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IgG Fab-BPI融合蛋白真核表达载体的构建及其在CHO细胞中的表达被引量：7: 1; 作者马越云马文煜 +3 位作者于文彬尹文苏明权丁振若《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期470-472,共3页; 目的构建抗抗LPSFab-BPI真核表达载体,并在CHO细胞中表达。方法通过RT-PCR,获得广谱抗LPSmAbC3A2IgG的Fd和完整轻链LCcDNA片段。在分别构建了pcDNA3-Fd和pcDNA3-LC表达载体的基础上,将包括BPIN端抗LPS活性中心的180bpDNA片段,通过一段... 展开更多; 关键词 LPS FAB 杀菌通透性增强蛋白真核表达 IGG; 在线阅读下载PDF 职称材料

survivin短发夹状RNA真核表达载体的构建及其对宫颈癌细胞survivin表达的影响被引量：6: 2; 作者宋晖辛晓燕 +3 位作者肖锋王德堂岳乔红郭会玲《医学研究生学报》 CAS 2008年第8期795-799,I0001,共6页; 目的:构建survivin基因短发夹状RNA(shRNA)真核表达载体,并观察其对宫颈癌细胞survivin表达的抑制作用。方法:设计、合成2对survivin特异性微小片段RNA引物(s1、s2),退火连接后利用DNA重组技术,将其分别克隆入真核表达载体pSilencer 2.1... 展开更多; 关键词 SURVIVIN 短发夹状RNA 真核表达载体宫颈肿瘤; 在线阅读下载PDF 职称材料

西安地区一株TT病毒的基因克隆及序列分析: 3; 作者苏明权马越云 +3 位作者张林张建芳于文彬丁振若《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期441-442,共2页; 目的对TTV阳性扩增产物进行克隆及测序,以了解西安地区TTV基因型及基因结构的特点。方法采用巢式PCR从转氨酶活性异常增高的患者血清中,得到TTV阳性扩增产物,将其插入pGEM-Teasy载体,进行克隆及序列分析。结果获得1个pGEM-TTV重组载体... 展开更多; 关键词 TTV 基因克隆序列分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

