以地西他滨为主的化疗方案治疗初治中、老年急性髓系白血病的临床研究 被引量：24

1

作者 李国辉 陈任安 +6 位作者 及月茹 秦炜炜 陈怡 王文清 刘聪 周柰岑 刘利 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期743-749,共7页

目的:研究以地西他滨为主的化疗方案治疗初治中、老年急性髓系白血病(AML)的安全性及有效性。方法:选取2013年1月-2016年12月就诊于本院年龄大于50岁的初诊急性髓系白血病患者(除M3)49例(所有患者均因各种原因不适合行异基因造血干细胞... 目的:研究以地西他滨为主的化疗方案治疗初治中、老年急性髓系白血病(AML)的安全性及有效性。方法:选取2013年1月-2016年12月就诊于本院年龄大于50岁的初诊急性髓系白血病患者(除M3)49例(所有患者均因各种原因不适合行异基因造血干细胞移植)。诱导治疗均采取以地西他滨为主的化疗方案,包括地西他滨单药(DAC)、地西他滨联合半量CAG方案(DAC-CAG)及地西他滨联合HAAG方案(DAC-HAAG)。在强化治疗方面对大部分患者继续应用原诱导方案治疗,部分患者给予标准"3+7"方案及中大剂量阿糖胞苷治疗。患者缓解后疗程数为2-4周期。结果:49例患者全部完成诱导治疗,完全缓解(CR)26例,部分缓解(PR)7例,无效(NR)16例,CR率53%,总有效率(ORR)67%。DAC组、DAC-CAG组及DAC-HAAG组有效率分别为17%、77%及63%。诱导过程感染14例,死亡1人,死因为肺部感染。诱导过程中平均输注红细胞9 U,输注血小板69U。白细胞恢复时间15 d,血小板恢复时间20 d。患者0.5、1和2年生存率分别为75%、30%及26%,0.5、1及2年无复发生存率分别为83%、54%及47%。诱导治疗是否能达到CR是影响预后的独立因素,而初诊时外周血白细胞和血小板数、年龄、诱导治疗效果、预后分层、化疗方案及诱导时是否合并肺炎均为非独立预后因素。结论:地西他滨联合化疗方案诱导效果优于单药,首次诱导治疗结果是独立的预后因素,而初诊时高白细胞、不良核型、合并症、伴有病态造血相关改变并不影响长期生存。DAC-CAG方案治疗有效率高,不良反应相对较少,适合应用于年龄大、合并症多、不适合常规方案化疗的中老年急性髓系白血病患者。 展开更多

关键词 急性髓系白血病 地西他滨 CAG方案 诱导治疗

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带有蛋白转导结构域的Bcr/Abl癌蛋白片段的表达及其跨膜转运 被引量：8

2

作者 梁英民 孙强 +7 位作者 蒋姗姗 陈萍 王冀姝 李荣 周鹏 王键 黄红艳 韩骅 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期574-578,共5页

HIV 1编码的反式激活蛋白TAT具有将细胞外蛋白转导进入细胞的基序 ,称为蛋白转导结构域 (PTD) .为研究PTD介导的PTD Bcr Abl融合蛋白的跨膜转运 ,合成了编码PTD的基因片段 ,并与PCR扩增的慢性粒细胞白血病癌蛋白bcr abl基因片段融合 .... HIV 1编码的反式激活蛋白TAT具有将细胞外蛋白转导进入细胞的基序 ,称为蛋白转导结构域 (PTD) .为研究PTD介导的PTD Bcr Abl融合蛋白的跨膜转运 ,合成了编码PTD的基因片段 ,并与PCR扩增的慢性粒细胞白血病癌蛋白bcr abl基因片段融合 .在大肠杆菌中表达纯化了融合蛋白 ,将纯化的融合蛋白加入培养的HL60细胞和C2C12细胞后 ,发现PTD基序可以介导Bcr Abl蛋白自由从细胞外跨膜转导进入细胞内 .研究结果可能为用外源蛋白负载 (loading)免疫活性细胞如抗原提呈细胞提供新的途径 . 展开更多

关键词 蛋白转导结构域 BCR/ABL 慢性粒细胞白血病 基因表达 癌蛋白

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PTD-bcr/abl融合癌蛋白片段的表达及其跨膜转运 被引量：8

