浅谈生物化学绪论课教学 被引量：13

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作者 张璟 尹战海 +2 位作者 李霞 张健 刘新平 《西北医学教育》 2008年第3期608-609,共2页

生物化学是一门非常重要的医学基础课。由于生物化学课的内容抽象、繁杂、枯燥，要掌握它需要有较好的有机化学基础知识，学生对生物化学课的学习普遍具有畏难情绪。讲好生物化学的绪论部分可以帮助学生树立学习生物化学的信心和激发他... 生物化学是一门非常重要的医学基础课。由于生物化学课的内容抽象、繁杂、枯燥，要掌握它需要有较好的有机化学基础知识，学生对生物化学课的学习普遍具有畏难情绪。讲好生物化学的绪论部分可以帮助学生树立学习生物化学的信心和激发他们的学习兴趣。结合生物化学绪论课的教学经验，笔者认为本节课可以通过对生物化学“是什么”、“学什么”、“为什么学”和“怎么学”这几个问题地讲解使学生明确学习目的，消除畏难情绪，培养他们学习生物化学的兴趣。 展开更多

关键词 绪论 生物化学 教学

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谈“情感态度与价值观”在生物化学教学中的渗透 被引量：3

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作者 张璟 尹战海 《西北医学教育》 2010年第5期1006-1008,共3页

"情感态度与价值观"是新课程标准中的一个重要方面。本文主要探讨了在生物化学中实现"情感态度与价值观"教育的几种形式,以及如何重视发展学生健康的个性,使其逐步形成积极的态度和健康的人生观、世界观。

关键词 情感态度 价值观 生物化学 教学

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新型香豆素类荧光化合物的合成及荧光性质 被引量：7

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作者 郭媛 宋丹梅 +1 位作者 魏永锋 史真 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期681-685,共5页

合成了2种香豆素类荧光化合物6,8-二氯-7-羟基香豆素-3-羧酸(DC lC)和6-氯-7-羟基香豆素-3-羧酸(MC lC)。通过红外光谱、核磁共振、质谱等测试技术对产物的结构进行了表征。研究了2种化合物的紫外光谱和荧光性质及不同极性溶剂、pH值、... 合成了2种香豆素类荧光化合物6,8-二氯-7-羟基香豆素-3-羧酸(DC lC)和6-氯-7-羟基香豆素-3-羧酸(MC lC)。通过红外光谱、核磁共振、质谱等测试技术对产物的结构进行了表征。研究了2种化合物的紫外光谱和荧光性质及不同极性溶剂、pH值、表面活性剂等的影响。结果表明,pH值对其荧光强度有较大影响,当pH=10时,DC lC和MC lC的荧光强度明显增强。 展开更多

关键词 二氯羟基香豆素羧酸 氯羟基香豆素羧酸 合成 荧光性能

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细胞自噬与人卵巢癌细胞对顺铂耐药的关系 被引量：6

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作者 朱星枚 吴琳 +3 位作者 张媛 姚杨 成碧萍 张丹 《中国医药导报》 CAS 2016年第25期12-16,共5页

目的探讨细胞自噬与人卵巢癌细胞对顺铂耐药的关系。方法以不同浓度的顺铂(0、1、2、4、8、16μg/mL)分别作用人卵巢癌细胞A2780及其顺铂耐药株A2780/DDP 48h,采用MTT法检测卵巢癌细胞的增殖率,透射电镜检测顺铂诱导细胞自噬体的形成,We... 目的探讨细胞自噬与人卵巢癌细胞对顺铂耐药的关系。方法以不同浓度的顺铂(0、1、2、4、8、16μg/mL)分别作用人卵巢癌细胞A2780及其顺铂耐药株A2780/DDP 48h,采用MTT法检测卵巢癌细胞的增殖率,透射电镜检测顺铂诱导细胞自噬体的形成,Western blot法测定自噬和凋亡相关蛋白。结果与A2780对照比较,A2780/DDP增殖率明显升高(P<0.01);顺铂可以诱导A2780及A2780/DDP中自噬体的形成,且A2780和A2780/DDP中LC3-Ⅱ水平均升高,这种作用可以被自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)阻断;顺铂可以诱导A2780中凋亡相关蛋白Cleaved-PARP水平升高,但作用A2780/DDP时影响不大,当3-MA与顺铂同时作用人卵巢癌细胞时,A2780/DDP中的Cleaved-PARP表达水平显著升高(P<0.01)。结论卵巢癌细胞的耐药可能与顺铂诱导卵巢癌细胞自噬有关,自噬抑制剂3-MA可以抑制顺铂诱导的细胞自噬,同时促进顺铂诱导人卵巢癌细胞凋亡,且增加顺铂耐药株对顺铂的敏感性。 展开更多

