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siRNA沉默SOCS1表达增强IFN-α2a-NGR的抗肿瘤效应被引量：5: 1; 作者黄启超雷小英 +4 位作者刘艳隋文君李慎张英起颜真《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期412-415,共4页; 目的:研究肿瘤血管导向性干扰素IFN-α2a-NGR抗肿瘤效应的分子机制,发现影响干扰素敏感性的关键信号分子,提高耐药肿瘤细胞敏感性。方法:培养IFNAR高表达细胞株A549、IFNAR低表达细胞株MKN-45,通过MTT检测IFN-α2a-NGR的抗细胞增殖活性... 展开更多; 关键词干扰素 IFN-α2a-NGR 肿瘤信号转导; 在线阅读下载PDF 职称材料

类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞中膜联蛋白A2磷酸化修饰增强基质金属蛋白酶9的活性被引量：3: 2; 作者赵薇穆楠 +2 位作者舒震张昭张伟《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1363-1366,1371,共5页; 目的研究膜联蛋白A2(ANXA2)磷酸化修饰对类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞(RAFLS)基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9水平及活性的影响。方法原代培养RAFLS,构建包装ANXA2干涉慢病毒,制备ANXA2显著下调的FLS(si ANXA2/FLS)及同型对照作... 展开更多; 关键词类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞膜联蛋白A2 基质金属蛋白酶9 明胶酶谱; 在线阅读下载PDF 职称材料

HER2靶向免疫促凋亡蛋白e23sFv-Fdt-tBid原核表达载体构建及其基因工程菌种稳定性的鉴定被引量：2: 3; 作者席文锦彭红艳 +7 位作者白文栋郑国旭史圣甲皇甫罗锴王曦贾林涛张英起杨安钢《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期93-95,共3页; 目的构建HER2靶向免疫促凋亡蛋白e23sFv-Fdt-tBid的原核表达载体并鉴定其基因工程菌种稳定性。方法应用PCR技术以pCMV-e23sFv-Fdt-tBid为模板扩增e23sFv-Fdt-tBid片段,并将其克隆入pET-22b原核表达载体;将该表达载体转化BL21大肠杆菌并... 展开更多; 关键词 HER2 原核表达基因工程菌种稳定性; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组质粒pFLAG-CMV2-FcDDR2的构建及应用: 4; 作者赵薇张昭 +3 位作者黄同列穆楠田菲张伟《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1234-1237,共4页; 目的构建人盘状结构域受体2(DDR2)与IgG Fc段嵌合受体的重组质粒(pFLAG-CMV2-Fc DDR2),检测其自主磷酸化水平。方法设计Fc DDR2克隆引物,以质粒pSec Tag2B-Fc DDR2为模板,PCR扩增IgG Fc段与DDR2跨膜区和胞内区的c DNA序列(Fc DDR2),将... 展开更多; 关键词重组质粒 FcDDR2 HEK293T细胞胶原刺激磷酸化; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名siRNA沉默SOCS1表达增强IFN-α2a-NGR的抗肿瘤效应被引量：5: 1; 作者黄启超雷小英刘艳隋文君李慎张英起颜真; 机构国家肿瘤生物学重点实验室国家肿瘤生物学重点实验室; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期412-415,共4页; 基金国家自然科学基金面上项目(30572210) 国家高技术研究发展计划(863)资助项目(2007AA02204) +1 种基金陕西省科技攻关项目(2008K09-09) 陕西省自然科学基金资助(2009JM4005); 文摘目的:研究肿瘤血管导向性干扰素IFN-α2a-NGR抗肿瘤效应的分子机制,发现影响干扰素敏感性的关键信号分子,提高耐药肿瘤细胞敏感性。