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人甘露糖结合凝集素(MBL)的纯化与兔抗人MBL抗血清的制备 被引量:4
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作者 金振晓 陈南春 +4 位作者 陈苏民 纪宗玲 胡军 胡巧侠 刘维永 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期570-579,共10页
关键词 甘露糖结合凝集素 抗血清 抗体 纯化 MBL蛋白
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人抗HER2单链抗体/精氨酸九聚体融合蛋白的基因构建、表达及鉴定 被引量:3
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作者 姜扩 陈锐 +5 位作者 王立锋 马琼 孟艳玲 杨安钢 马保安 裘秀春 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1201-1203,共3页
目的:构建人源性抗HER2单链抗体(scFv)/精氨酸九聚体(9R)融合蛋白基因,在大肠杆菌里表达纯化并检测该融合蛋白的活性。方法:采用PCR的方法,扩增融合基因scFv-9R,将获得的基因克隆入原核表达载体pQE30,在大肠杆菌M15中表达,表达产物经SDS... 目的:构建人源性抗HER2单链抗体(scFv)/精氨酸九聚体(9R)融合蛋白基因,在大肠杆菌里表达纯化并检测该融合蛋白的活性。方法:采用PCR的方法,扩增融合基因scFv-9R,将获得的基因克隆入原核表达载体pQE30,在大肠杆菌M15中表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blot鉴定,通过Ni-NTA螯合层析纯化,透析复性,超滤浓缩。ELISA分析scFv-9R融合蛋白抗原亲和活性,凝胶迁移实验检测scFv-9R融合蛋白与siRNA结合活性。结果:成功构建了人源性抗HER2 scFv-9R融合基因,经IPTG诱导后在M15中以包涵体形式表达。表达的目的蛋白scFv-9R能与HER2抗原结合,同时具有siRNA结合能力。结论:scFv-9R具有结合抗原与siRNA双重活性,为靶向递送siRNA的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 HER2 单链抗体 精氨酸九聚体 融合蛋白 靶向输送
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哮喘气道上皮杯状细胞合成GM-CSF及其调控机制的研究 被引量:1
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作者 宋立强 戚好文 +2 位作者 李妍 王吉村 张健 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第8期697-699,共3页
目的 观察哮喘小鼠气道上皮杯状细胞合成粒细胞 /巨噬细胞集落刺激因子 (GM CSF)的能力 ,探讨钙激活Cl-通道(CLCA)在合成中的调控作用。方法 取成年雄性BALB/c小鼠 ,采用卵蛋白致敏法制备哮喘模型。AB PAS特染法检测哮喘小鼠小支气管... 目的 观察哮喘小鼠气道上皮杯状细胞合成粒细胞 /巨噬细胞集落刺激因子 (GM CSF)的能力 ,探讨钙激活Cl-通道(CLCA)在合成中的调控作用。方法 取成年雄性BALB/c小鼠 ,采用卵蛋白致敏法制备哮喘模型。AB PAS特染法检测哮喘小鼠小支气管杯状细胞的分布 ;同一解剖部位采用免疫组化染色法检测GM CSF的表达。体外培养人气道黏液上皮细胞系NCI H2 92 ,采用含人hCLCA1的重组质粒pIRES2 EGFP/hCLCA1转染该细胞。筛选到稳定表达hCLCA1的细胞后 ,免疫组化法及RT PCR法检测该细胞GM CSF的表达、转录水平。设非转染细胞和CLCA阻断剂NFA干预的转染细胞为两个对照组。结果 哮喘小鼠气道杯状细胞GM CSF免疫组化染色为阳性。转染hCLCA1细胞的GM CSF表达与转录水平明显高于两个对照组 ;NFA能抑制转染细胞GM CSF的表达和转录。结论 哮喘气道上皮杯状细胞能合成GM CSF ,特定CLCA表达升高是促进GM CSF合成的机制之一。 展开更多
关键词 哮喘 气道 杯状细胞 钙激活Cl^-通道
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