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唐古特大黄多糖对过氧化氢诱导的肠上皮细胞凋亡的保护作用及其可能机制 被引量：6
1
作者 刘琳娜 张峰 +2 位作者 梅其炳 张琰 刘新友 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期877-881,共5页
目的探讨唐古特大黄多糖(Rheum tanguticumpoly-saccharide,RTP)组分1(RTP1)对过氧化氢(H2O2)诱导的肠上皮细胞IEC-6凋亡的保护作用及其可能的机制。方法以不同浓度的RTP1(10、30、100 mg.L-1)预处理体外培养的IEC-6细胞后,加入H2O2诱导... 目的探讨唐古特大黄多糖(Rheum tanguticumpoly-saccharide,RTP)组分1(RTP1)对过氧化氢(H2O2)诱导的肠上皮细胞IEC-6凋亡的保护作用及其可能的机制。方法以不同浓度的RTP1(10、30、100 mg.L-1)预处理体外培养的IEC-6细胞后,加入H2O2诱导IEC-6细胞凋亡,MTT法检测细胞活力,激光共聚焦显微镜荧光染色法检测细胞内活性氧的产生,DNA琼脂糖凝胶电泳、吖啶橙染色及流式细胞仪检测细胞凋亡的发生,Western blot测定Caspase-3酶活性。结果 100μmol.L-1H2O2处理细胞2 h明显降低细胞存活率并诱导细胞凋亡,凋亡率为31.3%,细胞内活性氧水平及Caspase-3的活性明显升高,不同浓度(10、30、100 mg.L-1)RTP1预处理细胞24 h,可明显提高细胞存活率,有效抑制DNAladder的发生,流式细胞仪检测凋亡率(30、100 mg.L-1)分别降低至24.4%和21.5%,Caspase-3酶活性降低,并呈现一定的剂量依赖性。结论 RTP1可明显抑制H2O2诱导的IEC-6细胞凋亡,其细胞保护作用可能与降低细胞内活性氧水平和抑制Caspase-3活性相关。 展开更多
关键词 唐古特大黄多糖 细胞凋亡 过氧化氢 IEC-6细胞 活性氧 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3
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β-七叶皂苷早期应用对大鼠脊髓损伤的保护作用 被引量：10
2
作者 程鹏 冯斌 鞠躬 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期119-123,共5页
目的:观察β-七叶皂苷(β-aescin)对大鼠脊髓损伤后继发性损害的保护作用。方法:本实验采用NYUⅡ型脊髓撞击伤仪制成中度脊髓损伤模型。术后30 min,所有大鼠分别经腹腔给予β-七叶皂苷(1.0 mg/kg)或盐水治疗,3次/d,连给3 d。术后,于各... 目的:观察β-七叶皂苷(β-aescin)对大鼠脊髓损伤后继发性损害的保护作用。方法:本实验采用NYUⅡ型脊髓撞击伤仪制成中度脊髓损伤模型。术后30 min,所有大鼠分别经腹腔给予β-七叶皂苷(1.0 mg/kg)或盐水治疗,3次/d,连给3 d。术后,于各时间点采用BBB评分和足迹实验对大鼠双后肢运动功能进行评估;术后24 h,对损伤部位脊髓组织丙二醛(MDA)含量及髓过氧化物酶(MPO)活性进行检测;术后14 d行免疫组织化学检查,利用胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)观察损伤星形胶质瘢痕及其包围的坏死空洞,利用抗CD68/ED1观察活性小胶质细胞和巨噬细胞。结果:β-七叶皂苷组运动功能明显改善(P<0.05);伤后24 h,β-七叶皂苷组大鼠脊髓组织中MDA水平降低67%(P<0.01),MPO活性降低50%(P<0.01);伤后14 d,β-七叶皂苷组空洞面积减小29.3%(P<0.01),ED1染色阳性面积减少32.3%(P<0.01)。结论:β-七叶皂苷治疗可以减轻脊髓损伤后自由基的氧化损伤作用,减小空洞面积,减少炎症细胞的活化和浸润,促进脊髓损伤后的修复。 展开更多
