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外源性野生型p53基因对人肺腺癌细胞系GLC-82的生物学效应
1
作者
李萍
丁振若
+3 位作者
任力强
于文彬
饶国洲
苏明权
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
1997年第4期28-31,共4页
目的：研究外源性野生型ｐ５３基因对人肺腺癌细胞系ＧＬＣ－８２的生物学作用。方法：将含有野生型ｐ５３基因的ｐＤＯＲ－ｎｅｏ逆转录病毒载体，通过ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ转染ＧＬＣ－８２细胞，用流式细胞仪、电镜及３Ｈ－ＴｄＲ掺...
目的：研究外源性野生型ｐ５３基因对人肺腺癌细胞系ＧＬＣ－８２的生物学作用。方法：将含有野生型ｐ５３基因的ｐＤＯＲ－ｎｅｏ逆转录病毒载体，通过ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ转染ＧＬＣ－８２细胞，用流式细胞仪、电镜及３Ｈ－ＴｄＲ掺入法，观察野生型ｐ５３基因对ＧＬＣ－８２细胞的生物学效应。结果：电镜观察可见，转染野生型ｐ５３基因，可使ＧＬＣ－８２细胞出现一些病理现象，如胞浆中有明显的空泡及线粒体肿胀；流式细胞仪分析显示，野生型ｐ５３基因可阻止ＧＬＣ－８２细胞周期停止于Ｇ１～Ｓ区；３Ｈ－ＴｄＲ掺入试验提示，野生型ｐ５３基因能够抑制ＧＬＣ－８２细胞ＤＮＡ的合成。结论：这些结果阐明了野生型ｐ５３基因是抑制ＧＬＣ－８２细胞生长的部分机理。
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关键词
P53基因
GLC-82
基因转染
逆转录病毒载体
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职称材料
抗LPS mAb Fab片段cDNA的克隆及其在CHO细胞中的表达
被引量：
1
2
作者
马越云
马文煜
+3 位作者
于文彬
尹文
苏明权
丁振若
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第3期280-283,共4页
目的构建抗LPS单克隆抗体Fab段的真核表达载体,并在CHO细胞中表达。方法以逆转录PCR方法扩增抗LPSmAb重链Fd和轻链cDNA,分别克隆入载体pGEM-Teasy。经测序分析后,再分别亚克隆入载体pcDNA3,构建成重组载体pcDNA3-Fd和pcDNA3-LC,并以PCR...
目的构建抗LPS单克隆抗体Fab段的真核表达载体,并在CHO细胞中表达。方法以逆转录PCR方法扩增抗LPSmAb重链Fd和轻链cDNA,分别克隆入载体pGEM-Teasy。经测序分析后,再分别亚克隆入载体pcDNA3,构建成重组载体pcDNA3-Fd和pcDNA3-LC,并以PCR方法扩增pcD-NA3-LC中包括CMV启动子、轻链序列和BGHPoly(A)在内的轻链表达序列。经适当的限制性内切酶酶切后,插入到质粒pcDNA3-Fd中Fd表达序列的前部,构建成表达载体pcD-NA3-Fab,以脂质体包裹转染CHO细胞。经G418筛选,用ELISA、免疫荧光和Westernblot鉴定阳性克隆。结果用ELISA和免疫荧光法,筛选出4株高表达Fab的细胞株。Westernblot显示,表达产物的Mr为50000。同时,ELISA结果显示,该Fab具有良好的结合LPS的活性。结论成功地在CHO细胞中表达抗LPSmAb的Fab段,为进一步鉴定其抗LPS的作用,使之成为诊断和治疗革兰氏阴性细菌感染的工具奠定了基础。
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关键词
抗LPS单克隆抗体
FAB段
CDNA
克隆
CHO细胞
表达
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职称材料
p53蛋白多肽片段在大肠杆菌中的表达
被引量：
1
3
作者
任力强
吴旻
《生物化学杂志》
CSCD
1994年第6期643-646,共4页
在所有研究过的人体肿瘤组织或细胞中，ｐ５３似乎是突变频率最高的一个基因，研究和检测ｐ５３基因及其编码产物的变化将具有重要的意义。我们将野生型ｐ５３基因编码区３’端７０３ｂｐ的ｃＤ－ＮＡ片段插入到大肠杆菌表达载体ｐＢＶ...
