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蛋白质组分析中双向电泳技术的改良和应用 被引量:8
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作者 王新 王伯良 +6 位作者 张宗友 兰梅 王吉村 药立波 陈南春 金建平 樊代明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期191-192,共2页
关键词 蛋白质组 蛋白质 双向聚丙烯酰胺 凝胶电泳 双向电泳技术
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p42/p44 MAPK信号转导通路在缺氧诱导的人视网膜色素上皮细胞VEGF表达中的作用 被引量:13
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作者 赵炜 王雨生 +2 位作者 张瑞 张鹏 惠延年 《眼科新进展》 CAS 2005年第2期109-112,共4页
目的 探讨p4 2 /p4 4丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activedproteinkinase ,MAPK)信号转导通路对缺氧诱导的人视网膜色素上皮(retinalpigmentepithelium ,RPE)细胞VEGF表达中的作用。方法 利用CoCl2 建立培养的人RPE细胞缺氧模型,用2 0... 目的 探讨p4 2 /p4 4丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activedproteinkinase ,MAPK)信号转导通路对缺氧诱导的人视网膜色素上皮(retinalpigmentepithelium ,RPE)细胞VEGF表达中的作用。方法 利用CoCl2 建立培养的人RPE细胞缺氧模型,用2 0μmol·L-1p4 2 /p4 4MAPK特异性阻断剂PD980 5 9处理RPE细胞,在缺氧条件下分别培养0min、5min、10min、30min、6 0min和12 0min ,用Westernblot方法检测磷酸化p4 2 /p4 4MAPK表达;培养人RPE细胞1h、3h、6h、12h和2 4h ,用酶联免疫吸附试验(en zymelinkedimmunosorbantassay ,ELISA)检测缺氧条件下RPE细胞上清中VEGF的含量。结果 缺氧刺激5min、10min、30min、6 0min和12 0min时,磷酸化p4 2 / p4 4MAPK水平逐渐增高;相应PD980 5 9处理组磷酸化p4 2 / p4 4MAPK水平降低,只可见磷酸化p4 2MAPK条带。在缺氧1h、3h、6h、12h和2 4h时,RPE细胞上清液中VEGF含量随时间逐渐增加(P <0 .0 1) ,PD980 5 9处理组VEGF含量较对照组显著减少(P <0 .0 1)。结论 p4 2 /p4 展开更多
关键词 视网膜色素上皮细胞 血管内皮生长因子 丝裂原活化蛋白激酶 缺氧
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人血清白蛋白对人牙龈上皮细胞在纯钛表面粘附作用的影响 被引量:1
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作者 刘宇 施生根 +2 位作者 宋应亮 刘新平 药立波 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期23-26,共4页
目的 :探讨人血清白蛋白 (humanserumalbumin ,HSA)对人牙龈上皮细胞 (humangingivalepith elialcells,HGE)在种植体材料表面粘附作用的影响。方法 :HGE原代培养 ,免疫荧光染色法标记细胞 ,观察人牙龈上皮细胞在人血清白蛋白预孵育及普... 目的 :探讨人血清白蛋白 (humanserumalbumin ,HSA)对人牙龈上皮细胞 (humangingivalepith elialcells,HGE)在种植体材料表面粘附作用的影响。方法 :HGE原代培养 ,免疫荧光染色法标记细胞 ,观察人牙龈上皮细胞在人血清白蛋白预孵育及普通纯钛试件表面的粘附。结果 :使用角朊细胞无血清培养基和分离酶成功地培养出HGE ;HGE经广谱细胞角蛋白单抗免疫组化染色为阳性 ;浓度为 5 0mg/ml的HSA预孵育于纯钛表面 ,4h时处理组粘附的HGE的数量显著少于对照组 ,12、2 4h处理组与对照组相比 ,粘附的细胞数量无显著性差异。结论 :HSA预孵育于纯钛表面 。 展开更多
关键词 人血清白蛋白 人牙龈上皮细胞 细胞粘附
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新基因mcpr1在小鼠牙胚发育中的时空表达和意义 被引量:1
