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抗鳗弧菌单克隆抗体的研制及鉴定 被引量:6
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作者 夏永娟 黄威权 +4 位作者 李元 黄宝成 李别虎 金晓航 张荣庆 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 2000年第1期81-81,共1页
关键词 鳗弧菌 单克隆抗体 杂交瘤 研制鉴定
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抗迟缓爱德华菌独特型单克隆抗体重链可变区基因的克隆及序列分析 被引量:2
2
作者 秦红 黄威权 +2 位作者 杨向民 温伟红 杨安钢 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期155-156,共2页
目的克隆并分析迟缓爱德华菌抗独特型单克隆抗体(mAb)VH基因。方法从分泌迟缓爱德华菌抗独特型mAb的杂交瘤细胞株(1E11)中提取总RNA,利用RT-PCR技术,扩增迟缓爱德华菌抗独特型抗体VH基因,并将其克隆到PBS-Tvector中进行序列分析。结果V... 目的克隆并分析迟缓爱德华菌抗独特型单克隆抗体(mAb)VH基因。方法从分泌迟缓爱德华菌抗独特型mAb的杂交瘤细胞株(1E11)中提取总RNA,利用RT-PCR技术,扩增迟缓爱德华菌抗独特型抗体VH基因,并将其克隆到PBS-Tvector中进行序列分析。结果VH基因的全长序列为339bp,编码113个氨基酸。通过NCBI/BLAST/N和IMGT数据库(Lefrance,2001)分析表明,VH基因符合小鼠IgGV区基因的特征含有4个框架区(FR),3个抗原互补决定区(CDR)及两个抗体特征性的半胱氨酸。结论成功地克隆了迟缓爱德华菌抗独特型mAbVH基因,为进一步构建迟缓爱德华菌抗独特型抗体基因工程疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 迟缓爱德华菌 抗独特型抗体 基因克隆 序列分析
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抗豚鼠气单胞菌单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及其特性鉴定 被引量:2
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作者 唐旭 于辉 +2 位作者 金晓航 吕葆真 黄威权 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期221-222,共2页
目的: 制备抗豚鼠气单胞菌(Aeromonas caviae)单克隆抗体(mAb)并进行鉴定.方法: 用灭活的豚鼠气单胞菌全菌免疫BALB/c小鼠, 采用杂交瘤技术制备mAb.用间接ELISA法对mAb的效价及其与其他细菌的交叉反应性进行鉴定;用免疫组化染色法... 目的: 制备抗豚鼠气单胞菌(Aeromonas caviae)单克隆抗体(mAb)并进行鉴定.方法: 用灭活的豚鼠气单胞菌全菌免疫BALB/c小鼠, 采用杂交瘤技术制备mAb.用间接ELISA法对mAb的效价及其与其他细菌的交叉反应性进行鉴定;用免疫组化染色法对mAb的免疫反应性进行鉴定.结果: 获得7株能稳定分泌抗豚鼠气单胞菌mAb的杂交瘤细胞株, 分别命名为0E10、 1A2、 1C4、 1F1、 1F10、 1H8和2A1.经测定杂交瘤细胞培养上清及腹水mAb的效价, 分别为10-1~10-2和10-3~10-5.mAb的Ig亚类鉴定表明, 1F1为IgG1, 1C4、 1F10和1H8为IgG2a, 2A1为IgG2b, 0E10和1A2为IgG3.交叉反应试验显示, 各株mAb均具有较好的特异性.免疫组化染色结果表明, mAb能和豚鼠气单胞菌特异性结合.结论: 成功地制备分泌抗豚鼠气单胞菌mAb的杂交瘤细胞株, 为该菌的快速检测及免疫学研究奠定了基础. 展开更多
关键词 豚鼠气单胞菌 单克隆抗体 杂交瘤
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迟缓爱德华菌抗独特型单链抗体基因的构建、表达及鉴定 被引量:2
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作者 秦红 金晓航 +1 位作者 黄威权 刘玉林 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期689-693,共5页
