-3-3zeta蛋白 淋巴瘤 套细胞 预后
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基础医学系统整合课程与PBL教学法相结合教学模式的探索体会 被引量:8
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作者 余璐 殷玥 +7 位作者 刘文冲 徐明 黄豫晓 冯娜 马恒 张淑苗 张圆 裴建明 《西北医学教育》 2014年第4期743-744,共2页
系统整合课程模式与以问题为导向(problem based learning,PBL)的教学方法相较传统的学科课程体系都是更为先进合理的教学模式。第四军医大学将这两种教学方法应用于五年制多个专业的基础医学教学中,进行了探索性的实施。本文介绍新课... 系统整合课程模式与以问题为导向(problem based learning,PBL)的教学方法相较传统的学科课程体系都是更为先进合理的教学模式。第四军医大学将这两种教学方法应用于五年制多个专业的基础医学教学中,进行了探索性的实施。本文介绍新课程体系改革的设计、组织、初步实施情况,并分析了目前存在的问题。 展开更多
关键词 基础医学 系统整合课程 PBL教学法 教学改革
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Ki-67及p27基因产物在膀胱移行细胞癌中的表达及其意义(英文) 被引量:1
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作者 张运涛 汪涌 +2 位作者 刘凡 闫庆国 张传山 《中国医学工程》 2004年第6期9-11,共3页
目的探讨膀胱移行细胞癌(TCC)中p27和Ki-67的表达与膀胱癌细胞增殖的关系。方法用鼠抗人p27单克隆抗体及Ki-67抗原单克隆抗体对79例膀胱移行细胞癌和30例癌旁组织进行免疫组化染色。结果TCC中p27表达明显减少,Ki-67指数(Ki-67 LI)明显增... 目的探讨膀胱移行细胞癌(TCC)中p27和Ki-67的表达与膀胱癌细胞增殖的关系。方法用鼠抗人p27单克隆抗体及Ki-67抗原单克隆抗体对79例膀胱移行细胞癌和30例癌旁组织进行免疫组化染色。结果TCC中p27表达明显减少,Ki-67指数(Ki-67 LI)明显增高;且p27表达与Ki-67指数(Ki-67 LI)、肿瘤病理分级、临床分期和淋巴结转移呈负相关。结论p27和Ki-67 LI从细胞生长抑制和增殖活性两个不同的侧面反映了肿瘤细胞的侵润能力,联合检测p27和Ki-67 LI对预测膀胱癌的的生物学行为及预后具有重要的意义。 展开更多
关键词 KI-67 膀胱移行细胞癌 表达 P27基因 TCC 肿瘤病理 膀胱癌细胞 指数 产物 目的
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研究生如何培养独立的科学研究能力 被引量:7
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作者 张丰 李青 +2 位作者 王哲 闫庆国 徐玉乔 《西北医学教育》 2014年第1期77-78,共2页
如何培养独立的科学研究能力是研究生学习期间面临的实际问题。认为从7个方面加强培养可能会有较好的效果。这7个方面分别是:搜集和分析科学信息能力;提出科学问题能力;针对科学问题提出假说并设计出解决方案的能力;熟练运用基本实验技... 如何培养独立的科学研究能力是研究生学习期间面临的实际问题。认为从7个方面加强培养可能会有较好的效果。这7个方面分别是:搜集和分析科学信息能力;提出科学问题能力;针对科学问题提出假说并设计出解决方案的能力;熟练运用基本实验技术完成实验方案能力;分析结果得出科学结论能力;阐述结论的科学意义能力;科学论文写作能力。 展开更多
关键词 科研能力培养 研究生
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对科研创新的几点思考 被引量:3
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作者 张丰 李青 +5 位作者 黄高升 杨守京 惠延萍 闫庆国 马福成 师建国 《西北医学教育》 2007年第5期802-802,809,共2页
科研创新的目的和意义是为了促进解决或更好的解决人与自然以及人与社会的矛盾。本文以问题为中心,分析了为什么要进行科研创新、什么是科研创新、怎样进行科研创新以及科研创新应当具有什么科研精神等,并针对这些问题提出了一些观点... 科研创新的目的和意义是为了促进解决或更好的解决人与自然以及人与社会的矛盾。本文以问题为中心,分析了为什么要进行科研创新、什么是科研创新、怎样进行科研创新以及科研创新应当具有什么科研精神等,并针对这些问题提出了一些观点,可能有助于加深对科研创新的进一步认识。 展开更多
关键词 科研创新 科研精神
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