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作者 轩东英 金岩 +4 位作者 金明 轩昆 邢向辉 郑梁 赵征 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期730-732,共3页
目的:探讨mcpr1在牙胚发生过程中的可能作用。方法:采用免疫组化LsAB法观察MCPR1在小鼠牙胚发育各个时期的表达分布及其变化情况。结果:MCPR1在小鼠牙胚各个时期均有表达,但各期分布模式有所不同,帽状期开始在成釉器上皮细胞表达,在釉... 目的:探讨mcpr1在牙胚发生过程中的可能作用。方法:采用免疫组化LsAB法观察MCPR1在小鼠牙胚发育各个时期的表达分布及其变化情况。结果:MCPR1在小鼠牙胚各个时期均有表达,但各期分布模式有所不同,帽状期开始在成釉器上皮细胞表达,在釉结节内亦呈现强阳性表达,在分化成熟的成牙本质细胞及成釉细胞内呈现出强阳性表达。结论:mcpr1可能通过上皮-间充质之间的信号传递及相关基因的相互调控,参与成釉器的成熟及牙胚的发育。 展开更多
关键词 mcpr1 牙胚发育 免疫组织化学
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葡萄糖、胰岛素和尿酸对猪近端肾小管上皮细胞株血红素氧合酶-1的影响
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作者 孙珲 李晓苗 +3 位作者 宋白利 刘新平 药立波 姬秋和 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期566-568,589,共4页
目的观察不同浓度葡萄糖、胰岛素和尿酸的培养条件下猪近端肾小管上皮细胞株(LLC-PK1)血红素氧合酶(HO-1)活性的改变,以探讨代谢相关因素在细胞水平对肾小管上皮细胞的影响。方法以LLC-PK1为研究对象,观察葡萄糖浓度为5、10、22、33 mmo... 目的观察不同浓度葡萄糖、胰岛素和尿酸的培养条件下猪近端肾小管上皮细胞株(LLC-PK1)血红素氧合酶(HO-1)活性的改变,以探讨代谢相关因素在细胞水平对肾小管上皮细胞的影响。方法以LLC-PK1为研究对象,观察葡萄糖浓度为5、10、22、33 mmol/L,胰岛素浓度为0、10-9、10-8、10-7mol/L,尿酸浓度为0、0.1、0.2、0.4 mmol/L培养48 h条件下,LLC-PK1细胞HO-1活性的改变。结果0.1 mmol/L0、.2 mmol/L和0.4 mmol/L尿酸刺激48 h后,LLC-PK1的HO-1活性增加,并呈剂量依赖关系,而上述浓度的葡萄糖和胰岛素刺激48 h对LLC-PK1的HO-1活性无影响。结论一定浓度的尿酸可使LLC-PK1的HO-1活性升高,提示尿酸在细胞水平对肾小管上皮细胞的氧化应激过程产生影响。 展开更多
关键词 尿酸 葡萄糖 胰岛素 血红素氧合酶 猪近端肾小管上皮细胞株
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稳定转染融合基因TFL舌癌细胞系的建立及辐射敏感性实验
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作者 刘大庆 司徒镇强 +2 位作者 周树夏 王成济 杨安钢 《实用医学杂志》 CAS 2003年第11期1198-1200,共3页
目的 :构建含FADD及TNFR1基因功能结构域的融合基因TFL ,稳定转染入人舌鳞状细胞癌细胞系(Tca 8113 )中 ,检测建系细胞T TFL的生物学性状 ,并初步观察T TFL细胞对辐射的敏感性。方法 :反转录PCR获得人FADD及TNFR1基因cDNA ,重组PCR法构... 目的 :构建含FADD及TNFR1基因功能结构域的融合基因TFL ,稳定转染入人舌鳞状细胞癌细胞系(Tca 8113 )中 ,检测建系细胞T TFL的生物学性状 ,并初步观察T TFL细胞对辐射的敏感性。方法 :反转录PCR获得人FADD及TNFR1基因cDNA ,重组PCR法构建含二者功能结构域的融合基因TFL ;阳离子脂质体法稳定转染TFL基因入Tca 8113细胞中 ,Westernblot检测融合蛋白TNFR1/DED表达 ,通过生长曲线检测T TFL细胞的生物学性状 ;MTT法检测γ射线对T TFL细胞的作用效应。结果 :获得了人FADD及TNFR1基因并构建成功融合基因TFL ,转染入Tca 8113细胞后 ,能表达融合蛋白TNFR1/DED活性 ,且T TFL细胞与亲本Tca 8113细胞的生物学性状无明显差异 ,T TFL细胞明显增强了对辐射的敏感性。结论 :T TFL细胞能增强对辐射的敏感性 。 展开更多
关键词 TFL 舌癌 辐射敏感性实验 癌细胞系 基因表达 融合基因
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