3

作者 梁英民 孙强 +4 位作者 蒋姗姗 陈萍 王冀姝 刘利 韩骅 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期377-380,共4页

目的探讨蛋白转导结构域(PTD)介导的转导bcr/abl癌蛋白片段的方法，为进行免疫治疗提供实验依据。方法合成编码PTD的基因片段，并与PCR扩增的慢性粒细胞白血病癌蛋白bcr/abl基因片段融合,在大肠杆菌中表达。将纯化的融合蛋白PTD-bcr/abl... 目的探讨蛋白转导结构域(PTD)介导的转导bcr/abl癌蛋白片段的方法，为进行免疫治疗提供实验依据。方法合成编码PTD的基因片段，并与PCR扩增的慢性粒细胞白血病癌蛋白bcr/abl基因片段融合,在大肠杆菌中表达。将纯化的融合蛋白PTD-bcr/abl与HL-60 细胞共孵育，用Western blot分析融合蛋白的跨膜转运。结果PTD基序可介导bcr/abl蛋白由细胞外跨膜转导进入细胞内。结论这一结果可能为应用外源蛋白负载(loading)抗原提呈细胞(APC)提供新的途径。 展开更多

关键词 蛋白转导 BCR/ABL 慢性粒细胞白血病 基因表达 融合癌蛋白片段

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11例急性早幼粒细胞白血病患者并发维甲酸综合征的临床分析 被引量：8

4

作者 王智 冯金萍 +4 位作者 郝淼旺 郑引索 田昱平 姚亚洲 白秀琴 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第5期469-471,共3页

为了探讨急性早幼粒细胞白血病 (APL)并发的维甲酸综合征 (RAS)的临床特点、发病危险因素及治疗 ,对11例APL并发RAS病人的临床和实验室检查资料进行了回顾性分析。结果表明 :RAS较多见且较早出现 ,其临床症状为呼吸困难 (11/ 11)、发热 ... 为了探讨急性早幼粒细胞白血病 (APL)并发的维甲酸综合征 (RAS)的临床特点、发病危险因素及治疗 ,对11例APL并发RAS病人的临床和实验室检查资料进行了回顾性分析。结果表明 :RAS较多见且较早出现 ,其临床症状为呼吸困难 (11/ 11)、发热 (10 / 11)和胸腔积液 (6/ 11)等。全反式维甲酸 (ATRA)治疗中白细胞数增高 (≥15 0× 10 9/L)者易发生RAS(9/ 11)。在继续应用ATRA的同时静脉滴注地塞米松治疗的有 10例缓解 ,1例死于弥散性血管内凝血。结论 :早期识别RAS症状和应用地塞米松治疗是取得较好临床效果的关键 。 展开更多

关键词 急性早幼粒细胞白血病 维甲酸综合征 全反式维甲酸

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NO在脂联素抑制高脂血症大鼠血小板聚集中的作用 被引量：10

5

作者 樊荣 王文清 +1 位作者 李榕 张海锋 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1761-1765,共5页

目的:探讨一氧化氮(NO)信号转导通路在脂联素抑制高脂血症血小板聚集机制中的作用。方法:采用成年大鼠饲以高脂饲料14周,分离其血小板并以重组脂联素(rAPN)孵育。采用免疫荧光、Western blot-ting等方法观察检测血小板聚集、NO含量、超... 目的:探讨一氧化氮(NO)信号转导通路在脂联素抑制高脂血症血小板聚集机制中的作用。方法:采用成年大鼠饲以高脂饲料14周,分离其血小板并以重组脂联素(rAPN)孵育。采用免疫荧光、Western blot-ting等方法观察检测血小板聚集、NO含量、超氧化物含量、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)/诱导型一氧化氮合酶(iN-OS)的表达和抗氧化物活性。结果:采用rAPN处理能抑制高脂血症诱导的血小板聚集(P<0.05),并导致血小板NO的生成显著减少。同时,在高脂血症血小板中,采用rAPN处理还能显著减少超氧化物的生成(降低62%,P<0.05)并增强其抗氧化能力(增加38%,P<0.05)。此外,高脂血症诱导的eNOS磷酸化的降低和iNOS表达的增加在rAPN处理后被显著逆转(P<0.05,P<0.01)。结论:脂联素是一种抑制高脂血症血小板聚集的脂肪细胞因子,其机制与减少超氧化物水平、增加抗氧化物活性和阻断iNOS的表达有关。 展开更多

