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NT3基因工程细胞经脑脊液途径的耳蜗内生物学效应的初步证明被引量：14: 1; 作者高下王锦玲 +3 位作者杨安钢金明许彦鸣王枫《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 2002年第4期255-257,279,共4页; 目的　通过脑脊液途径移植神经营养因子 - 3(NT3)基因工程细胞 ,初步观察其耳蜗内听觉生物学效应。方法　将体外构建的NT3基因工程细胞扩大培养 ,收集浓缩培养上清中的蛋白 ,用印迹杂交鉴定其分泌蛋白的生物学效应 ,再将适当的细胞直接... 展开更多; 关键词脑脊液生物学效应神经营养因子-3 基因治疗基因转染基因工程细胞耳蜗听觉老化感音性聋; 在线阅读下载PDF 职称材料

人重组caspase-6融合蛋白对骨肉瘤SOSP-9607细胞靶向促凋亡作用被引量：1: 2; 作者周本根许彦鸣 +7 位作者裘秀春杨彤涛纪振钢苟永胜任民周勇杨安钢范清宇《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2007年第1期21-25,共5页; 目的:探讨Her2靶向重组的caspase-6融合蛋白对骨肉瘤SOSP-9607细胞的促凋亡作用。方法:将抗Her2单链抗体基因e23sFv与绿脓杆菌外毒素PE的转膜结构域基因(PEⅡ)和活性caspase-6基因连接,构建成Immunocasp-6(e23sFv-PEⅡ-casp-6)基因,将... 展开更多; 关键词 CASPASE-6 HER 2 融合蛋白骨肉瘤细胞凋亡; 在线阅读下载PDF 职称材料

曲古抑菌素A通过上调KLF4表达诱导人子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡被引量：1: 3; 作者赵智凝周强 +5 位作者白久旭闫博秦炜炜王涛贾林涛杨安钢《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期52-55,共4页; 目的:观察组蛋白乙酰基转移酶(histone deacetylase,HDAC)抑制剂曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)对子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡的影响,并研究其与Krupell样因子4(Krupell-like factor 4,KLF4)的关系。方法:0、50、100、200、300、500ng... 展开更多; 关键词曲古抑菌素A 子宫内膜癌 ISHIKAWA细胞 Krupell样因子4 凋亡; 在线阅读下载PDF 职称材料

HER2基因沉默抑制人胃癌细胞SGC-7901的生长和侵袭被引量：1: 4; 作者鲍炜付海京 +6 位作者贾林涛张勇刘家云任新玲温伟红孟艳玲杨安钢《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2007年第4期328-332,共5页; 目的:探讨针对HER2基因的RNA干涉对人胃癌细胞生长和侵袭的影响。方法:构建了针对癌基因HER2的siRNA表达载体,分别命名为pcDNA3-sihe1和pcDNA3-sihe2,将构建的干涉载体与对照载体转染胃癌SGC-7901细胞,通过间接免疫荧光实验确定干涉效果... 展开更多; 关键词 HER2基因 RNA干涉胃肿瘤侵袭; 在线阅读下载PDF 职称材料

hOP-1全长基因克隆及真核表达载体的构建: 5; 作者岳玲史俊南 +3 位作者柴玉波孙叶方荫俊文玲英《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期118-121,共4页; 目的　证实人牙乳头细胞中OP 1的表达 ,获得hOP 1全长基因及其高效真核表达载体。方法　提取人牙乳头细胞总RNA ,反转录合成cDNA ,以特异性引物扩增hOP 1全长基因并克隆入T载体 ,筛选阳性克隆进行序列测定后。构建高效真核表达载体pCI O... 展开更多; 关键词 hOP-1 全长基因克隆人牙乳头细胞真核表达载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