在所有研究过的人体肿瘤组织或细胞中，ｐ５３似乎是突变频率最高的一个基因，研究和检测ｐ５３基因及其编码产物的变化将具有重要的意义。我们将野生型ｐ５３基因编码区３’端７０３ｂｐ的ｃＤ－ＮＡ片段插入到大肠杆菌表达载体ｐＢＶ２２０中，得到了一个重组体表达质粒ｐＲＲ３３，经热诱导表达，用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法证实ｐ５３蛋白多肽在大肠杆菌中得到了表达，它不仅可用于抗ｐ５３蛋白抗体的制备，而且也可用于对ｐ５３蛋白羧基端多肽功能的研究。
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关键词
肿瘤抑制基因
P53基因
P53蛋白
基因表达
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职称材料
题名
外源性野生型p53基因对人肺腺癌细胞系GLC-82的生物学效应
1
作者
李萍
丁振若
任力强
于文彬
饶国洲
苏明权
机构
第四军医大学西京医院临床分子生物学研究室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
1997年第4期28-31,共4页
基金
国家自然科学基金
文摘
目的：研究外源性野生型ｐ５３基因对人肺腺癌细胞系ＧＬＣ－８２的生物学作用。方法：将含有野生型ｐ５３基因的ｐＤＯＲ－ｎｅｏ逆转录病毒载体，通过ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ转染ＧＬＣ－８２细胞，用流式细胞仪、电镜及３Ｈ－ＴｄＲ掺入法，观察野生型ｐ５３基因对ＧＬＣ－８２细胞的生物学效应。结果：电镜观察可见，转染野生型ｐ５３基因，可使ＧＬＣ－８２细胞出现一些病理现象，如胞浆中有明显的空泡及线粒体肿胀；流式细胞仪分析显示，野生型ｐ５３基因可阻止ＧＬＣ－８２细胞周期停止于Ｇ１～Ｓ区；３Ｈ－ＴｄＲ掺入试验提示，野生型ｐ５３基因能够抑制ＧＬＣ－８２细胞ＤＮＡ的合成。结论：这些结果阐明了野生型ｐ５３基因是抑制ＧＬＣ－８２细胞生长的部分机理。
关键词
P53基因
GLC-82
基因转染
逆转录病毒载体
Keywords
p53 gene GLC 82 Gene transfection retrovival vector
分类号
R734.203 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
抗LPS mAb Fab片段cDNA的克隆及其在CHO细胞中的表达
被引量：
1
2
作者
马越云
马文煜
于文彬
尹文
苏明权
丁振若
机构
第四军医大学西京医院临床分子生物学研究室
第四军医大学
微
生物学
教研室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第3期280-283,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目
No.39800154
文摘
目的构建抗LPS单克隆抗体Fab段的真核表达载体,并在CHO细胞中表达。方法以逆转录PCR方法扩增抗LPSmAb重链Fd和轻链cDNA,分别克隆入载体pGEM-Teasy。经测序分析后,再分别亚克隆入载体pcDNA3,构建成重组载体pcDNA3-Fd和pcDNA3-LC,并以PCR方法扩增pcD-NA3-LC中包括CMV启动子、轻链序列和BGHPoly(A)在内的轻链表达序列。经适当的限制性内切酶酶切后,插入到质粒pcDNA3-Fd中Fd表达序列的前部,构建成表达载体pcD-NA3-Fab,以脂质体包裹转染CHO细胞。经G418筛选,用ELISA、免疫荧光和Westernblot鉴定阳性克隆。结果用ELISA和免疫荧光法,筛选出4株高表达Fab的细胞株。Westernblot显示,表达产物的Mr为50000。同时,ELISA结果显示,该Fab具有良好的结合LPS的活性。结论成功地在CHO细胞中表达抗LPSmAb的Fab段,为进一步鉴定其抗LPS的作用,使之成为诊断和治疗革兰氏阴性细菌感染的工具奠定了基础。
关键词
抗LPS单克隆抗体
FAB段
CDNA
克隆
CHO细胞
表达
Keywords
Fab
LPS
cloning
expression
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
p53蛋白多肽片段在大肠杆菌中的表达
被引量：
1
3
作者
任力强
吴旻
机构
中国医学科学院肿瘤
研究
所
分子
肿瘤学国家重点实验室
出处
《生物化学杂志》
CSCD
1994年第6期643-646,共4页
文摘
在所有研究过的人体肿瘤组织或细胞中，ｐ５３似乎是突变频率最高的一个基因，研究和检测ｐ５３基因及其编码产物的变化将具有重要的意义。我们将野生型ｐ５３基因编码区３’端７０３ｂｐ的ｃＤ－ＮＡ片段插入到大肠杆菌表达载体ｐＢＶ２２０中，得到了一个重组体表达质粒ｐＲＲ３３，经热诱导表达，用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法证实ｐ５３蛋白多肽在大肠杆菌中得到了表达，它不仅可用于抗ｐ５３蛋白抗体的制备，而且也可用于对ｐ５３蛋白羧基端多肽功能的研究。
关键词
肿瘤抑制基因
P53基因
P53蛋白
基因表达
Keywords
Tumor supressor gene
p53 Gene
p53 Protein
Gene expression
分类号
R730.21 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
外源性野生型p53基因对人肺腺癌细胞系GLC-82的生物学效应
李萍
丁振若
任力强
于文彬
饶国洲
苏明权
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
1997
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
抗LPS mAb Fab片段cDNA的克隆及其在CHO细胞中的表达
马越云
马文煜
于文彬
尹文
苏明权
丁振若
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2001
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
p53蛋白多肽片段在大肠杆菌中的表达
任力强
吴旻
《生物化学杂志》
CSCD
1994
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
已选择
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