关键词 顺铂 耐药 卵巢癌 增殖 细胞自噬 凋亡

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雄激素受体突变体T877A的促细胞增殖效应 被引量：1

5

作者 武国军 李晓武 +4 位作者 王禾 于磊 王智 袁建林 张波 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期223-225,232,共4页

目的　评价雄激素受体突变体 (mtAR)对细胞生长的促进作用。方法　我们利用三种重组腺病毒即野生型雄激素受体 (Ad wtAR)、一个被广泛研究的前列腺癌 (CaP)相关的mtAR(Ad mtAR ,T877A)、以及作为对照的腺病毒载体 ,评价并比较了野生型AR... 目的　评价雄激素受体突变体 (mtAR)对细胞生长的促进作用。方法　我们利用三种重组腺病毒即野生型雄激素受体 (Ad wtAR)、一个被广泛研究的前列腺癌 (CaP)相关的mtAR(Ad mtAR ,T877A)、以及作为对照的腺病毒载体 ,评价并比较了野生型AR及mtAR的促细胞生长效应。结果　相对于被野生型或者对照的腺病毒转染的LNCaP、PC3细胞 ,转染mtAR的LNCaP、PC3细胞无论有无合成的雄激素 (R1881)存在的情况下均显示出更强的细胞增殖作用。并且用重组T877A腺病毒转染的LNCaP和PC3细胞显示了对R1881更强的反应性。结论　这些发现提出了崭新的关于mtAR在CaP细胞中作用的细胞生物学方面的见解 ,并且表明mtAR(T877A)可能为前列腺癌病程的进展提供了选择性的细胞生长的效应。 展开更多

关键词 雄激素受体 雄激素受体突变体 细胞增殖

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K562细胞cDNA表达文库的构建和鉴定

6

作者 陈刚 张王刚 +3 位作者 付杰 李福洋 刘新平 药立波 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期109-111,共3页

目的　构建K5 6 2细胞表达型cDNA文库。方法　提取K5 6 2细胞总RNA ,分离mRNA ,反转录合成双链cDNA ,消平cDNA末端 ,连接EcoRⅠ适配子 ,磷酸化EcoRⅠ适配子 5’端 ,Sephacryl S4 0 0柱除去小于 4 0 0bpcDNA片段 ,与去磷酸化的λgt11噬... 目的　构建K5 6 2细胞表达型cDNA文库。方法　提取K5 6 2细胞总RNA ,分离mRNA ,反转录合成双链cDNA ,消平cDNA末端 ,连接EcoRⅠ适配子 ,磷酸化EcoRⅠ适配子 5’端 ,Sephacryl S4 0 0柱除去小于 4 0 0bpcDNA片段 ,与去磷酸化的λgt11噬菌体连接 ,体外包装后建成cDNA文库。取出 1μL倍比稀释感染E .coliY10 90 ,测定文库大小、重组率 ,并以PCR鉴定cDNA插入片段的大小。结果　构建成含 1.0 2× 10 6重组子的K5 6 2细胞cDNA文库 ,重组子平均插入外源片段长约 1.3kb。结论　所建文库合格 ,适合用于筛选目的cDNA克隆。 展开更多

关键词 K562细胞 CDNA文库 白血病 PCR CDNA 克隆 肿瘤 免疫治疗

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人颗粒酶B融合蛋白基因的诱导表达导致HeLa细胞凋亡

7

作者 王智 赵晶 +3 位作者 张莉 温伟红 王成济 杨安钢 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期329-332,共4页

目的　观察诱导表达的颗粒酶B融合蛋白对HeLa细胞形态和生长的作用。方法　用重组PCR法将活性型颗粒酶B基因序列的 5’端连接绿脓杆菌外毒素 (PE)的部分转位肽编码序列。所获融合蛋白基因克隆入pIND诱导表达载体后 ,与辅助质粒pVgRXR共... 目的　观察诱导表达的颗粒酶B融合蛋白对HeLa细胞形态和生长的作用。方法　用重组PCR法将活性型颗粒酶B基因序列的 5’端连接绿脓杆菌外毒素 (PE)的部分转位肽编码序列。所获融合蛋白基因克隆入pIND诱导表达载体后 ,与辅助质粒pVgRXR共转染HeLa细胞 ,经G4 18和zeocin筛选建系。间接免疫荧光检测蜕皮激素诱导后目的蛋白的表达 ,并通过电镜、TUNEL染色、细胞计数等方法观察细胞的形态和生长速度的变化。结果　建立了可诱导表达人颗粒酶B融合蛋白基因的HeLa细胞系。蜕皮激素诱导后检测到目的蛋白的表达 ,同时观察到细胞出现多核巨细胞的异常形态 ,细胞生长受到抑制。电镜和TUNEL分析表明 ,颗粒酶B融合蛋白基因的诱导表达使部分细胞呈现凋亡的典型特征。 展开更多