关键词 β--七叶皂苷 脊髓损伤 脂质过氧化 炎症反应 大鼠
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GLP-1R介导脑缺血/再灌注损伤保护作用的记忆效应
3
作者 马雪 张慧楠 +2 位作者 孟静茹 贾敏 罗晓星 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第B11期167-168,共2页
目的观察胰高血糖素样肽-1（GLP-1）受体激动剂exendin-4对脑缺血/再灌注损伤保护作用的记忆效应及机制.方法C57BL/6小鼠皮下注射GLP-1受体激动剂exendin-4（5μg·kg^-1·d^-1）治疗,采用不同的给药周期（1d、3d、7d）治疗后停... 目的观察胰高血糖素样肽-1（GLP-1）受体激动剂exendin-4对脑缺血/再灌注损伤保护作用的记忆效应及机制.方法C57BL/6小鼠皮下注射GLP-1受体激动剂exendin-4（5μg·kg^-1·d^-1）治疗,采用不同的给药周期（1d、3d、7d）治疗后停药,分别在各自的治疗周期结束后的第2、4、6、8、10天采用线栓法阻塞大脑中动脉（MCAO）进行脑缺血/再灌注损伤,通过神经功能缺陷评分和TTC染色评价神经功能与脑梗死体积;检测血浆和脑组织中exendin-4的浓度,评价血中和脑内exendin-4浓度与记忆效应的相关性.结果exendin-4在停药后第6天仍能够明显减少急性缺血/再灌注损伤后的梗死体积,改善神经功能评分;停药后第2天血浆和脑中均未检测到exendin-4;采用shRNA沉默GLP-1R后,exendin-4介导的保护作用的记忆效应消失.结论GLP-1受体激动剂exendin-4对小鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用具有记忆效应. 展开更多
关键词 胰高血糖素样肽-1 受体 激动剂 脑缺血 EXENDIN-4 MCAO
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新型抗多重耐药金葡菌化合物成药性研究
4
作者 李明凯 侯征 +6 位作者 李靖 周颖 李汾 曲迪 罗礼阳 贾敏 罗晓星 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第B11期249-250,共2页
目的以感染率高、治疗困难、临床常见的多重耐药金黄色葡萄球菌为目标,研制出具有杀菌活性强、安全性高、成药性好的新型抗菌药物.方法在前期合成的多个系列共计153个新型香豆素类化合物基础上,利用红外光谱、核磁等技术进行结构鉴定.... 目的以感染率高、治疗困难、临床常见的多重耐药金黄色葡萄球菌为目标,研制出具有杀菌活性强、安全性高、成药性好的新型抗菌药物.方法在前期合成的多个系列共计153个新型香豆素类化合物基础上,利用红外光谱、核磁等技术进行结构鉴定.在培养的耐药金黄色葡萄球菌上检测最低抑菌浓度（MIC）;制.进一步检测其药代动力学参数和耐药性,并进行急性毒性和长期毒性等初步安全性评价.结果在多种耐药金黄色葡萄球菌标准株和临床菌株,药敏试验结果显示其中化合物14具有明显杀菌作用（MIC为4mg·L^-1）,而上述耐药菌株对临床常用抗生素不同程度耐药.在建立的耐药金葡菌致BALB/c小鼠感染模型,感染1h后给予化合物14,可以明显提高耐药金葡菌诱导的脓毒血症模型小鼠生存时间和生存率;明显降低小鼠血液、肝脏和肺脏内耐药细菌CFU,改善模型动物肝脏、肺脏等重要脏器的炎症损伤.透射电镜结果显示化合物14对细菌拟核区致密物质有明显作用,且这种改变与阳性对照抗生素左氧氟沙新存在差异.