BDNF基因重组逆转录病毒载体pLCNX-BDNF的构建与鉴定: 6; 作者高下贾林涛 +3 位作者许彦鸣王枫王锦玲杨安钢《安徽医科大学学报》 CAS 2001年第4期267-270,共4页; 目的　构建含脑源性神经营养因子 (BDNF)基因的逆转录病毒载体 (pLCNX)质粒。方法　利用多克隆酶切位点正向黏端连接 ,转化大肠杆菌感受态细菌DH5α获得质粒 ,双酶切电泳和PCR方法初步鉴定 ,并提交DNA测序工作站进行测序分析。结果　... 展开更多; 关键词脑源性神经营养因子逆转录病毒科基因重组小鼠耳聋 BDNF; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名NT3基因工程细胞经脑脊液途径的耳蜗内生物学效应的初步证明被引量：14: 1; 作者高下王锦玲杨安钢金明许彦鸣王枫; 机构南京大学医学院附属鼓楼医院耳鼻咽喉科第四军医大学西京医院耳鼻咽喉科第四军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室; 出处《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 2002年第4期255-257,279,共4页; 文摘目的　通过脑脊液途径移植神经营养因子 - 3(NT3)基因工程细胞 ,初步观察其耳蜗内听觉生物学效应。方法　将体外构建的NT3基因工程细胞扩大培养 ,收集浓缩培养上清中的蛋白 ,用印迹杂交鉴定其分泌蛋白的生物学效应 ,再将适当的细胞直接移植到 2 0天龄近交BALB/C小鼠的脑脊液中 ,4 0天后比较移植前后的畸变产物耳声发射 (DPOAE)幅值。结果　体外构建NT3基因工程细胞是可行的 ,其具备分泌NT3的功能 ,经脑脊液途径注射后观察到BALB/C小鼠耳蜗功能的老化在高频范围内得到了延缓 ,DPOAE高频范围幅值下降减缓。结论　NT3基因工程细胞具有较好的体外体内生物学效应 ,可以用于进一步实验治疗感音性聋的研究 ;; 关键词脑脊液生物学效应神经营养因子-3 基因治疗基因转染基因工程细胞耳蜗听觉老化感音性聋; Keywords Nurotrophin-3 Gene therapy Gene transfer Genetic engineering cells Cochlea Hearing loss with age Inbreed mouse; 分类号 R764.43 [医药卫生—耳鼻咽喉科]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人重组caspase-6融合蛋白对骨肉瘤SOSP-9607细胞靶向促凋亡作用被引量：1: 2; 作者周本根许彦鸣裘秀春杨彤涛纪振钢苟永胜任民周勇杨安钢范清宇; 机构第四军医大学唐都医院骨肿瘤研究所第四军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室第四军医大学基础医学部免疫学教研室; 出处《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2007年第1期21-25,共5页; 基金国家自然科学基金重点项目(No.30330610) 国家自然科学基金项目(No.30471988) 中国博士后基金项目(No.2005038259); 文摘目的:探讨Her2靶向重组的caspase-6融合蛋白对骨肉瘤SOSP-9607细胞的促凋亡作用。方法:将抗Her2单链抗体基因e23sFv与绿脓杆菌外毒素PE的转膜结构域基因(PEⅡ)和活性caspase-6基因连接,构建成Immunocasp-6(e23sFv-PEⅡ-casp-6)基因,将其克隆入真核表达载体pCMV中,转染SOSP-9607细胞,间接免疫荧光法检测目的基因表达和细胞形态学变化,通过AnnexinV染色、流式细胞术、MTT法检测来观察其促肿瘤细胞凋亡的作用。结果:转染SOSP-9607细胞后,间接免疫荧光染色检测出caspase-6的表达,SOSP-9607细胞出现明显的核浓缩、碎裂;电镜观察到细胞质浓缩,胞内空泡,核染色质浓集等典型的凋亡特征;MTT法检测发现细胞的增殖明显被抑制;AnnexinV染色流式细胞术检测可见明显的凋亡细胞,凋亡率为31.4%,较对照组细胞(凋亡率为6.0%)有非常显著的增加(P<0.01)。结论:重组Immunocasp-6基因可以在转染的SOSP-9607细胞中表达,并诱导细胞发生凋亡。; 关键词 CASPASE-6 HER 2 融合蛋白骨肉瘤细胞凋亡; Keywords caspase-6 Her 2 fusion protein osteosarcoma cell apoptosis; 分类号 Q255 [生物学—细胞生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名曲古抑菌素A通过上调KLF4表达诱导人子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡被引量：1: 3; 作者赵智凝周强白久旭闫博秦炜炜王涛贾林涛杨安钢; 机构第四军医大学基础医学部免疫学教研室第四军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室第四军医大学口腔医院综合急诊科解放军第; 出处《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期52-55,共4页; 基金国家重点基础研究发展计划(973计划)资助项目(No.2010CB529905)~~; 文摘目的:观察组蛋白乙酰基转移酶(histone deacetylase,HDAC)抑制剂曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)对子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡的影响,并研究其与Krupell样因子4(Krupell-like factor 4,KLF4)的关系。