方法:培养IFNAR高表达细胞株A549、IFNAR低表达细胞株MKN-45,通过MTT检测IFN-α2a-NGR的抗细胞增殖活性,流式细胞术(FCM)、Western blot检测IFN-α2a-NGR处理前后STAT1、p-STAT1、p53、OAS与SOCS1的表达变化,合成siRNA靶向干涉SOCS1。结果:IFN-α2a-NGR刺激后,A549中,p-STAT1、p53、OAS与SOCS1表达上调;MKN-45中P53、OAS无显著变化,SOCS1显著上调。靶向干涉SOCS1后,MKN-45对IFN-α2a-NGR的敏感性增加[抑制率从(14.69±1.05)%提高到(36.97±2.05)%]。结论:IFN-α2a-NGR与IFN-α2a在细胞和分子水平的效应基本一致,p-STAT1、p53与SOCS1可影响细胞对干扰素的敏感性,通过siRNA沉默技术可提高耐药细胞株敏感性,为IFN-α2a-NGR的进一步研发奠定了基础。; 关键词干扰素 IFN-α2a-NGR 肿瘤信号转导; Keywords interferon IFN-α2a-NGR tumor signal transduction; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞中膜联蛋白A2磷酸化修饰增强基质金属蛋白酶9的活性被引量：3: 2; 作者赵薇穆楠舒震张昭张伟; 机构第四军医大学药学系生物制药学教研室宁夏医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1363-1366,1371,共5页; 基金国家自然科学基金(81260460 81302560 +1 种基金 81273279 81373201); 文摘目的研究膜联蛋白A2(ANXA2)磷酸化修饰对类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞(RAFLS)基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9水平及活性的影响。方法原代培养RAFLS,构建包装ANXA2干涉慢病毒,制备ANXA2显著下调的FLS(si ANXA2/FLS)及同型对照作为细胞模型,采用2型胶原蛋白刺激法间接磷酸化RAFLS中的ANXA2。实时定量PCR(qRT-PCR)分析ANXA2磷酸化对RAFLS细胞中MMP-2和MMP-9表达的影响,明胶酶谱实验观察ANXA2活化对RAFLS中MMP-2和MMP-9活性的影响。结果 qRT-PCR结果提示ANXA2磷酸化修饰对RAFLS中MMP-2和MMP-9的水平无显著影响,明胶酶谱实验显示ANXA2磷酸化修饰能够增强MMP-9的活性。结论通过胶原蛋白刺激法间接促进RAFLS中ANXA2的磷酸化修饰,显著增强MMP-9的活性。; 关键词类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞膜联蛋白A2 基质金属蛋白酶9 明胶酶谱; 分类号 R593.22 [医药卫生—内科学] Q493.2 [生物学—生理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名HER2靶向免疫促凋亡蛋白e23sFv-Fdt-tBid原核表达载体构建及其基因工程菌种稳定性的鉴定被引量：2: 3; 作者席文锦彭红艳白文栋郑国旭史圣甲皇甫罗锴王曦贾林涛张英起杨安钢; 机构第四军医大学基础部免疫学教研室新疆解放军第第四军医大学西京医院神经外科第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室第四军医大学药学系生物制药学教研室; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期93-95,共3页; 基金国家自然科学基金重点项目(81030045) 陕西省科学技术研究发展计划社发攻关项目(2012K13-02-06); 文摘目的构建HER2靶向免疫促凋亡蛋白e23sFv-Fdt-tBid的原核表达载体并鉴定其基因工程菌种稳定性。方法应用PCR技术以pCMV-e23sFv-Fdt-tBid为模板扩增e23sFv-Fdt-tBid片段,并将其克隆入pET-22b原核表达载体;将该表达载体转化BL21大肠杆菌并挑取表达蛋白较高的克隆菌,划线接种传代50次;通过革兰氏染色方法、扫描电镜形态观察、菌种质粒酶切鉴定及蛋白诱导表达的Western blot分析鉴定e23sFv-Fdt-tBid免疫促凋亡蛋白表达工程菌的稳定性。