关键词 脂联素 血小板 高脂血症

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索拉非尼对人多发性骨髓瘤细胞RPMI8226增殖与凋亡的影响 被引量：4

6

作者 周柰岑 刘保兰 +2 位作者 齐美颖 徐波 刘心 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期1331-1335,共5页

本研究旨在探索索拉非尼对人骨髓瘤细胞RPMI 8226增殖与凋亡的影响及其作用的分子机制。采用MTT法检测索拉非尼对人多发性骨髓瘤细胞的抑制率,透射电子显微镜观察索拉非尼干预骨髓瘤细胞后其超微结构的变化,流式细胞术检测索拉非尼诱导... 本研究旨在探索索拉非尼对人骨髓瘤细胞RPMI 8226增殖与凋亡的影响及其作用的分子机制。采用MTT法检测索拉非尼对人多发性骨髓瘤细胞的抑制率,透射电子显微镜观察索拉非尼干预骨髓瘤细胞后其超微结构的变化,流式细胞术检测索拉非尼诱导骨髓瘤细胞凋亡的情况及对细胞周期分布的影响,半定量RT-PCR和Western-blot法分别检测索拉非尼作用前后骨髓瘤细胞caspase-3、BCL-2和MCL-1 mRNA和蛋白的表达变化。结果显示,索拉非尼(0-10.0μmol/L)可抑制RPMI 8226细胞增殖,抑制率呈时间-浓度依赖性;48 h后在透射电子显微镜下可见到凋亡小体等典型凋亡改变;索拉非尼可明显诱导骨髓瘤细胞凋亡(P<0.05),主要将细胞阻滞于G1期(P<0.05);索拉非尼作用48 h后,与对照组相比细胞BCL-2及MCL-1 mRNA与蛋白表达量均减少(P<0.05),caspase-3表达量变化不大,而蛋白水平的活化型caspase-3表达增加(P<0.05)。结论:索拉非尼通过诱导细胞凋亡有效抑制骨髓瘤增殖,其机制可能与细胞周期阻滞和激活死亡受体途径有关。 展开更多

关键词 多发性骨髓瘤 索拉非尼 细胞凋亡 CASPASE BCL-2

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p27^(Kip1)反义寡核苷酸对B淋巴瘤细胞WEHI-231细胞周期的影响 被引量：8

7

作者 王骊丽 梁英民 韩骅 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期320-322,326,共4页

目的　探讨p2 7Kip1在抗原受体介导的B淋巴瘤细胞WEHI- 2 31细胞周期停止信号中的作用。方法　用抗IgM抗体诱导WEHI- 2 31细胞细胞周期停止。用合成的p2 7Kip1反义寡核苷酸抑制p2 7Kip1基因的表达。采用流式细胞仪 ,分析细胞核的DNA含... 目的　探讨p2 7Kip1在抗原受体介导的B淋巴瘤细胞WEHI- 2 31细胞周期停止信号中的作用。方法　用抗IgM抗体诱导WEHI- 2 31细胞细胞周期停止。用合成的p2 7Kip1反义寡核苷酸抑制p2 7Kip1基因的表达。采用流式细胞仪 ,分析细胞核的DNA含量和细胞周期的变化。用体外激酶实验检测Cdk2的活性 ,Westernblot检测Rb蛋白的磷酸化水平。结果　合成的p2 7Kip1反义寡核苷酸能阻断抗IgM抗体诱导的p2 7Kip1基因表达的上调。用p2 7Kip1反义寡核苷酸处理WEHI-2 31细胞 ,可恢复抗原受体交联引起的周期素依赖性激酶Cdk2活性的降低 ,以及Rb蛋白磷酸化水平的下降 ,并使细胞周期恢复运转。结论　p2 7Kip1可能在抗原受体信号介导的WEHI-2 展开更多