利用质谱仪iTRAQ定量分析技术,化合物14对耐药细菌精氨酸代谢通路关键酶的表达有明显抑制作用.♂SD大鼠灌胃给予14mg·kg^-1化合物14后,使用WatsonLIMS7-2按照非房室模型计算药代动力学参数,结果显示其达峰时间为4h,Cmax为（2.7±0.41）mg·L^-1,t1/2为10h.在药物敏感和耐药金葡菌,化合物14持续处理20d,经过10代后细菌未观察到耐药情况发生,最低抑菌浓度为4mg·L^-1.小鼠急性毒性试验结果显示其LD50为1270mg·kg^-1,大鼠长期毒性试验：SD大鼠每天灌胃给予化合物14（5,15和75mg·kg^-1）,共90d,低、中剂量组动物活动、外观及行为未见明显变化,无死亡情况发生,重要脏器无病理学无重量和器质性病理改变,高剂量组动物死亡率为15%,有皮下血肿和消化道出血病理改变.结论新型香豆素类化合物14对耐药金黄色葡萄球菌有明显抑菌作用,其抗菌机制可能通过影响细菌精氨酸代谢通路有关.具有良好的药代动力学参数,细菌对其不易产生耐药性,初步安全性评价显示其毒性较小,有望将其研发为创新性强的抗多重耐药金黄色葡萄球菌新型药物. 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 细菌耐药 香豆素 最低抑菌浓度 安全性评价
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3-全乙酰化半乳吡喃糖基-5-氟尿嘧啶的合成及其体外抗肿瘤活性研究 被引量：2
5
作者 黄海涛 姜茹 +1 位作者 岳正刚 梅其炳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1710-1713,共4页
目的设计合成5-氟尿嘧啶半乳糖衍生物,并对其抗肿瘤活性进行评价。方法以5-氟尿嘧啶结构为基础,化学合成3-全乙酰化半乳吡喃糖基-5-氟尿嘧啶(3-PGF),采用质谱(MS)及核磁共振氢谱(1H-NMR)对其结构进行表征;MTT比色分析法比较3-PGF与5-FU... 目的设计合成5-氟尿嘧啶半乳糖衍生物,并对其抗肿瘤活性进行评价。方法以5-氟尿嘧啶结构为基础,化学合成3-全乙酰化半乳吡喃糖基-5-氟尿嘧啶(3-PGF),采用质谱(MS)及核磁共振氢谱(1H-NMR)对其结构进行表征;MTT比色分析法比较3-PGF与5-FU作用于人结肠癌细胞(SW-1116)及正常人肠上皮细胞(HIEC)后,其对细胞生长抑制率的差异。结果 MS和1H-NMR的结果确证合成化合物为目标产物;体外实验结果表明,3-PGF(0.01～100μmol.L-1)作用于SW-1116细胞48 h后,其对细胞的生长抑制率为8.45%～65.53%,呈浓度依赖性。在HIEC细胞中,3-PGF的细胞生长抑制作用明显低于5-FU。结论本实验成功合成了5-氟尿嘧啶半乳糖衍生物——3-全乙酰化半乳吡喃糖基-5-氟尿嘧啶,不仅具有较好的抗肿瘤活性,同时,该衍生物的毒性明显低于5-FU,为5-FU衍生物的设计合成提供了新的思路。 展开更多
关键词 5-氟尿嘧啶 半乳糖 衍生物 3-PGF 抗肿瘤活性 毒性
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耐药基因mecA阻断策略逆转MRSA耐药性研究 被引量：1
6
作者 祝强强 杨福泰 +4 位作者 周诗萌 王宁 贾敏 马雪 孟静茹 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期936-941,共6页
