视网膜神经节细胞与Müller细胞共培养的方法研究 被引量：3

1

作者 苟琳 张作明 +3 位作者 许汉鹏 郭群 李莉 郭守一 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2003年第3期264-266,共3页

目的　建立一种简单的体外培养视网膜神经节细胞的方法。方法　采用Thy1 1单克隆抗体免疫吸附得到纯化的视网膜神经节细胞 ,将其接种于纯化培养的视网膜M櫣ｌｌｅｒ细胞上 ,在无血清培养液中共同培养。结果　视网膜神经节细胞在接种后 1... 目的　建立一种简单的体外培养视网膜神经节细胞的方法。方法　采用Thy1 1单克隆抗体免疫吸附得到纯化的视网膜神经节细胞 ,将其接种于纯化培养的视网膜M櫣ｌｌｅｒ细胞上 ,在无血清培养液中共同培养。结果　视网膜神经节细胞在接种后 1d即可生长出短小的突起 ,至第 5d突起不断增长并可长出二级分支。结论　M櫣ｌｌｅｒ细胞在无血清培养液中 ,对体外培养的神经节细胞具有很好的支持营养作用。 展开更多

关键词 视网膜神经节细胞 细胞培养 MÜLLER细胞 Thy1.1

在线阅读 下载PDF 职称材料

胶质细胞源性的神经营养因子促进面神经损伤后再生的实验研究 被引量：5

2

作者 王琛 周树夏 +1 位作者 李媛 邱建勇 《实用口腔医学杂志》 CSCD 北大核心 2000年第5期351-353,共3页

目的 :研究胶质细胞源性的神经营养因子 (GDNF)对面神经损伤后的促再生作用。方法 :家兔面神经双侧造成 5 mm神经缺损 ,以硅胶管套接后将硅胶管与神经外膜缝合固定。一侧硅胶管内注入纯化 GDNF,另一侧注入等量生理盐水对照。于不同时间... 目的 :研究胶质细胞源性的神经营养因子 (GDNF)对面神经损伤后的促再生作用。方法 :家兔面神经双侧造成 5 mm神经缺损 ,以硅胶管套接后将硅胶管与神经外膜缝合固定。一侧硅胶管内注入纯化 GDNF,另一侧注入等量生理盐水对照。于不同时间段取材 ,切片行甲苯胺兰、HE、Bielschowsky银染改良法染色观察面神经元细胞体及再生神经结构。图像分析测量再生神经轴突直径及单位面积轴突数量、再生轴突恢复率。6 0 d及 90 d作透射电镜观察轴突及髓鞘超微结构并测定神经传导速度 (NCV)。结果 :与对照组相比 ,GDNF可以 :1保护面神经元细胞 ,减少面神经元的死亡数目 ;2提高轴突再生的数量及质量 ,并可早期恢复神经传导速度。结论 :面神经损伤后应用外源性 展开更多

关键词 神经营养因子 面神经损伤 面神经再生 实验研究

在线阅读 下载PDF 职称材料

恒温摇动法纯化培养大鼠视网膜Müller细胞的技术研究 被引量：20

3

作者 苟琳 张作明 +3 位作者 许汉鹏 吴玉梅 晏楠 郭守一 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2002年第5期411-413,共3页

目的　建立一种新的纯化Ｍ櫣ｌｌｅｒ细胞的技术方法。方法　将原代培养后的混合性视网膜细胞固定在一个摇床平台上 ,保持在 3 7℃。摇床转速调整到使培养液不生成泡沫的速度 ,过夜 (1 8～ 24ｈ)摇动后 ,将培养液上清弃去 ,通过免疫细... 目的　建立一种新的纯化Ｍ櫣ｌｌｅｒ细胞的技术方法。方法　将原代培养后的混合性视网膜细胞固定在一个摇床平台上 ,保持在 3 7℃。摇床转速调整到使培养液不生成泡沫的速度 ,过夜 (1 8～ 24ｈ)摇动后 ,将培养液上清弃去 ,通过免疫细胞化学的方法鉴定原代和摇动法得到的Ｍ櫣ｌｌｅｒ细胞的纯度。结果　原代培养的视网膜细胞有大量神经元和Ｍ櫣ｌｌｅｒ细胞混杂 ,摇动过程使得附着于Ｍ櫣ｌｌｅｒ细胞上的神经元细胞脱落 ,Ｍ櫣ｌｌｅｒ细胞的纯度通过ＧＦＡＰ确定可达 95%以上。结论　恒温摇床摇动的方法 。 展开更多