关键词 P27^KIPL B淋巴瘤细胞 细胞周期 抗原受体 反义寡核苷酸

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护士对化疗药物外渗知识掌握程度的调查分析 被引量：19

8

作者 李武平 张敏 何华 《解放军护理杂志》 2004年第6期27-29,共3页

目的　了解护士对化疗知识的掌握情况。方法　采用问卷对 2所三级甲等医院的 15 5名护士进行调查。结果　化疗药物外渗是临床护理工作中经常遇到的问题。造成化疗药物外渗可能有以下一些原因 :护士对外渗性损伤的化疗药物知识掌握不牢... 目的　了解护士对化疗知识的掌握情况。方法　采用问卷对 2所三级甲等医院的 15 5名护士进行调查。结果　化疗药物外渗是临床护理工作中经常遇到的问题。造成化疗药物外渗可能有以下一些原因 :护士对外渗性损伤的化疗药物知识掌握不牢固 ;对化疗药物不典型外渗不够重视 ;对早期处理程序不清楚 ;对预防措施没有给予足够的重视。结论　加强化疗药物外渗知识学习、教育 ,使护士牢固树立防止化疗药物外渗的安全意识 ;制定相应的化疗药物外渗防护措施预案 ;正确判断化疗药物不典型外渗并采取积极有效的处理措施 。 展开更多

关键词 护士 化疗药物 外渗 调查分析 化疗知识

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蛋白转导域介导BCR/ABL抗原对CML患者T细胞的活化作用 被引量：3

9

作者 刘强 梁英民 +4 位作者 郑瑾 李学义 陈任安 蒋姗姗 吴绒丽 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期377-379,共3页

目的 :研究蛋白转导域 (PTD)介导的BCR/ABL抗原对慢性髓细胞白血病 (CML)患者T细胞的特异性活化作用。方法 :利用基因工程技术 ,将PTD基因与CMLb3a2bcr/abl基因融合并原核表达。将纯化的PTD BCR/ABL融合蛋白与CML患者外周血单个核细胞 (... 目的 :研究蛋白转导域 (PTD)介导的BCR/ABL抗原对慢性髓细胞白血病 (CML)患者T细胞的特异性活化作用。方法 :利用基因工程技术 ,将PTD基因与CMLb3a2bcr/abl基因融合并原核表达。将纯化的PTD BCR/ABL融合蛋白与CML患者外周血单个核细胞 (PBMC)体外共孵育 ,用流式细胞仪分别检测CD4 + 、CD8+ T细胞上活化抗原CD2 5的表达。结果 :终浓度为 10 0mg/L的PTD BCR/ABL抗原体外刺激 4d后 ,10例CML患者中 ,5例表现为CD8+ T细胞活化 ,2例表现为CD4 + T细胞活化 ,其中有 1例CD8+ 和CD4 + T细胞同时活化 ;而作为对照的BCR/ABL抗原刺激组无一例表现为CD8+ 或CD4 + T细胞活化。结论 :PTD能将外源性BCR/ABL抗原转导入抗原呈递细胞内 ,加工呈递后激活抗原特异性CD8+ 及CD4 + T细胞 ,为CML特异性CD8+ 、CD4 + 展开更多

关键词 蛋白转导 免疫原性 融合蛋白、bcr-abl 白血病 髓细胞 慢性 CD25抗原

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Notch信号在造血祖细胞扩增中作用的研究进展 被引量：3

10

作者 李国辉 黄斯勇 +2 位作者 康志杰 徐恒 梁英民 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第5期1227-1231,共5页

造血祖细胞扩增具有十分重要的临床价值,传统的方法扩增往往导致造血祖细胞的分化。Notch受体和配体在造血系统中广泛存在,活化的Notch信号可抑制造血祖细胞的分化而促进其扩增,提示可以通过Notch信号途径实现对造血祖细胞的扩增。本文... 造血祖细胞扩增具有十分重要的临床价值,传统的方法扩增往往导致造血祖细胞的分化。Notch受体和配体在造血系统中广泛存在,活化的Notch信号可抑制造血祖细胞的分化而促进其扩增,提示可以通过Notch信号途径实现对造血祖细胞的扩增。本文就Notch信号通路、Notch信号与造血祖细胞维持、Notch信号与造血祖细胞扩增,Notch信号维持造血祖细胞未分化状况的分子机制,进行了综述。 展开更多

关键词 NOTCH信号 造血祖细胞 造血 扩增

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hdll1^(ext)-Fc融合蛋白真核表达载体的构建及表达 被引量：3

11

作者 张萍 贾洪霞 +1 位作者 周鹏 韩骅 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期11-14,共4页

