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HER2靶向免疫促凋亡蛋白e23sFv-Fdt-tBid真核表达载体的构建及其稳定表达细胞株的建立
被引量：
4
1
作者
白文栋
席文锦
+5 位作者
王芳
王丽娟
杨韬
彭红艳
孟艳玲
杨安钢
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第1期94-96,共3页
目的:构建HER2靶向免疫促凋亡蛋白e23sFv-Fdt-tBid真核表达载体,并运用Flp-InTM定点整合表达系统建立稳定表达该细胞的CHO工程细胞株。方法:应用PCR技术以pcMV-e23sFv-Fdt-tBid为模板扩增e23sFv-Fdt-tBid片段,并将其克隆入pcDNA5/FRT载...
目的:构建HER2靶向免疫促凋亡蛋白e23sFv-Fdt-tBid真核表达载体,并运用Flp-InTM定点整合表达系统建立稳定表达该细胞的CHO工程细胞株。方法:应用PCR技术以pcMV-e23sFv-Fdt-tBid为模板扩增e23sFv-Fdt-tBid片段,并将其克隆入pcDNA5/FRT载体中;通过Flp-InTM定点整合表达系统将e23sFv-Fdt-tBid整合入Flp-lnTM CHO细胞的基因组中一个单拷贝位点上,以适当的潮霉素B筛选定点整合e23sFv-Fdt-tBid cDNA的细胞克隆;通过基因组PCR技术和Westernblot技术检测e23sFv-Fdt-tBid基因的整合及该蛋白表达。结果:成功构建了pcDNA5/FRT-e23sFv-Fdt-tBid表达载体;成功通过Flp-InTM定点整合表达系统建立稳定表达e23sFv-Fdt-tBid蛋白的CHO工程细胞株;成功通过基因组PCR技术及基因组PCR技术和Western blot技术检测了e23sFv-Fdt-tBid基因的整合及该蛋白表达。结论:成功地构建了HER2靶向免疫促凋亡蛋白e23sFv-Fdt-tBid真核表达载体并建立了稳定表达该蛋白的CHO工程细胞株,为该蛋白的应用研究奠定了重要基础。
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关键词
免疫促凋亡蛋白
HER2
真核表达
定点整合
CHO工程细胞株
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职称材料
肝原位移植瘤裸鼠模型的建立及活体荧光成像检测
被引量：
4
2
作者
贾小飞
闫博
+3 位作者
张熠杰
蒋帅
赵晶
杨安钢
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第4期426-429,共4页
目的建立能够通过活体荧光成像系统实时监测肿瘤进展的肝原位移植瘤裸鼠模型。方法重组质粒pcDNA3.1-Luc转染细胞构建稳定表达荧光素酶的PLC/PRF/5肝癌细胞株,将该细胞注入裸鼠肝脏实质内,应用活体成像技术动态监测肿瘤进展情况,解剖荧...
目的建立能够通过活体荧光成像系统实时监测肿瘤进展的肝原位移植瘤裸鼠模型。方法重组质粒pcDNA3.1-Luc转染细胞构建稳定表达荧光素酶的PLC/PRF/5肝癌细胞株,将该细胞注入裸鼠肝脏实质内,应用活体成像技术动态监测肿瘤进展情况,解剖荧光信号阳性裸鼠观察肿瘤组织生长情况。免疫荧光检测肿瘤组织中HBsAg表达。结果对裸鼠肝原位移植瘤应用活体荧光系统成像,在肿瘤细胞注射部位检测到荧光信号,解剖动物后可在肝脏组织中观察到异质细胞团块。免疫荧光证实移植瘤中有HBsAg表达。结论肝脏原位移植瘤裸鼠模型建立成功,为抗肝癌药物的研发提供了工具。
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关键词
肝原位移植瘤裸鼠模型
活体荧光成像
荧光素酶
PLC
PRF
5细胞株
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职称材料
题名
HER2靶向免疫促凋亡蛋白e23sFv-Fdt-tBid真核表达载体的构建及其稳定表达细胞株的建立
被引量：
4
1
作者
白文栋
席文锦
王芳
王丽娟
杨韬
彭红艳
孟艳玲
杨安钢
机构
第四军医大学国家肿瘤生物学重点实验室
第四军医大学
免疫学教研室
第四军医大学