方法:0、50、100、200、300、500ng/ml TSA作用于Ishikawa细胞24 h,或100 ng/ml TSA作用于Ishikawa细胞0、4、8、12、24、48 h,流式细胞术检测Ishikawa细胞凋亡情况,qRT-PCR检测Ishikawa细胞中KLF4 mRNA的表达情况;将KLF4真核表达载体pcDNA3-KLF4转染Ishikawa细胞,流式细胞术检测Ishikawa细胞凋亡情况。结果:100 ng/ml TSA作用于Ishikawa细胞24 h后,Ishikawa细胞的凋亡率显著高于对照组[(30.6±4.5)%vs(7.53±0.93)%,P<0.05];不同质量浓度TSA处理Ishikawa细胞24 h后或100 ng/ml TSA作用Ishikawa细胞不同时间后,KLF4 mRNA表达水平以剂量依赖和时间依赖方式明显增高(P<0.05);pcDNA3-KLF4转染后Ishikawa细胞凋亡率显著增加[(27.3±2.7)%vs(4.53±1.75)%,P<0.05]。结论:TSA能通过诱导子宫内膜癌Ishikawa细胞中KLF4的表达,促进Ishikawa细胞发生凋亡。; 关键词曲古抑菌素A 子宫内膜癌 ISHIKAWA细胞 Krupell样因子4 凋亡; Keywords trichostatin A endometrial cancer Ishikawa cell Krupell-like factor 4 apoptosis; 分类号 R737.33 [医药卫生—肿瘤] R730.54 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名HER2基因沉默抑制人胃癌细胞SGC-7901的生长和侵袭被引量：1: 4; 作者鲍炜付海京贾林涛张勇刘家云任新玲温伟红孟艳玲杨安钢; 机构第四军医大学基础医学部免疫学教研室第四军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室第四军医大学附属西京医院呼吸内科; 出处《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2007年第4期328-332,共5页; 基金国家重点基础研究发展(973)计划资助项目(No2004CB518805) 国家自然科学基金资助项目(No30500592) 教育部"长江学者和创新团队发展计划"资助项目(IRT0459)~~; 文摘目的:探讨针对HER2基因的RNA干涉对人胃癌细胞生长和侵袭的影响。方法:构建了针对癌基因HER2的siRNA表达载体,分别命名为pcDNA3-sihe1和pcDNA3-sihe2,将构建的干涉载体与对照载体转染胃癌SGC-7901细胞,通过间接免疫荧光实验确定干涉效果;以软琼脂集落形成实验检测干涉后细胞的集落形成能力,以流式细胞术检测细胞在悬浮培养条件下的凋亡情况;并以Boyden chamber法检测转染后细胞的侵袭能力。结果:成功构建针对癌基因HER2的siRNA表达载体,siRNA表达载体转染SGC-7901细胞后HER2表达水平明显降低,证实siRNA成功抑制HER2蛋白的表达。HER2低表达的细胞株集落形成能力降低,流式细胞术检测发现HER2下调可引起胃癌细胞的凋亡,Boydenchamber实验表明针对HER2的RNA干涉可抑制胃癌细胞SGC-7901的侵袭能力。结论:RNA干涉有效地抑制了HER2分子的表达,进而影响SGC-7901细胞的生长和侵袭,本实验为进一步研究HER2分子与肿瘤细胞生长和转移的关系奠定了基础。; 关键词 HER2基因 RNA干涉胃肿瘤侵袭; Keywords HER2 gene RNA interference gastric neoplasms invasion; 分类号 R730.5 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名hOP-1全长基因克隆及真核表达载体的构建: 5; 作者岳玲史俊南柴玉波孙叶方荫俊文玲英; 机构第三军医大学大坪医院野战外科研究所口腔科第四军医大学口腔医学院牙体病科第四军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室军事医学科学院微生物流行病学研究所; 出处《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期118-121,共4页; 文摘目的　证实人牙乳头细胞中OP 1的表达 ,获得hOP 1全长基因及其高效真核表达载体。