关键词 视网膜 细胞培养 MUELLER细胞 免疫细胞化学 恒温摇动法

在线阅读 下载PDF 职称材料

SD大鼠视神经不同程度损伤的闪光视觉诱发电位动态监测 被引量：9

4

作者 刘婉莹 张卯年 +2 位作者 陈兵 鞠躬 卢华 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期439-440,共2页

目的　探索大鼠视神经不同程度损伤后闪光视觉诱发电位 (F VEP)的变化特征 ,为进一步研究间接性视神经损伤的修复提供实验基础和依据。方法　利用压力恒定的反向镊分别夹持大鼠视神经 6、30、6 0s,建立轻、中、重度视神经不完全损伤模... 目的　探索大鼠视神经不同程度损伤后闪光视觉诱发电位 (F VEP)的变化特征 ,为进一步研究间接性视神经损伤的修复提供实验基础和依据。方法　利用压力恒定的反向镊分别夹持大鼠视神经 6、30、6 0s,建立轻、中、重度视神经不完全损伤模型 ,记录正常及损伤后F VEP潜伏期和振幅的变化。结果　正常大鼠F VEP波形稳定 ,主波潜伏期 (L5b)为 5 3 6 7± 3 12ms,振幅 (A5 )为 17 83±5 91μV。视神经损伤后的大鼠F VEP与正常大鼠比较差异有统计学意义 (P <0 0 1)。损伤程度不同 ,F VEP的改变不同 ,损伤程度越重 ,伤后时间越长 ,潜伏期延迟越显著 ,波幅降低程度越大 ,F VEP的熄灭越早。结论　大鼠视神经损伤后F VEP的变化规律与神经的损伤程度一致 ,F 展开更多

关键词 大鼠 Sprague-Dawley 视神经损伤 诱发电位 视觉

在线阅读 下载PDF 职称材料

基质金属蛋白酶-9在哮喘豚鼠气道重构中的作用及抗神经生长因子抗体干预的影响 被引量：7

5

作者 王光辉 金发光 +1 位作者 楚东岭 段丽 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期224-226,共3页

目的探讨哮喘豚鼠模型中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)与气道重构的关系及抗神经生长因子抗体干预对气道重构的影响。方法重复雾化吸入卵蛋白4周建立豚鼠哮喘气道重构模型。实验分为对照组、哮喘组、抗神经生长因子(NGF)抗体干预组(每组8只豚... 目的探讨哮喘豚鼠模型中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)与气道重构的关系及抗神经生长因子抗体干预对气道重构的影响。方法重复雾化吸入卵蛋白4周建立豚鼠哮喘气道重构模型。实验分为对照组、哮喘组、抗神经生长因子(NGF)抗体干预组(每组8只豚鼠)。免疫组化方法结合显微图像分析检测MMP-9表达。半定量PCR检测MMP-9mRNA水平。结果哮喘组动物出现管壁增厚、平滑肌增生、黏液分泌增加等气道重构的特征性改变,MMP-9mRNA水平和蛋白表达均明显增高。NGF抗体组与哮喘组比较,炎症反应轻微,平滑肌增生、黏液分泌不明显,MMP-9mRNA水平和蛋白表达均降低,与对照组差异无显著性。结论少量、多次变应原吸入可导致气道重构,MMP-9在气道重构中发挥作用,NGF抗体干预可延缓气道重构的发生。 展开更多

关键词 哮喘 气道重构 神经生长因子 明胶酶 B

在线阅读 下载PDF 职称材料

前庭神经核内谷氨酸受体在帕金森病的变化 被引量：3

6

作者 孙安 陈文弦 +4 位作者 李广琪 陈良为 叶维莉 江逊 赵大庆 《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期255-257,T001,共4页

目的 探讨前庭神经核内离子型谷氨酸受体在帕金森病时的变化。方法 采用免疫组织化学染色技术检测小鼠前庭神经核内谷氨酸受体的表达。结果 在帕金森病时,前庭神经核内N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体增加,非NMDA受体减少。结论 非NMDA... 目的 探讨前庭神经核内离子型谷氨酸受体在帕金森病时的变化。方法 采用免疫组织化学染色技术检测小鼠前庭神经核内谷氨酸受体的表达。结果 在帕金森病时,前庭神经核内N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体增加,非NMDA受体减少。结论 非NMDA受体在帕金森病中起神经毒性作用,引起相应病理改变,推测其变化与临床运动障碍、平衡失调有一定关系。 展开更多

