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丝裂原活化蛋白激酶通路对成纤维细胞内游离钙的影响 被引量:6
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作者 程飚 付小兵 +2 位作者 盛志勇 张萍 孟晋红 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期380-382,共3页
为观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对离体热烫伤后成纤维细胞内钙离子的作用以及丝裂原活化蛋白激酶 (MAPK)通路对胞内游离钙的影响 ,将培养的人成纤维细胞进行热损伤刺激后分成 4组 :①bFGF处理组 (10ng/ml) ;②预先加入PD980 5 9(10... 为观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对离体热烫伤后成纤维细胞内钙离子的作用以及丝裂原活化蛋白激酶 (MAPK)通路对胞内游离钙的影响 ,将培养的人成纤维细胞进行热损伤刺激后分成 4组 :①bFGF处理组 (10ng/ml) ;②预先加入PD980 5 9(10 μmol/L)阻断剂 30min,再行bFGF(10ng/ml)刺激 ;③预先加入SB2 0 35 80 (10 μmol/L)阻断剂 30min ,再行bFGF刺激 (10ng/ml) ;④同时加入PD980 5 9(10 μmol/L)和SB2 0 35 80 (10 μmol/L) 2种阻断剂 30min,再加入bFGF(10ng/ml)。应用特异性Ca2 + 荧光指示剂Fluo 3/AM负载细胞 ,激光共聚焦显微镜检测细胞内游离钙的浓度。结果显示 ,受热刺激的成纤维细胞荧光强度较弱。加入bFGF后可促使成纤维细胞中游离Ca2 +浓度升高 ,分别预先加入PD980 5 9和SB2 0 35 80拮抗剂的成纤维细胞 ,再加入bFGF ,胞内钙离子浓度出现不同的钙振荡现象。同时加入 2种阻断剂后胞内钙离子浓度则迅速降低。表明bFGF引起热损伤后的成纤维细胞中游离Ca2 + 浓度的增加 。 展开更多
关键词 成纤维细胞生长因子 显微镜检查 丝裂原活化蛋白激酶 BFGF 烫伤
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成年大鼠脊髓损伤后血-脊髓屏障通透性变化 被引量:5
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作者 赵宇 沈学锋 +3 位作者 程希平 焦西英 游思维 鞠躬 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期437-440,共4页
为了观察脊髓挤压伤后血-脊髓屏障(BSCB)的通透性变化,本研究选用体重180~200g成年雄性SD大鼠39只,随机分为对照组(n=3)和脊髓损伤组(n=6)。后者又分为伤后0、8、24、72h以及1周、2周等6组,每组6只,再分为A组、B组,每组各3... 为了观察脊髓挤压伤后血-脊髓屏障(BSCB)的通透性变化,本研究选用体重180~200g成年雄性SD大鼠39只,随机分为对照组(n=3)和脊髓损伤组(n=6)。后者又分为伤后0、8、24、72h以及1周、2周等6组,每组6只,再分为A组、B组,每组各3只。脊髓损伤组A组的组织切片行H.E.染色,显微镜下观察脊髓损伤后的形态学变化。对照组和B组动物股静脉注射30g/L伊文思蓝,30min后,以温生理盐水及4%多聚甲醛灌注动物,取出脊髓,行冰冻切片,荧光显微镜下观察。结果观察到,脊髓挤压伤术后72h内,损伤区周围均可见伊文思蓝染色,至1周后损伤区周围未见伊文思蓝染色。本研究结果提示,脊髓损伤72h内可能为有效给药时间窗,1周后给药,药物对脊髓损伤的治疗作用将难以达到治疗目的。 展开更多
关键词 脊髓损伤 血-脊髓屏障 伊文思蓝 大鼠
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离体热损伤成纤维细胞所涉及的细胞信号通路 被引量:1
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作者 程飚 付小兵 +2 位作者 盛志勇 张萍 孟晋红 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期590-591,I004,共3页
利用已建立的成纤维细胞热损伤诱导凋亡模型观察离体培养的成纤维细胞热烫伤后信号通路的活化情况。首先将原代培养的人成纤维细胞经 5~ 6传代后 ,45℃水中孵育 10min,造成单纯热损伤刺激 ,加入 5 %小牛血清继续培养 ,分别在伤后 0、3 ... 利用已建立的成纤维细胞热损伤诱导凋亡模型观察离体培养的成纤维细胞热烫伤后信号通路的活化情况。首先将原代培养的人成纤维细胞经 5~ 6传代后 ,45℃水中孵育 10min,造成单纯热损伤刺激 ,加入 5 %小牛血清继续培养 ,分别在伤后 0、3 0、60和180min 4个时相点冻存细胞 ,运用Westernblot进行MAPKs信号通路磷酸化蛋白印迹检测 ,同时采用荧光显微镜检测热损伤成纤维细胞caspase3蛋白的表达情况。结果显示 ,经过热损伤刺激的成纤维细胞 ,c junN末端激酶 (JNK)首先开始表达 ,并在 60min达到高峰 ,能持续至 180min。细胞外信号调节激酶(ERK)的表达高峰在伤后 3 0min,随后迅速消退。损伤早期 ,成纤维细胞内caspase3阳性标记的细胞数较少 ,至伤后 60min ,caspase3的表达明显增强。研究表明 。 展开更多
关键词 丝裂素活化蛋白激酶 创伤与损伤 信号传递 成纤维细胞
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脊髓挤压伤所致小胶质细胞的变化与血脊髓屏障的关系 被引量:4
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作者 王子田 沈学锋 +5 位作者 龚雪鹏 赵宇 葛冠群 张欲凯 游思维 鞠躬 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期113-118,共6页
为探讨脊髓损伤时血脊髓屏障的破坏和小胶质细胞被激活两者之间的关系,本实验用大鼠脊髓挤压伤模型进行了研究。将成年雄性SD大鼠64只,随机分为对照组及脊髓挤压伤后0h、8h、24h、72h、1w、2w、4w等8组。分别以HE染色观察病理变化,小胶... 为探讨脊髓损伤时血脊髓屏障的破坏和小胶质细胞被激活两者之间的关系,本实验用大鼠脊髓挤压伤模型进行了研究。将成年雄性SD大鼠64只,随机分为对照组及脊髓挤压伤后0h、8h、24h、72h、1w、2w、4w等8组。分别以HE染色观察病理变化,小胶质特异性标记物OX-42的免疫荧光组化染色观察小胶质细胞,股静脉伊文思蓝注射观察血脊髓屏障的变化。结果显示,脊髓损伤面积在伤后8h组明显扩大,72h达顶峰,1w组时面积回缩并维持到实验最后(4w)。在伤后24h组可观察到活化的小胶质细胞,其后一部分迁移入损伤区内,吞噬坏死组织,变成巨噬细胞。至4w时,HE染色切片上仍可在伤区内见到小胶质巨噬细胞。伤区外活化的小胶质细胞仍可见于伤后4w。伊文思蓝不能通过正常的血脊髓屏障,脊髓挤压伤后即可进入脊髓,分布于损伤区及其邻近。至1w时脊髓内已无伊文思蓝,血脊髓屏障恢复正常。此现象与脊髓伤后活化的小胶质细胞长期存在的事实不一致。活化的小胶质细胞可损坏血脊髓屏障,血脊髓屏障在脊髓挤压伤后1w已恢复,而活化的小胶质细胞却可在伤后长期存在,说明单纯激活的小胶质细胞不足以破坏血脊髓屏障。 展开更多
关键词 脊髓损伤 血-脊髓屏障 小胶质细胞 大鼠 伊文思蓝
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