目的探讨脂质体包裹的靶向耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)耐药基因mecA的硫代寡聚脱氧核苷酸(PSODN010)能否有效逆转MRSA对β-内酰胺类抗生素的耐药性。方法以mecA mRNA为靶点设计合成PS-ODN010;薄膜分散法制备新型的包裹PS-ODN/PEI纳... 目的探讨脂质体包裹的靶向耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)耐药基因mecA的硫代寡聚脱氧核苷酸(PSODN010)能否有效逆转MRSA对β-内酰胺类抗生素的耐药性。方法以mecA mRNA为靶点设计合成PS-ODN010;薄膜分散法制备新型的包裹PS-ODN/PEI纳米微粒脂质体并进行质量评估;体外实验测定细菌生长曲线、菌落数(CFU)等;实时定量PCR法检测PS-ODN010对mecA表达的影响。结果实验结果显示脂质体的包封率为75.9%±3.91%;脂质体包裹的PS-ODN010能浓度依赖性的抑制mecA表达;给予脂质体包裹的PS-ODN010后,苯唑西林明显抑制MRSA的生长(P<0.01),MRSA的菌落数明显低于对照组(P<0.01),苯唑西林等5种β-内酰胺类抗生素对MRSA的MIC显著降低。结论脂质体包裹的抗mecA的PS-ODN010能够选择性抑制MRSA的mecA表达,有效逆转MRSA对β-内酰胺类抗生素的耐药性。 展开更多
关键词 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 硫代寡聚脱氧核苷酸 耐药性 MECA 纳米微粒 脂质体
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肠出血性大肠杆菌群体感受系统拮抗策略抗菌机制研究
7
作者 曲迪 李治 +2 位作者 罗礼阳 李明凯 罗晓星 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1090-1091,共2页
目的研究LED209抑制肠出血性大肠杆菌(EHEC)群体感受器Qse C后的体内外抗菌作用,并探寻其抗菌作用机理,寻求不诱导细菌耐药的抗菌新策略。方法利用108CFU肠出血性大肠杆菌EHEC O157:H7野生菌株、EHEC O157:H7的群体感受器Qse C缺陷菌感... 目的研究LED209抑制肠出血性大肠杆菌(EHEC)群体感受器Qse C后的体内外抗菌作用,并探寻其抗菌作用机理,寻求不诱导细菌耐药的抗菌新策略。方法利用108CFU肠出血性大肠杆菌EHEC O157:H7野生菌株、EHEC O157:H7的群体感受器Qse C缺陷菌感染BALB/c小鼠(8~10只/组),并使用5,10和20 mg·kg-1的Qse C抑制剂LED209进行治疗,观察并计数小鼠生存率以及感染小鼠脏器中细菌菌落数(CFU),评价LED209的体内抗菌活性;使用氯磷酸脂质体清除小鼠巨噬细胞后进行腹腔感染,评价EHEC感染时巨噬细胞发挥的保护作用;建立巨噬细胞和EHEC O157:H7野生菌株、EHEC O157:H7的Qse C缺陷菌的共培养模型,使用透射电镜以及流式细胞仪观察及检测LED209对巨噬细胞吞噬细胞功能的影响。提取感染后巨噬细胞中的蛋白,使用Western blotting检测NLRP3-caspase-1介导的炎性复合体的活化程度以及MMP12的表达,使用平板计数法评价巨噬细胞的菌落数,评价巨噬细胞胞内杀菌活性。结果 EHEC O157:H7群体感受抑制剂LED209能够增加感染小鼠生存率,且具有显著的剂量关系,20 mg·kg-1LED209能够提升感染小鼠生存率至60%,并降低小鼠肝、脾、肺、肾中的菌落数,具有体内保护作用;清除小鼠腹腔巨噬细胞后,LED209治疗组与对照组相比小鼠生存率无差异,即巨噬细胞介导群体感受抑制剂的体内保护作用。体外感染巨噬细胞后,LED209 200μmol·L-1能增加巨噬细胞对细菌的吞噬作用,且能增加NLRP3-caspase-1炎性复合体的活化以及巨噬细胞金属基质蛋白酶MMP12的表达水平,降低巨噬细胞中菌落数。结论 LED209抑制EHEC的群体感受器后可以增强巨噬细胞对细菌的吞噬作用;增强巨噬细胞中NLRP3-caspase-1介导的炎性复合体的活化,增加MMP12的表达从而发挥胞内杀菌作用。 展开更多