关键词 帕金森病 前庭神经核 谷氨酸受体 免疫组织化学

在线阅读 下载PDF 职称材料

两种不同基质的联合应用对体外分散培养神经元的促贴壁作用 被引量：2

7

作者 王春婷 杨浩 +3 位作者 许汉鹏 孟晋宏 游思维 鞠躬 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期584-585,共2页

关键词 神经细胞培养 多聚赖氨酸 胶原 细胞贴壁

在线阅读 下载PDF 职称材料

异丙酚和硫喷妥钠麻醉对大鼠脑薄片视上核神经元自发电活动的影响 被引量：4

8

作者 徐礼鲜 付荣国 +1 位作者 贾铀生 刘国鹏 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 2000年第2期83-85,共3页

目的 :研究静脉麻醉药硫喷妥钠 (SP)和异丙酚 (Pro)对新生鼠下丘脑视上核 (SO)神经元自发电活动的影响 ,为进一步探讨全身麻醉作用机理打下基础。方法 :应用膜片钳技术 ,观察SP和Pro对SO神经元自发放电活动的变化。结果 :实验发现SP 2 5... 目的 :研究静脉麻醉药硫喷妥钠 (SP)和异丙酚 (Pro)对新生鼠下丘脑视上核 (SO)神经元自发电活动的影响 ,为进一步探讨全身麻醉作用机理打下基础。方法 :应用膜片钳技术 ,观察SP和Pro对SO神经元自发放电活动的变化。结果 :实验发现SP 2 5 μmol/L或Pro 2 0 μmol/L均明显抑制SO神经元的自发放电频率 ,用正常人工脑脊液(ACSF)冲洗 5分钟后其放电频率可恢复至给药前水平。结论 :SP或Pro对下丘脑SO神经元自发电活动均有可逆性的抑制效应 。 展开更多

关键词 硫喷妥钠 异丙酚 视上核 电生理 神经元

在线阅读 下载PDF 职称材料

鼠颞下颌关节中神经肽Y阳性纤维的分布及创伤后的密度变化 被引量：1

9

作者 刘向辉 斯方杰 +2 位作者 徐正林 张玲 饶志仁 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期323-325,329,共4页

目的 :观察神经肽Y阳性纤维在鼠颞下颌关节中的整体分布及创伤后的密度变化。方法 :将 6组鼠分别于正常时及撞击后第 1、3、7、14及 2 8天处死 ,完整取出颞下颌关节脱钙脱水 ,恒冷切片 ,ABC法漂染后镜检及半定量分析。结果 :神经肽Y阳... 目的 :观察神经肽Y阳性纤维在鼠颞下颌关节中的整体分布及创伤后的密度变化。方法 :将 6组鼠分别于正常时及撞击后第 1、3、7、14及 2 8天处死 ,完整取出颞下颌关节脱钙脱水 ,恒冷切片 ,ABC法漂染后镜检及半定量分析。结果 :神经肽Y阳性纤维广泛分布于颞下颌关节的软组织中 ,主要位于血管尤其是动脉周围 ;创伤前及创伤后 6组的分布面积为 :16 0 4± 2 7 5 ,95 8± 16 4,88 6± 14 5 ,114 3± 17 0 ,135 0± 2 0 7,15 8 6± 19 5 (单位 :mm2 )。结论 :神经肽Y阳性纤维广泛分布于颞下颌关节软组织的血管周围 ;在创伤后密度呈动态变化 。 展开更多

关键词 纤维密度 动物实验 颞下颌关节 神经肽Y 阳性纤维 创伤

在线阅读 下载PDF 职称材料

正畸牙齿移动刺激信息传导通路的动物实验研究

10

作者 冯雪 王凌 +1 位作者 林珠 段银钟 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期153-155,共3页

目的 :研究丘脑腹后内侧核 (VPM )是否接受来自三叉神经脊束核尾侧亚核 (Vc)传入的牙齿移动性刺激信息 ,从而探讨牙齿移动引起的伤害性刺激信息在中枢神经系统内的感觉传导通路。方法 :用微量注射器将 2 %荧光金 (FG)注入大鼠VPM 4～ 6d... 目的 :研究丘脑腹后内侧核 (VPM )是否接受来自三叉神经脊束核尾侧亚核 (Vc)传入的牙齿移动性刺激信息 ,从而探讨牙齿移动引起的伤害性刺激信息在中枢神经系统内的感觉传导通路。方法 :用微量注射器将 2 %荧光金 (FG)注入大鼠VPM 4～ 6d后 ,进行对侧的实验性牙齿移动 2h ,用FOS蛋白免疫组化方法观察Vc内神经元对c fos的表达以及是否存在FG与FOS双重阳性的神经元。结果 :FOS阳性神经元密集分布于同侧Vc浅层 ,呈带状 ,背外侧居多 ;FG逆行标记的神经元主要见于对侧三叉神经感觉核簇的脊束核及感觉主核 ,Vc的全长均有FG标记细胞 ,主要分布于Ⅰ层、Ⅰ Ⅱ层交界处。在Vc各层内均有FG与FOS的双标记细胞 ,约占Vc内FG逆行标记细胞总数的 5%。结论 :牙齿移动性刺激信息在Vc内中继 ,Vc向VPM有投射神经元 。 展开更多