结果成功构建pET-22b-e23sFv-Fdt-tBid原核表达载体,并在BL21大肠杆菌中诱导表达;革兰氏染色方法、扫描电镜形态观察、菌种质粒酶切鉴定及Western blot法鉴定结果表明基因工程菌种稳定性良好,可以稳定表达免疫促凋亡蛋白e23sFv-Fdt-tBid。结论成功构建了HER2靶向免疫促凋亡蛋白原核表达载体,鉴定了表达该免疫促凋亡蛋白的基因工程菌种稳定性,为HER2靶向免疫促凋亡蛋白e23sFv-Fdt-tBid的应用研究奠定了基础。; 关键词 HER2 原核表达基因工程菌种稳定性; 分类号 R392.9 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组质粒pFLAG-CMV2-FcDDR2的构建及应用: 4; 作者赵薇张昭黄同列穆楠田菲张伟; 机构第四军医大学药学系生物制药学教研室宁夏医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系第四军医大学基础部教学实验中心; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1234-1237,共4页; 基金国家自然科学基金(81260460 81302560 +3 种基金 81273279 81373201) 陕西省自然科学基金(2012K-03-05); 文摘目的构建人盘状结构域受体2(DDR2)与IgG Fc段嵌合受体的重组质粒(pFLAG-CMV2-Fc DDR2),检测其自主磷酸化水平。方法设计Fc DDR2克隆引物,以质粒pSec Tag2B-Fc DDR2为模板,PCR扩增IgG Fc段与DDR2跨膜区和胞内区的c DNA序列(Fc DDR2),将其插入pFLAG-CMV2真核表达载体中。PCR扩增鉴定并测序验证重组质粒pFLAG-CMV2-Fc DDR2后,将其转染人胚肾HEK293T细胞,Western blot法验证HEK293T细胞中目标蛋白Fc DDR2的表达效率。将pcDNA3.1-DDR2转染HEK293T细胞,给予2型胶原蛋白刺激后作为阳性对照,用小鼠来源抗DDR2抗体免疫沉淀`pFLAG-CMV2-Fc DDR2阳性的HEK293T细胞及胶原刺激的pcDNA3.1-DDR2阳性的HEK293T细胞,4G10抗体分析DDR2的磷酸化水平,评价Fc DDR2的自主磷酸化能力。结果重组质粒pFLAG-CMV2-Fc DDR2的PCR扩增产物为大小约2800 bp左右的片段,与预期相符,测序验证正确。Western blot结果提示pFLAG-CMV2-Fc DDR2转染后的HEK293T细胞,FLAG-Fc DDR2表达水平显著上调。免疫沉淀结合Western blot分析提示FcDDR2的磷酸化水平与胶原刺激后的DDR2水平相当。结论成功构建了pFLAG-CMV2-FcDDR2真核表达载体,Fc DDR2的自主磷酸化与胶原蛋白刺激后DDR2的活化水平相当,可以用作DDR2经胶原蛋白刺激后的活化替代形式。; 关键词重组质粒 FcDDR2 HEK293T细胞胶原刺激磷酸化; 分类号 R392.1 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	siRNA沉默SOCS1表达增强IFN-α2a-NGR的抗肿瘤效应	黄启超雷小英刘艳隋文君李慎张英起颜真	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2010	5	在线阅读下载PDF 职称材料
2	类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞中膜联蛋白A2磷酸化修饰增强基质金属蛋白酶9的活性	赵薇穆楠舒震张昭张伟	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2015	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	HER2靶向免疫促凋亡蛋白e23sFv-Fdt-tBid原核表达载体构建及其基因工程菌种稳定性的鉴定	席文锦彭红艳白文栋郑国旭史圣甲皇甫罗锴王曦贾林涛张英起杨安钢	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2013	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	重组质粒pFLAG-CMV2-FcDDR2的构建及应用	赵薇张昭黄同列穆楠田菲张伟	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2015	0	在线阅读下载PDF 职称材料