关键词 颗粒酶B 融合蛋白 HELA细胞 诱导表达 凋亡

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抗人精浆蛋白单链抗体基因在HeLa细胞中的表达和活性鉴定

8

作者 武国军 王禾 +5 位作者 王栋 于磊 王智 袁建林 刘贺亮 药立波 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期420-422,共3页

目的　在HeLa细胞中表达抗人γ 精浆蛋白 (γ Sm)单链抗体 (scFv)基因 ,并进行亲和活性测定。方法　在已经构建抗人γ SmscFv基因基础上 ,将基因克隆入真核分泌表达载体 pSecTag2 B中 ,并转染HeLa细胞进行表达。表达产物纯化后 ,用流... 目的　在HeLa细胞中表达抗人γ 精浆蛋白 (γ Sm)单链抗体 (scFv)基因 ,并进行亲和活性测定。方法　在已经构建抗人γ SmscFv基因基础上 ,将基因克隆入真核分泌表达载体 pSecTag2 B中 ,并转染HeLa细胞进行表达。表达产物纯化后 ,用流式细胞仪进行亲和活性测定。结果　表达产物经SDS PAGE和Western印迹实验证实为约30ku的特异蛋白条带 ,纯化后经流式细胞仪检测可以特异性地结合PC 3细胞。结论　获得了可与PC 3细胞特异结合的抗人γ SmscFv 。 展开更多

关键词 抗人精浆蛋白 单链抗体 基因表达 HELA细胞 流式细胞仪

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TIMP-4在膀胱癌及癌旁正常膀胱组织中的表达 被引量：4

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作者 董维平 严奉奇 +3 位作者 李霞 许秀丽 袁建林 武国军 《中国医药导报》 CAS 2017年第12期77-80,共4页

目的探讨基质金属蛋白酶抑制剂-4(TIMP-4)在膀胱癌组织与癌旁组织中的表达及其临床意义。方法收集2015年6月~2016年9月西京医院泌尿外科152例膀胱尿路上皮癌患者手术标本的癌组织及其癌旁组织,利用免疫组织化学染色法分别对其进行染色,... 目的探讨基质金属蛋白酶抑制剂-4(TIMP-4)在膀胱癌组织与癌旁组织中的表达及其临床意义。方法收集2015年6月~2016年9月西京医院泌尿外科152例膀胱尿路上皮癌患者手术标本的癌组织及其癌旁组织,利用免疫组织化学染色法分别对其进行染色,并在显微镜下观察组织切片染色情况,运用半定量法分析膀胱癌组织及癌旁组织中TIMP-4蛋白的表达情况。结果 TIMP-4蛋白免疫反应物主要沉积于细胞质。膀胱癌组织与癌旁组织中TIMP-4蛋白染色阳性率分别为26.97%和84.21%,差异有统计学意义(P<0.05)。低级别膀胱乳头状尿路上皮癌与高级别膀胱乳头状尿路上皮癌组织中TIMP-4蛋白染色阳性率分别为38.71%和18.89%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TIMP-4蛋白在膀胱癌组织内的表达较癌旁组织表达低,且其表达量与膀胱癌组织学分级相关。 展开更多

关键词 基质金属蛋白酶抑制剂一4 膀胱尿路上皮癌 免疫组织化学染色

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NDRG2通过影响CD24调控肝癌细胞黏附能力的机制研究 被引量：1

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作者 侯恩浩 杨建栋 +6 位作者 马力天 李燕 张辉 张毅 杨凯 赵参军 郑瑾 《山西医科大学学报》 CAS 2013年第6期427-430,503,504,共6页

目的阐明NDRG2(N-Myc downstream-regulated gene 2)在肝癌细胞中对CD24的调控及其对肝癌细胞黏附能力的影响。方法 real-time PCR检测低转移性的肝癌细胞系Huh7、高转移性肝癌细胞系MHCC97H及人正常肝细胞系L-02中NDRG2和CD24的表达;... 目的阐明NDRG2(N-Myc downstream-regulated gene 2)在肝癌细胞中对CD24的调控及其对肝癌细胞黏附能力的影响。方法 real-time PCR检测低转移性的肝癌细胞系Huh7、高转移性肝癌细胞系MHCC97H及人正常肝细胞系L-02中NDRG2和CD24的表达;通过腺病毒上调MHCC97H细胞中NDRG2的表达,或利用siRNA下调Huh7细胞中NDRG2的表达,检测CD24基因变化。黏附实验检测改变NDRG2表达水平后对MHCC97H及Huh7细胞黏附能力的影响。结果 MH-CC97H细胞中NDRG2基因表达水平低于Huh7细胞,而CD24的表达水平高于Huh7细胞;在MHCC97H细胞中通过腺病毒载体上调NDRG2可以抑制CD24的表达并抑制其黏附能力,而在Huh7细胞中利用siRNA下调NDRG2的表达可以提高CD24的水平及细胞的黏附能力。结论 NDRG2通过影响CD24参与调控肝癌细胞的黏附能力。 展开更多