目的构建、表达及鉴定迟缓爱德华菌抗独特型单链抗体基因。方法采用RT-PCR方法从分泌迟缓爱德华菌独特型单克隆抗体的杂交瘤细胞株(1E11)中克隆出VH和VL可变区基因,再通过重叠延伸拼接PCR方法在VH和VL可变区基因之间引入连接肽(Gly4Ser... 目的构建、表达及鉴定迟缓爱德华菌抗独特型单链抗体基因。方法采用RT-PCR方法从分泌迟缓爱德华菌独特型单克隆抗体的杂交瘤细胞株(1E11)中克隆出VH和VL可变区基因,再通过重叠延伸拼接PCR方法在VH和VL可变区基因之间引入连接肽(Gly4Ser)3,体外构建单链抗体基因;将其克隆至表达载体pET-28a并在大肠杆菌中表达,表达产物纯化后,用SDS-PAGE、Western blot及ELASA进行鉴定。结果迟缓爱德华菌抗独特型单链抗体基因scFv在BL21(DE3)菌中获得表达,表达产物以不溶性包涵体形式存在,经过溶解包涵体、纯化和体外复性,获得了高纯度的单链抗体片段,重组蛋白的分子质量为27 ku。ELASA分析结果证实迟缓爱德华菌抗独特型单链抗体基因scFv与原代抗体一样,具有较高的抗原亲和力。结论成功构建了迟缓爱德华菌抗独特型单链抗体基因scFv,为进一步制备迟缓爱德华菌抗独特型抗体基因工程疫苗奠定基础。 展开更多
关键词 迟缓爱德华菌 抗独特型 单链抗体
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自发性高血压大鼠脑底动脉含神经肽Y、含降钙素基因相关肽、含P物质神经的变化 被引量:6
5
作者 毛秦雯 苏慧慈 《神经解剖学杂志》 CSCD 北大核心 1996年第3期251-255,共5页
用免疫组织化学(ABC)方法,观察了含NPY、含CGRP和含SP神经在自发性高血压大鼠脑底动脉的变化.结果表明,和对照用的京都Wistar大鼠相比,含NPY神经在脑底动脉环吻侧的密度略低,而尾侧略高;自发性高血压大鼠... 用免疫组织化学(ABC)方法,观察了含NPY、含CGRP和含SP神经在自发性高血压大鼠脑底动脉的变化.结果表明,和对照用的京都Wistar大鼠相比,含NPY神经在脑底动脉环吻侧的密度略低,而尾侧略高;自发性高血压大鼠大脑前动脉和大脑后动脉含NPY神经纵行纤维密度比对照大鼠低,而环行纤维密度比对照大鼠高.自发性高血压大鼠脑底动脉含SP和含CGRP神经的密度均比对照大鼠低.本文对上述变化的意义进行了讨论. 展开更多
关键词 高血压 神经肽Y 降钙素基因 相关肽 P物质
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抗鳗弧菌独特型单克隆抗体重链可变区基因的克隆及序列测定 被引量:1
6
作者 夏永娟 黄宝成 +2 位作者 温伟红 黄威权 杨安钢 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期176-177,共2页
关键词 鱼鳗弧菌感染 单克隆抗体 重链可变区 基因克隆 基因测序
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模拟失重对大鼠胃黏膜瘦素及其受体表达的影响 被引量:6
7
作者 王利芳 张金山 +2 位作者 孙岚 张远强 赵洁 《医学研究生学报》 CAS 2007年第8期799-801,897,共4页
目的:观察模拟失重条件下大鼠胃黏膜瘦素及其受体(OB-R)表达的变化,探讨失重对消化系统功能的影响。方法:将22只SD大鼠分为模拟失重组(n=12)和正常对照组(n=10),采用尾悬吊模拟失重28 d,用免疫组化ABC方法,观察大鼠胃黏膜瘦素及其受体... 目的:观察模拟失重条件下大鼠胃黏膜瘦素及其受体(OB-R)表达的变化,探讨失重对消化系统功能的影响。方法:将22只SD大鼠分为模拟失重组(n=12)和正常对照组(n=10),采用尾悬吊模拟失重28 d,用免疫组化ABC方法,观察大鼠胃黏膜瘦素及其受体的定位与表达,并比较两组动物胃黏膜瘦素及其受体免疫反应阳性细胞密度的差异。结果:瘦素及其受体免疫反应阳性细胞均分布于胃底腺的中下部区域、阳性物质主要定位于主细胞和壁细胞。与正常对照组相比,模拟失重组大鼠胃黏膜瘦素免疫反应阳性细胞密度显著增加(P<0.01);而瘦素受体免疫反应阳性细胞密度虽有增加趋势,但无显著差异(P>0.05)。结论:28 d的悬吊模拟失重可致大鼠胃黏膜瘦素及其受体表达增加,提示瘦素可能参与失重过程中消化道功能紊乱的调节。 展开更多
关键词 模拟失重 瘦素 受体 大鼠
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