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重组人Era蛋白的可溶性表达、纯化及生物学活性测定
被引量：
2
1
作者
吴元明
张晓楠
+3 位作者
邢小红
张俊杰
陈南春
陈苏民
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第6期560-563,共4页
目的:为了得到可溶性表达的人Era(hEra)蛋白,并检测其生物学活性。方法:把人era的cDNA基因从pUC19质粒亚克隆入表达质粒pMAL-p2x中。pMAL-hEra转化大肠杆菌TB1,用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达。结果:pMAL-hEra载体表达的融...
目的:为了得到可溶性表达的人Era(hEra)蛋白,并检测其生物学活性。方法:把人era的cDNA基因从pUC19质粒亚克隆入表达质粒pMAL-p2x中。pMAL-hEra转化大肠杆菌TB1,用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达。结果:pMAL-hEra载体表达的融合蛋白是以可溶状态存在,表达量占菌体总蛋白的23.9%。再利用直链淀粉亲和色谱柱对表达的融合蛋白进行纯化,接着用因子X将融合部分切除,但切除后的hEra蛋白不稳定,随着时间的延长而被降解。活性测定结果表明人Era蛋白能与GTP结合,并具有GTP酶的活性。结论:可溶性表达了人Era蛋白,并用体外实验证实人Era蛋白是一种G蛋白,这对人era基因的功能研究具有重要意义。
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关键词
人ERA
可溶性表达
生物活性测定
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职称材料
题名
重组人Era蛋白的可溶性表达、纯化及生物学活性测定
被引量：
2
1
作者
吴元明
张晓楠
邢小红
张俊杰
陈南春
陈苏民
机构
第四军医大学
DNA分型中心
第四军医大学基础部生物化学教研室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第6期560-563,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(30600268)
陕西省自然科学基金资助项目(2005C215)
文摘
目的:为了得到可溶性表达的人Era(hEra)蛋白,并检测其生物学活性。方法:把人era的cDNA基因从pUC19质粒亚克隆入表达质粒pMAL-p2x中。pMAL-hEra转化大肠杆菌TB1,用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达。结果:pMAL-hEra载体表达的融合蛋白是以可溶状态存在,表达量占菌体总蛋白的23.9%。再利用直链淀粉亲和色谱柱对表达的融合蛋白进行纯化,接着用因子X将融合部分切除,但切除后的hEra蛋白不稳定,随着时间的延长而被降解。活性测定结果表明人Era蛋白能与GTP结合,并具有GTP酶的活性。结论:可溶性表达了人Era蛋白,并用体外实验证实人Era蛋白是一种G蛋白,这对人era基因的功能研究具有重要意义。
关键词
人ERA
可溶性表达
生物活性测定
Keywords
human Era
soluble expression
bioactivity assay
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
重组人Era蛋白的可溶性表达、纯化及生物学活性测定
吴元明
张晓楠
邢小红
张俊杰
陈南春
陈苏民
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008
2
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