目的 :构建人dll1ext(humandelta like1extracellularregion) Fc融合蛋白的真核表达载体pEF BOSneo hdll1ext Fc,并在COS 7细胞中进行表达。方法 :从人脑cDNA文库中PCR扩增人delta like1胞外段 ,通过DNA重组构建真核表达载体 pEF BOSne... 目的 :构建人dll1ext(humandelta like1extracellularregion) Fc融合蛋白的真核表达载体pEF BOSneo hdll1ext Fc,并在COS 7细胞中进行表达。方法 :从人脑cDNA文库中PCR扩增人delta like1胞外段 ,通过DNA重组构建真核表达载体 pEF BOSneo hdll1ext Fc。瞬时转染COS 7细胞 ,应用RT PCR、细胞免疫荧光技术和双抗体夹心ELISA ,检测融合蛋白的表达。结果 :成功地构建了真核表达载体 pEF BOSneo hdll1ext Fc。以重组载体转染COS 7细胞后 ,RT PCR结果显示delta like1胞外段与IgG1Fc在mRNA水平正确拼接 ;细胞免疫荧光染色呈阳性反应 ;夹心ELISA法检测到细胞培养上清中有融合蛋白的表达。结论 :成功地扩增了人delta like1胞外段 ,构建了 pEF BOSneo hdll1ext Fc真核表达载体 ,并在COS 7细胞中获得表达 。 展开更多

关键词 delta-likel 融合蛋白 基因克隆 真核表达

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异基因造血干细胞移植后血浆microRNA的表达与急性移植物抗宿主病的相关性研究 被引量：2

12

作者 胡彬 付伟 +7 位作者 黄斯勇 高晓彤 李丹慧 严学倩 张阳萍 刘强 刘利 梁英民 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期827-832,共6页

目的:探讨血浆microRNA(miRNA)在异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后发生急性移植物抗宿主病(aGVHD)与未发生a GVHD(non-a GVHD)患者的表达情况。方法:采用实时定量PCR(real-time PCR)的方法检测25例患者allo-HSCT移植前和移植后外周血... 目的:探讨血浆microRNA(miRNA)在异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后发生急性移植物抗宿主病(aGVHD)与未发生a GVHD(non-a GVHD)患者的表达情况。方法:采用实时定量PCR(real-time PCR)的方法检测25例患者allo-HSCT移植前和移植后外周血血浆中miR-423,miR199a-3p,miR-93*和miR-377的表达水平。结果:miR-423,miR199a-3p,miR-93*在a GVHD患者中的表达量较未发生a GVHD的患者高(P<0.05),而miR-377在两组之间表达无统计学差异(P=0.0818)。结论:异基因造血干细胞移植后发生a GVHD患者的血浆中miR-423,miR199a-3p,miR-93*表达增高,这可作为为监测和诊断a GVHD的生物标志物。 展开更多

关键词 miR-423 miR199a-3p miR-93* 异基因造血干细胞移植 急性移植物抗宿主病

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7例格列卫联合非清髓造血干细胞移植治疗加速期、急变期CML的临床观察 被引量：2

13

作者 刘利 刘强 +4 位作者 陈任安 何华 蒋姗姗 杜娟 梁英民 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2006年第17期1008-1011,共4页

目的:探讨非清髓造血干细胞移植联合格列卫在治疗慢性粒细胞性白血病(CML)中的作用。方法:7例CML患者(4例为AP,3例为BP),移植前、后口服格列卫(400～1500mg/d)治疗,预处理方案为福达华氟达拉宾、环磷酰胺和阿糖胞苷联合ATG和(或)CD3单... 目的:探讨非清髓造血干细胞移植联合格列卫在治疗慢性粒细胞性白血病(CML)中的作用。方法:7例CML患者(4例为AP,3例为BP),移植前、后口服格列卫(400～1500mg/d)治疗,预处理方案为福达华氟达拉宾、环磷酰胺和阿糖胞苷联合ATG和(或)CD3单抗。供者HLA配型2例完全相合,2例一个位点不相合,1例3个位点不相合的同胞及2例半匹配的母亲供者,干细胞来源为G-CSF动员的外周血造血干细胞(PBSC),GVHD预防以环孢菌素A和骁悉为主,部分病例加用MTX、CD3单抗及CD25单抗(塞尼派)。结果:7例患者均获得不同程度的嵌合状态,3例获得完全嵌合(FC>95%),4例获得44%～95%的混合嵌合,经调整免疫抑制剂、供者淋巴细胞/PBSC输注,格列卫治疗后,2例患者在移植后1.5～10个月转变为完全嵌合。移植后中性粒细胞>0.5×109/L天数,16d(范围10～21d);血小板大于20×109/L天数,10d(范围4～15d)。移植期间1例患者移植后45天因肠道感染,颅内出血死亡。另1例患者移植后27天因多脏器衰竭死亡。5例患者随访7～23个月,3例发生Ⅰ～ⅡGVHD,2例发生Ⅲ～ⅣGVHD,1例因cGVHD死于感染,余4例仍生存,平均无病生存12.2个月(7～17个月),Bcr/abl转阴时间33～130天,巡访期间无1例复发。结论:非清髓造血干细胞移植前、后联合格列卫治疗CML,具有降低移植前白血病细胞负荷,抑制残留白血病细胞增殖,促进供者完全嵌合状态的转变,增强GVL效应的作用,是一种安全有效的治疗方法,值得进一步临床研究。 展开更多