方法　提取人牙乳头细胞总RNA ,反转录合成cDNA ,以特异性引物扩增hOP 1全长基因并克隆入T载体 ,筛选阳性克隆进行序列测定后。构建高效真核表达载体pCI OP 1并筛选鉴定。结果　PCR扩增得到一特异性的约 13 0 0bp的片段 ,序列测定结果表明与国外已发表的序列完全一致。构建的pCI OP 1质粒 ,用于基因转染纯度较好。结论　人牙乳头细胞中首次克隆到hOP 1全长基因。; 关键词 hOP-1 全长基因克隆人牙乳头细胞真核表达载体; Keywords hOP 1 full length gene clone human dental papilla mesenchymal cell mammalian expression vector; 分类号 Q516 [生物学—生物化学] Q782 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名BDNF基因重组逆转录病毒载体pLCNX-BDNF的构建与鉴定: 6; 作者高下贾林涛许彦鸣王枫王锦玲杨安钢; 机构第四军医大学西京医院耳鼻咽喉科第四军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室; 出处《安徽医科大学学报》 CAS 2001年第4期267-270,共4页; 基金第四军医大学院校出国进修专项启动基金 (编号 :1788); 文摘目的　构建含脑源性神经营养因子 (BDNF)基因的逆转录病毒载体 (pLCNX)质粒。方法　利用多克隆酶切位点正向黏端连接 ,转化大肠杆菌感受态细菌DH5α获得质粒 ,双酶切电泳和PCR方法初步鉴定 ,并提交DNA测序工作站进行测序分析。结果　重组构建的质粒pLCNX BDNF完全正确 ,含有全长小鼠BDNF基因片段。结论　获得正确的含全长BDNF基因的 pLCNX BDNF质粒。; 关键词脑源性神经营养因子逆转录病毒科基因重组小鼠耳聋 BDNF; Keywords brain derived neurotrophic factor fetroviridae gene rearrangement; 分类号 R764.43 [医药卫生—耳鼻咽喉科] R394 [医药卫生—医学遗传学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	NT3基因工程细胞经脑脊液途径的耳蜗内生物学效应的初步证明	高下王锦玲杨安钢金明许彦鸣王枫	《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD	2002	14	在线阅读下载PDF 职称材料
2	人重组caspase-6融合蛋白对骨肉瘤SOSP-9607细胞靶向促凋亡作用	周本根许彦鸣裘秀春杨彤涛纪振钢苟永胜任民周勇杨安钢范清宇	《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD	2007	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	曲古抑菌素A通过上调KLF4表达诱导人子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡	赵智凝周强白久旭闫博秦炜炜王涛贾林涛杨安钢	《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心	2012	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	HER2基因沉默抑制人胃癌细胞SGC-7901的生长和侵袭	鲍炜付海京贾林涛张勇刘家云任新玲温伟红孟艳玲杨安钢	《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD	2007	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	hOP-1全长基因克隆及真核表达载体的构建	岳玲史俊南柴玉波孙叶方荫俊文玲英	《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2004	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	BDNF基因重组逆转录病毒载体pLCNX-BDNF的构建与鉴定	高下贾林涛许彦鸣王枫王锦玲杨安钢	《安徽医科大学学报》 CAS	2001	0	在线阅读下载PDF 职称材料