关键词 NDRG2 CD24 肝癌细胞 黏附

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稳定表达NDRG2的培养人晶状体上皮细胞株的建立及其对细胞增殖能力的影响

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作者 张丽霞 王雨生 +2 位作者 安洁 张健 张自峰 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2013年第5期415-418,422,共5页

目的分别建立人N-Myc下游受调节基因2(N-Myc downstream regulated gene2,NDRG2)表达上调、下调的培养人晶状体上皮细胞稳定转染细胞株,并观察NDRG2对晶状体上皮细胞增殖能力的影响。方法分别用质粒PLenti6-NDRG2、PLenti6-cherry、PLKO... 目的分别建立人N-Myc下游受调节基因2(N-Myc downstream regulated gene2,NDRG2)表达上调、下调的培养人晶状体上皮细胞稳定转染细胞株,并观察NDRG2对晶状体上皮细胞增殖能力的影响。方法分别用质粒PLenti6-NDRG2、PLenti6-cherry、PLKO-NDRG2shRNA、PLKO-scramble以及PAX2和PMD2G构建慢病毒载体,感染培养人晶状体上皮细胞系(SRA01/04),通过药物筛选获得NDRG2表达上调、下调的晶状体上皮细胞株。采用Real-time PCR、Western blot等方法检测NDRG2的表达。通过MTT、EdU等方法检测所获得细胞株的生长曲线及增殖能力。结果 NDRG2 mRNA在过表达对照组和过表达组细胞中的相对表达量分别为1.04±0.38、6.57±0.97,两组间差异有统计学意义(P<0.05);NDRG2mRNA在干涉对照组和干涉组细胞中的表达量分别为1.05±0.31、0.49±0.14,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。NDRG2过表达和干涉慢病毒载体感染后,SRA01/04细胞中NDRG2 mRNA的表达分别出现了明显的上调和下调。Western blot检测结果显示:与各自对照组相比,在NDRG2过表达组和干涉组细胞中,NDRG2蛋白的表达量分别出现了明显的升高和降低。MTT检测结果显示:与其对照组相比,NDRG2过表达组细胞生长曲线表现出降低趋势,干涉组细胞生长曲线表现出升高趋势,在培养后5d检测时差异有统计学意义(P<0.05)。EdU检测结果显示:过表达对照组Cherry-SRA01/04细胞、过表达组NDRG2-SRA01/04细胞EdU阳性表达率分别为(41.57±2.53)%、(33.53±3.03)%,两组间差异有统计学意义(P<0.05),提示NDRG2表达上调后DNA的合成受到抑制。干涉对照组Scramble-SRA01/04细胞和干涉组shNDRG2-SRA01/04细胞EdU阳性表达率分别为(27.70±1.05)%、(46.43±4.01)%,差异有统计学意义(P<0.05),提示NDRG2表达下调后DNA合成速度加快。结论通过病毒载体感染联合药物筛选,分别建立了NDRG2表达上调和下调的培养人晶状体上皮细胞稳定转染细胞株,且NDRG2基因对晶状体上皮细胞的增殖能力具有负向调节作用。 展开更多

关键词 NDRG2 晶状体上皮细胞 细胞增殖能力

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血管紧张素Ⅱ2型受体mRNA在大鼠心肌生长发育及老龄化中的表达变化

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作者 李志华 甄志军 李剑 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期446-447,454,共3页

目的　阐明血管紧张素Ⅱ 2型受体 (angiotensinⅡtype 2receptor,AT2 )在大鼠心肌生长发育及老龄化中的地位。方法　采用RT PCR方法观察不同生长阶段大鼠心肌组织AT2受体mRNA的表达及其增龄性变化 ,并经DNA测序验证PCR产物的正确性。结... 目的　阐明血管紧张素Ⅱ 2型受体 (angiotensinⅡtype 2receptor,AT2 )在大鼠心肌生长发育及老龄化中的地位。方法　采用RT PCR方法观察不同生长阶段大鼠心肌组织AT2受体mRNA的表达及其增龄性变化 ,并经DNA测序验证PCR产物的正确性。结果　幼年大鼠心肌组织AT2受体mRNA的表达水平较高 ,而在成年及老年大鼠心肌中的表达水平显著低于幼鼠心肌 (P <0 .0 1,n =4 )。结论　血管紧张素Ⅱ可能参与了心肌细胞的生长发育及老龄化过程 。 展开更多

关键词 心肌 生长发育 增龄 血管紧张素Ⅱ2型受体 逆转录聚合酶链反应

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