人杀菌/通透性增强蛋白活性片段基因在CHO细胞中的表达: 4; 作者刘家云龙铟 +4 位作者马越云丁振若于文彬苏明权郝晓柯《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期416-419,共4页; 目的获得人杀菌/通透性增强蛋白(bactericidal/permeability-increasing protein,BPI)N端活性片段蛋白,为BPI结构和功能的研究提供有力的工具。方法提取人外周血多形核白细胞(PMN)总RNA进行逆转录反应,经套式PCR扩增出BPIN端基因片段,... 展开更多; 关键词杀菌/通透性增强蛋白逆转录PCR 真核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名IgG Fab-BPI融合蛋白真核表达载体的构建及其在CHO细胞中的表达被引量：7: 1; 作者马越云马文煜于文彬尹文苏明权丁振若; 机构第四军医大学西京医院临床分子生物学研究中心第四军医大学微生物学教研室; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期470-472,共3页; 基金国家自然科学基金课题No.39800154; 文摘目的构建抗抗LPSFab-BPI真核表达载体,并在CHO细胞中表达。方法通过RT-PCR,获得广谱抗LPSmAbC3A2IgG的Fd和完整轻链LCcDNA片段。在分别构建了pcDNA3-Fd和pcDNA3-LC表达载体的基础上,将包括BPIN端抗LPS活性中心的180bpDNA片段,通过一段长16个氨基酸的linker连接于上述Fab表达载体中Fd基因的下游,构建成Fab-BPI融合蛋白FB真核表达载体。将pcDNA3-LC质粒中包括hCMV启动子、LC和BGHpolyA等序列在内的片段,插入到pcDNA3-Fd中hCMV启动子上游,从而构建成单质粒的Fab-BPI表达载体pcD-NA3-FB,转染真核细胞。结果序列测定表明,重组质粒构建正确。pcDNA3-FB转染CHO细胞后,经ELISA、免疫荧光和mR-NA鉴定表达成功,免疫印迹试验显示,与抗κ轻链和抗BPI抗体反应的蛋白区带的Mr均为60000左右。交叉反应试验证明,Fab和FB与多种革兰氏阴性菌的LPS有交叉反应性。结论成功地在CHO细胞中表达出了抗LPSFab-BPIFB融合蛋白。FB作为融合蛋白,集广泛交叉反应性和强大中和活性于一身,有可能成为更适于临床应用的新的抗LPS免疫制剂。; 关键词 LPS FAB 杀菌通透性增强蛋白真核表达 IGG; Keywords lipopolysaccharide Fab bactericidal /permeability increas-ing protein eukaryotic expression; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名survivin短发夹状RNA真核表达载体的构建及其对宫颈癌细胞survivin表达的影响被引量：6: 2; 作者宋晖辛晓燕肖锋王德堂岳乔红郭会玲; 机构第四军医大学西京医院妇产科第四军医大学西京医院放射治疗科第四军医大学西京医院临床分子生物学研究中心; 出处《医学研究生学报》 CAS 2008年第8期795-799,I0001,共6页; 文摘目的:构建survivin基因短发夹状RNA(shRNA)真核表达载体,并观察其对宫颈癌细胞survivin表达的抑制作用。方法:设计、合成2对survivin特异性微小片段RNA引物(s1、s2),退火连接后利用DNA重组技术,将其分别克隆入真核表达载体pSilencer 2.1-U6 neo,酶切、鉴定测序后,经脂质体转染宫颈癌HeLa细胞,G418筛选阳性克隆,半定量RT-PCR检测survivin mRNA表达,Western blot检测survivin蛋白表达。结果:成功构建了survivin shRNA真核表达载体pSilencer2.1-s1和pSilencer2.1-s2,G418筛选24 d后出现阳性克隆,转染pSilencer2.1-s1和pSilencer2.1-s2的HeLa细胞中,survivin表达呈现不同程度下调,pSilencer2.1-s2的干涉效果较好。结论:成功构建并筛选出干涉效果较好的survivin shRNA真核表达载体,为进一步研究其对宫颈癌细胞生物学行为的影响奠定了实验基础。; 关键词 SURVIVIN 短发夹状RNA 真核表达载体宫颈肿瘤; Keywords survivin Short hairpin RNA Eukaryotic expression vector Cervical tumor; 分类号 R737.33 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名西安地区一株TT病毒的基因克隆及序列分析: 3; 作者苏明权马越云张林张建芳于文彬丁振若; 机构第四军医大学西京医院临床分子生物学研究中心; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期441-442,共2页; 文摘目的对TTV阳性扩增产物进行克隆及测序,以了解西安地区TTV基因型及基因结构的特点。方法采用巢式PCR从转氨酶活性异常增高的患者血清中,得到TTV阳性扩增产物,将其插入pGEM-Teasy载体,进行克隆及序列分析。结果获得1个pGEM-TTV重组载体。序列分析表明,插入片段为196bp。该序列与AF065400株等对应位置的核苷酸同源性分别为:AF065400中国株94.9%、AF351132中国株98.0%和NC-002076日本株99.0%。结论西安地区TTV阳性扩增序列与报道的AF065400株、AF351132株和NC-002076株的序列具有高度的同源性,属同个基因型别。; 关键词 TTV 基因克隆序列分析; Keywords TT virus gene cloning sequencing; 分类号 R373.21 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人杀菌/通透性增强蛋白活性片段基因在CHO细胞中的表达: 4; 作者刘家云龙铟马越云丁振若于文彬苏明权郝晓柯; 机构第四军医大学西京医院临床分子生物学研究中心第四军医大学西京医院中医科; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期416-419,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目(39800154); 文摘目的获得人杀菌/通透性增强蛋白(bactericidal/permeability-increasing protein,BPI)N端活性片段蛋白,为BPI结构和功能的研究提供有力的工具。方法提取人外周血多形核白细胞(PMN)总RNA进行逆转录反应,经套式PCR扩增出BPIN端基因片段,将其克隆入pUC19载体中并进行酶切鉴定和序列测定,然后亚克隆入质粒pcDNA3构建真核表达载体pcDNA-BPI;重组载体通过脂质体转染CHO细胞并筛选阳性克隆,免疫荧光法鉴定重组BPI的表达和免疫学活性。结果酶切鉴定和序列分析证实重组质粒含有包括信号肽在内的BPI活性片段编码序列,与文献报道的序列相比,有6个核苷酸差异。转染筛选的阳性CHO细胞克隆表达产物能够被抗BPI的单克隆抗体所识别。结论BPI活性片段表达载体的构建及真核表达成功,为BPI功能的研究奠定了基础。; 关键词杀菌/通透性增强蛋白逆转录PCR 真核表达; Keywords bactericidal/permeability-increasing protein RT-PCR eukaryotic expression; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	IgG Fab-BPI融合蛋白真核表达载体的构建及其在CHO细胞中的表达	马越云马文煜于文彬尹文苏明权丁振若	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2001	7	在线阅读下载PDF 职称材料
2	survivin短发夹状RNA真核表达载体的构建及其对宫颈癌细胞survivin表达的影响	宋晖辛晓燕肖锋王德堂岳乔红郭会玲	《医学研究生学报》 CAS	2008	6	在线阅读下载PDF 职称材料
3	西安地区一株TT病毒的基因克隆及序列分析	苏明权马越云张林张建芳于文彬丁振若	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2001	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	人杀菌/通透性增强蛋白活性片段基因在CHO细胞中的表达	刘家云龙铟马越云丁振若于文彬苏明权郝晓柯	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2007	0	在线阅读下载PDF 职称材料