关键词 非清髓 格列卫 造血干细胞移植 慢性粒细胞性白血病

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自体外周血干细胞移植治疗非霍奇金淋巴瘤的外周血干细胞动员方案临床分析 被引量：2

14

作者 黄斯勇 刘利 +8 位作者 郝淼旺 尹郸丹 伍艳兰 陈任安 李国辉 刘强 王锦程 何华 梁英民 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2011年第6期1415-1418,共4页

本研究比较CEP+G-CSF与CVP+G-CSF动员方案对非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者外周血造血干细胞动员采集及造血恢复的效果。回顾性分析我科收治的57例NHL患者。分组采用CEP+G-CSF与CVP+G-CSF动员方案进行外周血干细胞动员采集,并于预处理结束后... 本研究比较CEP+G-CSF与CVP+G-CSF动员方案对非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者外周血造血干细胞动员采集及造血恢复的效果。回顾性分析我科收治的57例NHL患者。分组采用CEP+G-CSF与CVP+G-CSF动员方案进行外周血干细胞动员采集,并于预处理结束后回输外周血干细胞,分析动员效果、不良反应及自身移植后造血恢复情况。结果表明:动员期间所有患者外周血白细胞(WBC)计数均降至1.0×109/L以下,血小板(Plt)数降至40×109/L以下。57例患者均采集成功,CEP+G-CSF动员方案组采集单个核细胞(MNC)数和CD34+细胞数明显高于CVP+G-CSF动员方案组(p=0.002和p=0.019)。预处理后所有病例均达到骨髓抑制,CEP+G-CSF和CVP+G-CSF动员方案组WBC数恢复到≥1.0×109/L的平均时间分别为11.4和12.3天(p﹥0.05),Plt数恢复到≥50×109/L的平均时间分别为18.6和19.3天(p﹥0.05)。结论:自体外周血干细胞移植治疗NHL疗效显著,CEP或CVP联合G-CSF方案行外周血干细胞动员均安全有效,临床效果满意,CEP+G-CSF方案动员外周血干细胞效果更好。 展开更多

关键词 非霍奇金淋巴瘤 自体外周血干细胞移植 化学治疗 外周血干细胞动员

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SCL-tTA/BCR-ABL转基因慢性髓系白血病小鼠模型的建立及鉴定 被引量：3

15

作者 林燕 付伟 梁英民 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期24-29,共6页

目的:建立能由Tet-off调控的慢性髓系白血病(chronic myeloid leukemia,CML)动物模型,为深入研究CML的发病机制、寻找治疗新方法提供实验工具。方法:通过撤除饮水中的DOX以诱导SCL-tTA/BCR-ABL双转基因小鼠的BCR-ABL在造血干/祖细胞的表... 目的:建立能由Tet-off调控的慢性髓系白血病(chronic myeloid leukemia,CML)动物模型,为深入研究CML的发病机制、寻找治疗新方法提供实验工具。方法:通过撤除饮水中的DOX以诱导SCL-tTA/BCR-ABL双转基因小鼠的BCR-ABL在造血干/祖细胞的表达;鉴定小鼠基因型正确后检测小鼠外周血象及脾脏指数,并利用流式细胞术观察小鼠骨髓、脾脏及外周血中各系细胞的分布水平。结果:BCR-ABL实验组小鼠血象中可检测到粒细胞增多,脾脏指数明显升高;且这些双转基因小鼠的骨髓、脾脏及外周血中均可检测到髓系细胞(Gr-1^+Mac-1^+)扩增,以及T系细胞(CD3^+)、B系细胞(B220^+)的减少。结论:通过Tet-off诱导表达系统成功诱导双转基因小鼠BCR-ABL的表达,成功建立了类似于人类CM L慢性期的疾病模型。 展开更多

