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题名人-鼠杂合Fab噬菌体抗体库的建立
被引量：1
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作者
包国强
马庆久
邢金良
杨向民
陈志南
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机构
第四军医大学唐都医院
第四军医大学细胞工程中心
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出处
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第5期433-435,共3页
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基金
国家自然科学基金资助课题 (编号 30 0 70 842 )
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文摘
目的 建立人 鼠杂合Fab噬菌体抗体库 ,经过扩增和筛选 ,得到目的抗体。方法 自肝癌患者外周血单个核细胞中扩增全套人抗体Fd片段基因 ,分别克隆入含嵌合轻链的展示载体pComb3和pComb3X中 ,建立人 鼠杂合Fab噬菌体抗体库。然后利用肝癌抗原HAb18GE进行筛选 ,并对抗体库的扩增和筛选条件进行优化。结果 pComb3展示抗体库在 37℃进行扩增挽救时存在明显的目的片段重组丢失现象。pComb3X展示抗体库在不同的扩增条件下均未发现明显的重组丢失现象。经过 4轮筛选后 ,噬菌体展示抗体ELISA显示 ,鉴定克隆与原核表达GST及无关蛋白存在明显交叉反应 ,而改用诱导表达细菌裂解上清进行ELISA鉴定可以抑制交叉反应的发生。结论 通过建立杂合Fab抗体库 ,并对扩增和筛选条件进行优化 。
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关键词
抗体库
人源性
肝肿瘤
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Keywords
antibody library
human
liver neoplasms
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分类号
Q392.11
[生物学—遗传学]
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