关键词 丘脑腹后内侧核 VC 牙齿移动 FOS蛋白 正畸

在线阅读 下载PDF 职称材料

波形纤维蛋白转基因白内障小鼠晶状体超微结构的研究

11

作者 周健 惠延年 +2 位作者 李燕 林英华 焦西英 《电子显微学报》 CAS CSCD 2000年第2期131-136,共6页

目的 :观察波形纤维蛋白转基因小鼠 (下称 VTg M)白内障晶状体的超微结构变化。方法 :用微注射法将鸡的波形纤维蛋白基因导入小鼠的受精卵中 ,获得 2 0只白内障小鼠。应用超薄切片透射电镜技术 ,观察 VTg M晶状体的超微结构改变。结果 :... 目的 :观察波形纤维蛋白转基因小鼠 (下称 VTg M)白内障晶状体的超微结构变化。方法 :用微注射法将鸡的波形纤维蛋白基因导入小鼠的受精卵中 ,获得 2 0只白内障小鼠。应用超薄切片透射电镜技术 ,观察 VTg M晶状体的超微结构改变。结果 :VTg M晶状体上皮细胞呈多层排列 ,细胞内有粗大的线粒体 ,晶状体皮质内有核细胞成团堆集 ,胞浆内有大量细胞器 ,特别是线粒体、溶酶体。晶体状纤维细胞排列紊乱 ,核伸长不完全。纤维的规则板层结构消失 ,出现大量的髓鞘样结构。结论 :外源性波形纤维蛋白的表达影响了晶状体上皮细胞的分化 ,使晶状体纤维细胞脱核 ,脱细胞器受抑制 ,晶状体纤维排列紊乱 。 展开更多

关键词 白内障 波形纤维蛋白 转基因小鼠模型 晶状体

在线阅读 下载PDF 职称材料

去甲肾上腺素对慢性压迫背根节神经元的兴奋作用

12

作者 王玉英 万业宏 +1 位作者 邢俊玲 胡三觉 《中国疼痛医学杂志》 CAS CSCD 2004年第6期345-347,351,共4页

目的观察去甲肾上腺素对大鼠正常及慢性压迫背根节中具有后去极化的神经元的兴奋性作用。方法急性离散大鼠背根节(dorsalrootganglion,DRG)神经元后,以全细胞膜片钳技术记录了正常DRG神经元及慢性压迫DRG神经元的膜电位及放电数目在施... 目的观察去甲肾上腺素对大鼠正常及慢性压迫背根节中具有后去极化的神经元的兴奋性作用。方法急性离散大鼠背根节(dorsalrootganglion,DRG)神经元后,以全细胞膜片钳技术记录了正常DRG神经元及慢性压迫DRG神经元的膜电位及放电数目在施加去甲肾上腺素(NE)前后的改变。结果在NE的作用下,受损DRG内具有后去极化(afterdepolarizepotential,ADP)的30个神经元中有13.3%出现自发放电,20%出现兴奋性增强;而检测的正常DRG内具有ADP的20个神经元在NE的作用下未出现自发放电,也无兴奋性增强。结论受损DRG的ADP神经元对NE的反应显著增强,ADP可能参与交感神经维持痛的形成。 展开更多

关键词 去甲肾上腺素 慢性压迫背根节 神经元 兴奋作用

在线阅读 下载PDF 职称材料

退行性变黄韧带细胞的体外培养及初步鉴定 被引量：4

13

作者 王哲 许汉鹏 +4 位作者 王全平 张俊华 李明全 雷伟 罗卓荆 《中国脊柱脊髓杂志》 CAS CSCD 2004年第4期237-240,T001,共5页

目的:探讨黄韧带退变的发生机理。方法:采用组织块培养法,体外培养正常黄韧带和退变性黄韧带细胞,并进行细胞化学、免疫细胞化学等方面研究。结果:黄韧带细胞可以在体外增殖和传代,退变性黄韧带细胞呈现出某些成骨细胞表型特征,而正常... 目的:探讨黄韧带退变的发生机理。方法:采用组织块培养法,体外培养正常黄韧带和退变性黄韧带细胞,并进行细胞化学、免疫细胞化学等方面研究。结果:黄韧带细胞可以在体外增殖和传代,退变性黄韧带细胞呈现出某些成骨细胞表型特征,而正常黄韧带细胞主要为成纤维细胞表型。结论:退变黄韧带中存在大量具备某些成骨细胞表型特征的细胞,其中包括软骨细胞,它们可能被骨形成蛋白等骨生长因子所调控。 展开更多