关键词 慢性髓系白血病 SCL-tTA/BCR-ABL双转基因 动物模型 Tet-off诱导表达系统

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抗PTD-bcr/abl单克隆抗体的制备及鉴定 被引量：2

16

作者 陈任安 刘利 +1 位作者 蒋姗姗 梁英民 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期488-490,共3页

目的:制备单克隆抗体(mAb)并初步用于PTD-bcr/abl融合蛋白的研究,为慢性粒细胞白血病的免疫治疗提供实验依据。方法:在大肠杆菌中表达PTD-bcr/abl融合蛋白,用所获得的蛋白免疫BALB/c小鼠,常规收集小鼠脾细胞与Sp2/0细胞融合,筛选杂交瘤... 目的:制备单克隆抗体(mAb)并初步用于PTD-bcr/abl融合蛋白的研究,为慢性粒细胞白血病的免疫治疗提供实验依据。方法:在大肠杆菌中表达PTD-bcr/abl融合蛋白,用所获得的蛋白免疫BALB/c小鼠,常规收集小鼠脾细胞与Sp2/0细胞融合,筛选杂交瘤细胞株的阳性克隆,并对其进行一系列鉴定。结果:(1)表达PTD-bcr/abl融合蛋白;(2)制备了抗PTD-bcr/abl融合蛋白mAb;(3)用mAb以多种方法检测PTD-bcr/abl融合蛋白,证实此抗体效价高,特异性强。结论:此抗体可用于PTD-bcr/abl融合蛋白的进一步研究。 展开更多

关键词 PTD-bcr/abl融合蛋白 单克隆抗体 制备

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融合蛋白hJagged1^(ext)-Fc毕赤酵母表达载体的构建及表达 被引量：1

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作者 李国辉 康志杰 +8 位作者 黄斯勇 何飞 徐恒 张丽 伍艳兰 牛晓丽 马长升 韩骅 梁英民 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第4期910-914,共5页

本研究旨在构建人IgG1 Fc蛋白及融合蛋白hJagged1ext-Fc,并在毕赤酵母GS115中表达。用RT-PCR法从人骨髓细胞中扩增hJagged1基因的胞外段。在测序正确后,将hJagged1基因的胞外段插入构建好的PIC-Fc载体,得到PIC-hJagged1ext-Fc。用MD平... 本研究旨在构建人IgG1 Fc蛋白及融合蛋白hJagged1ext-Fc,并在毕赤酵母GS115中表达。用RT-PCR法从人骨髓细胞中扩增hJagged1基因的胞外段。在测序正确后,将hJagged1基因的胞外段插入构建好的PIC-Fc载体,得到PIC-hJagged1ext-Fc。用MD平板筛选重组子,G418法筛选高拷贝转化子,经甲醇诱导表达后,采用SDS-PAGE分析表达蛋白。结果表明:hJagged1基因的胞外段被有效地扩增。序列分析显示所构建的含phJagged1ext-Fc融合基因的质粒与设计相同,人IgG1 Fc蛋白及融合蛋白hJagged1ext-Fc得到正确表达。结论:成功地构建了hJagged1ext-Fc融合基因的毕赤酵母表达载体,并在毕赤酵母中正确表达,为进一步研究Jagged1在造血干/祖细胞的体外扩增奠定了基础。 展开更多

关键词 JAGGED1 hJagged1^ext-Fc 造血干/祖细胞 NOTCH 融合蛋白 毕赤酵母

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TAT蛋白转导域介导BCR/ABL融合蛋白通过小鼠血脑屏障的作用 被引量：1

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作者 梁英民 蒋姗姗 +6 位作者 韩骅 孙强 刘利 郝淼旺 邓中荣 陈任安 刘强 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期244-247,共4页