关键词 肠出血性大肠杆菌 群体感受系统 巨噬细胞 炎性复合体 巨噬细胞金属基质蛋白酶
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EHEC群体感受器QseC拮抗策略
8
作者 曲迪 李明凯 罗晓星 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第B11期8-8,共1页
抗生素应用于感染治疗会不可避免地诱导细菌耐药,致使其临床应用面临严峻挑战.因此研制不诱导耐药的新型抗菌药物成为未来的新方向和热点.LED209是靶向于细菌群体感受系统（QS）的新型抗菌药物,本文报道了出血性大肠杆菌（EHEC）感染治... 抗生素应用于感染治疗会不可避免地诱导细菌耐药,致使其临床应用面临严峻挑战.因此研制不诱导耐药的新型抗菌药物成为未来的新方向和热点.LED209是靶向于细菌群体感受系统（QS）的新型抗菌药物,本文报道了出血性大肠杆菌（EHEC）感染治疗的新策略.对于体外抗菌研究中,采用测定药物对细菌的最低抑菌浓度以及细菌生长曲线的方法评价了LED209的体外抑菌效果.对于体内抗菌研究方面,制作小鼠脓毒败血症模型,进而给予LED209进行治疗,记录小鼠生存率、脏器中菌落数以及观察脏器病理组织切片,来评价LED209的体内抗菌作用.结果显示,LED209在体外不抑制细菌的生长而在体内能明显提高小鼠生存率,降低感染小鼠脏器中的菌落数,改善脏器病理组织损伤.LED209在体外没有抑菌活性,不会造成细菌的选择性生长压力,不会诱导细菌耐药.在体内,LED209抑制细菌毒力因子表达,继而调控机体抗菌免疫应答效应发挥抗菌作用.这解释了抗细菌感染的新策略. 展开更多
关键词 出血性大肠杆菌 最低抑菌浓度 生长曲线 脓毒败血症 生存曲线 组织病理损伤 脏器CFU
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BKCa通道对小鼠杏仁核锥体神经元兴奋性的影响
9
作者 郭艳艳 张晓楠 招明高 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期578-582,共5页
目的:观察大电导钙依赖性钾通道(large conductance calcium-activated potassium channels,BKCa)对小鼠外侧杏仁核锥体细胞神经元兴奋性的影响。方法:采用全细胞脑片膜片钳技术,记录小鼠杏仁核锥体神经元动作电位频率和幅度的变化。结... 目的:观察大电导钙依赖性钾通道(large conductance calcium-activated potassium channels,BKCa)对小鼠外侧杏仁核锥体细胞神经元兴奋性的影响。方法:采用全细胞脑片膜片钳技术,记录小鼠杏仁核锥体神经元动作电位频率和幅度的变化。结果:在电流钳全细胞记录模式下输入一定强度的正电流诱导神经元发放动作电位,观察到灌流BKCa通道阻断剂iberiotoxin(IBTX100nmol/L)可显著增加动作电位发放频率,并缩短首个动作电位出现潜伏期;相反,BKCa通道激动剂NS1619(10μmol/L)可显著降低动作电位发放频率,并延长首个动作电位出现潜伏期。此外,BKCa通道参与单个动作电位后超极化电位(after hyperpolarizing potential,AHP)的形成。在电极内液中加入快速型钙离子螯合剂BAPTA(10mmol/L)可取消IBTX和NS1619对动作电位的影响。结论:BKCa通道对杏仁核锥体神经元的兴奋性具有重要的调节作用。 展开更多
关键词 大电导钙依赖性钾通道 神经元 兴奋性 杏仁核 小鼠
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