关键词 黄韧带退行性变 细胞培养 体外培养 细胞鉴定 细胞分离

在线阅读 下载PDF 职称材料

急性氯气染毒对家兔肺血流动力学及呼吸功能的影响 被引量：1

14

作者 张洪伟 曾泽戎 +2 位作者 宋俊峰 贾斌 温光楠 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期510-513,共4页

目的 :观察高浓度氯气染毒时肺血流动力学和呼吸功能变化并探讨其在肺损伤中的作用。方法 :35只家兔 ,随机分为 :离体肺组 :10只离体兔肺在稳定后吸入氯气 (5 0× 10 -4,2 0min)。在回流压力恒定的条件下 ,测定灌流压力、气道压力... 目的 :观察高浓度氯气染毒时肺血流动力学和呼吸功能变化并探讨其在肺损伤中的作用。方法 :35只家兔 ,随机分为 :离体肺组 :10只离体兔肺在稳定后吸入氯气 (5 0× 10 -4,2 0min)。在回流压力恒定的条件下 ,测定灌流压力、气道压力、潮气量、肺重量等变化。另 9只离体兔肺设为正常对照 ;整体动物组 :8只动物自气管插管吸入氯气 (5 0× 10 -4,2 0min) ;另 8只为对照组。检测肺动脉压力、呼吸频率、气道压力、潮气量等的变化 ;实验结束时均测定肺湿 /干重比值。结果 :离体肺组 :控制回流压力与灌流液流速 (133mL/min)不变 ,染毒后灌流压力即有缓慢而持续的升高 ;染毒开始 10min离体肺肺重量有一过性的降低 ,后开始持续增高 ,染毒后 6 0min肺重量显著大于对照组、出现肺水肿 ,继而灌流压力也显著升高 ,潮气量减少 ,灌流液血球压积值显著增高 ;整体动物染毒后肺动脉压力也有缓慢的升高 ,但没有剧烈的改变 ;呼吸频率加快 ,气道内压力波动幅度加大 ,潮气量减少。染毒后 6 0min出现明显的肺水肿。结论 :高浓度氯气染毒可导致肺动脉 /灌流压力升高及肺水肿。但肺动脉 /灌流压力的改变并不是导致肺水肿的主要原因。氯气染毒后引起动物的呼吸频率加快、气道内压增大 ,潮气量减少。 展开更多

关键词 急性氯气染毒 家兔 肺血流动力学 呼吸功能 影响

在线阅读 下载PDF 职称材料

NOS在大鼠Vcx内的分布及其与牙齿移动诱发FOS表达的关系

15

作者 冯雪 陈富林 +2 位作者 王凌 林珠 段银钟 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期127-128,131,I006,共3页

利用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶（ＮＡＤＰＨ－ｄ）组织化学和核磷蛋白（ＦＯＳ）免疫组织化学技术观察了一氧化氮合酶（ＮＯＳ）在对牙齿加力刺激时三叉神经感觉核簇（Ｖｃｘ）内的分布情况；ＮＯＳ阳性结构与牙齿移动诱发的... 利用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶（ＮＡＤＰＨ－ｄ）组织化学和核磷蛋白（ＦＯＳ）免疫组织化学技术观察了一氧化氮合酶（ＮＯＳ）在对牙齿加力刺激时三叉神经感觉核簇（Ｖｃｘ）内的分布情况；ＮＯＳ阳性结构与牙齿移动诱发的ＦＯＳ蛋白表达之间的关系。结果表明，ＮＯＳ阳性结构和ＦＯＳ阳性神经元（ＦＬＮ）在Ｖｃｘ内的分布有一定的特点，两者之间又有重叠。表明ＮＯ参与了牙齿移动过程的中枢调控，进一步阐明了牙齿移动性刺激在中枢内的调控机制。 展开更多

关键词 一氧化氮 Vcx 一氧化氮合酶 FOS基因 牙移动

在线阅读 下载PDF 职称材料