目的　探讨HIV - 1反式激活蛋白 (TAT)的蛋白转导结构域 (PTD)介导的BCR/ABL(TATPTD -BCR/ABL)融合蛋白通过血脑屏障的作用。方法　在大肠杆菌中表达PTD -BCR/ABL融合蛋白。将经Ni-NTA树脂亲和层析纯化的融合蛋白 ,经尾静脉注射小鼠体... 目的　探讨HIV - 1反式激活蛋白 (TAT)的蛋白转导结构域 (PTD)介导的BCR/ABL(TATPTD -BCR/ABL)融合蛋白通过血脑屏障的作用。方法　在大肠杆菌中表达PTD -BCR/ABL融合蛋白。将经Ni-NTA树脂亲和层析纯化的融合蛋白 ,经尾静脉注射小鼠体内 ,用免疫组织化学染色法 ,对小鼠脑组织细胞内的PTD -BCR/ABL融合蛋白进行检测。结果　①表达和纯化了相对分子质量 (Mr)为 2 3× 10 3 的PTD -BCR/ABL融合蛋白 ;②将其经静脉注射到小鼠体内 ,在小鼠脑组织细胞中可检测到PTD -BCR/ABL融合蛋白。结论　PTD可在体内介导较大Mr的融合蛋白通过血脑屏障 。 展开更多

关键词 蛋白转导 融合蛋白 血脑屏障 小鼠

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克拉屈滨诱导人骨髓瘤细胞RPMI 8226凋亡的机制研究 被引量：1

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作者 周柰岑 齐美颖 +2 位作者 刘保兰 徐波 刘心 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1644-1648,共5页

本研究探讨克拉屈滨(2-Cd A)诱导人多发性骨髓瘤细胞RPMI 8226凋亡及其作用机制。应用MTT检测不同浓度克拉屈滨作用不同时间后的细胞增殖抑制率;透射电子显微镜观察药物干预后细胞的超微结构变化,而细胞凋亡率及细胞周期分布则应用流式... 本研究探讨克拉屈滨(2-Cd A)诱导人多发性骨髓瘤细胞RPMI 8226凋亡及其作用机制。应用MTT检测不同浓度克拉屈滨作用不同时间后的细胞增殖抑制率;透射电子显微镜观察药物干预后细胞的超微结构变化,而细胞凋亡率及细胞周期分布则应用流式细胞术检测。半定量RT-PCR和Western-blot分别检测BCL-2、MCL-1和caspase-3 mRNA和蛋白的表达量变化情况。结果表明:一定浓度范围内克拉屈滨能够抑制骨髓瘤细胞增殖并呈时间-浓度依赖性;在透射电镜下可观察到凋亡小体等典型凋亡表现;流式细胞术检测显示克拉屈滨诱导RPMI8226细胞凋亡并将细胞阻滞于G2/M期。Western检测结果与PCR结果一致,BCL-2和M CL-1表达量下降,而caspase-3变化不明显。结论:克拉屈滨可抑制骨髓瘤RPM I 8226细胞增殖并诱导其凋亡,其机制可能与激活线粒体和死亡受体凋亡途径有关,细胞周期阻滞在其中也起到重要作用。 展开更多

关键词 多发性骨髓瘤 克拉屈滨 细胞凋亡 CASPASE BCL-2

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抗PTD-bcr/abl多克隆抗体的制备及鉴定 被引量：1

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作者 陈任安 梁英民 +1 位作者 吴绒丽 蒋姗姗 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期241-243,共3页

目的　制备多克隆抗体并初步用于PTD -bcr/abl融合蛋白的研究 ,为慢性粒细胞白血病的免疫治疗提供实验依据。方法　在大肠杆菌中表达PTD -bcr/abl融合蛋白 ,用所获得的蛋白免疫家兔得到多克隆抗体 ,并用免疫组化染色 ,Western -blot等... 目的　制备多克隆抗体并初步用于PTD -bcr/abl融合蛋白的研究 ,为慢性粒细胞白血病的免疫治疗提供实验依据。方法　在大肠杆菌中表达PTD -bcr/abl融合蛋白 ,用所获得的蛋白免疫家兔得到多克隆抗体 ,并用免疫组化染色 ,Western -blot等方法进行此抗体的鉴定。结果　①表达PTD -bcr/abl融合蛋白。②制备了抗PTD -bcr/abl融合蛋白多克隆抗体。③并用多克隆抗体以多种方法 ,检测PTD-bcr/abl融合蛋白 ,证实此抗体效价高、特异性强。结论　此抗体可用于PTD 展开更多

关键词 PTD-bcr/abl融合蛋白 多克隆抗体 制备 鉴定

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