微
生物学
教研室
西安交通
大学
医学院第一附属医院
第四军医大学
西京医院内分泌科
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第1期94-96,共3页
基金
国家自然科学基金资助项目(81001015/H1611)
文摘
目的:构建HER2靶向免疫促凋亡蛋白e23sFv-Fdt-tBid真核表达载体,并运用Flp-InTM定点整合表达系统建立稳定表达该细胞的CHO工程细胞株。方法:应用PCR技术以pcMV-e23sFv-Fdt-tBid为模板扩增e23sFv-Fdt-tBid片段,并将其克隆入pcDNA5/FRT载体中;通过Flp-InTM定点整合表达系统将e23sFv-Fdt-tBid整合入Flp-lnTM CHO细胞的基因组中一个单拷贝位点上,以适当的潮霉素B筛选定点整合e23sFv-Fdt-tBid cDNA的细胞克隆;通过基因组PCR技术和Westernblot技术检测e23sFv-Fdt-tBid基因的整合及该蛋白表达。结果:成功构建了pcDNA5/FRT-e23sFv-Fdt-tBid表达载体;成功通过Flp-InTM定点整合表达系统建立稳定表达e23sFv-Fdt-tBid蛋白的CHO工程细胞株;成功通过基因组PCR技术及基因组PCR技术和Western blot技术检测了e23sFv-Fdt-tBid基因的整合及该蛋白表达。结论:成功地构建了HER2靶向免疫促凋亡蛋白e23sFv-Fdt-tBid真核表达载体并建立了稳定表达该蛋白的CHO工程细胞株,为该蛋白的应用研究奠定了重要基础。
关键词
免疫促凋亡蛋白
HER2
真核表达
定点整合
CHO工程细胞株
分类号
R392.9 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
肝原位移植瘤裸鼠模型的建立及活体荧光成像检测
被引量：
4
2
作者
贾小飞
闫博
张熠杰
蒋帅
赵晶
杨安钢
机构
第四军医大学国家肿瘤生物学重点实验室
第四军医大学
生物
化学与分子
生物学
教研室
第四军医大学
口腔医学系
第四军医大学
航空与航天医学系
第四军医大学
免疫学教研室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第4期426-429,共4页
基金
国家科技重大专项(2008ZX10002-023)
国家自然科学基金(30873006
+1 种基金
81172149
81201777)
文摘
目的建立能够通过活体荧光成像系统实时监测肿瘤进展的肝原位移植瘤裸鼠模型。方法重组质粒pcDNA3.1-Luc转染细胞构建稳定表达荧光素酶的PLC/PRF/5肝癌细胞株,将该细胞注入裸鼠肝脏实质内,应用活体成像技术动态监测肿瘤进展情况,解剖荧光信号阳性裸鼠观察肿瘤组织生长情况。免疫荧光检测肿瘤组织中HBsAg表达。结果对裸鼠肝原位移植瘤应用活体荧光系统成像,在肿瘤细胞注射部位检测到荧光信号,解剖动物后可在肝脏组织中观察到异质细胞团块。免疫荧光证实移植瘤中有HBsAg表达。结论肝脏原位移植瘤裸鼠模型建立成功,为抗肝癌药物的研发提供了工具。
关键词
肝原位移植瘤裸鼠模型
活体荧光成像
荧光素酶
PLC
PRF
5细胞株
Keywords
intrahepatic xenograft tumor model
in vivo fluorescence imaging system
luciferase
PLC/PRF/5 cell line
分类号
R392.33 [医药卫生—免疫学]
R735.7 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
HER2靶向免疫促凋亡蛋白e23sFv-Fdt-tBid真核表达载体的构建及其稳定表达细胞株的建立
白文栋
席文锦
王芳
王丽娟
杨韬
彭红艳
孟艳玲
杨安钢
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
肝原位移植瘤裸鼠模型的建立及活体荧光成像检测
贾小飞
闫博
张熠杰
蒋帅
赵晶
杨安钢
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013
4
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