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miR-194慢病毒表达质粒的构建及对人骨肉瘤细胞系U2-OS转移的相关研究
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作者 韩康 赵廷宝 +9 位作者 卞娜 蔡成魁 颜世举 王鑫 马琼 沙浩 董川 杨彤涛 周勇 马保安 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期753-757,共5页
目的:通过构建携带针对miR-194的慢病毒沉默及过表达载体,研究miR-194对骨肉瘤细胞转移的影响。方法:以miR-194前体及成熟体序列为模板,设计引物,进行PCR扩增,酶切后克隆于慢病毒载体plent-i GFP中,转染293T细胞,包装慢病毒颗粒,检测滴... 目的:通过构建携带针对miR-194的慢病毒沉默及过表达载体,研究miR-194对骨肉瘤细胞转移的影响。方法:以miR-194前体及成熟体序列为模板,设计引物,进行PCR扩增,酶切后克隆于慢病毒载体plent-i GFP中,转染293T细胞,包装慢病毒颗粒,检测滴度,最终对人骨肉瘤细胞系U2-OS进行感染。获取稳定感染细胞后,进行Transwell、划痕等实验。结果:1)慢病毒表达质粒构建成功,沉默表达及过表达重组慢病毒的滴度分别为4×108TU/mL及1.5×108TU/mL;2)稳定过表达miR-194的人骨肉瘤细胞系U2-OS的转移能力较其他组有明显降低(P<0.01)。结论:成功构建了miR-194慢病毒表达载体,miR-194的表达水平对U2-OS细胞的转移能力具有显著影响,miR-194可能成为骨肉瘤治疗的潜在新靶点。 展开更多
关键词 骨肉瘤 miR-194 慢病毒 成骨肉瘤细胞系U2-OS 转移
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microRNA-192抑制物对骨肉瘤细胞系SOSP_9607增殖和凋亡的影响 被引量:5
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作者 赵广义 赵健 +5 位作者 李伟 高杰 杨彤涛 裘秀春 范清宇 马保安 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期365-368,共4页
目的:探讨miR-192抑制物对于骨肉瘤细胞系SOSP_9607细胞增殖和凋亡的影响。方法:四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖抑制率,流式细胞仪测定细胞凋亡和周期。将SOSP_9607细胞分为对照组和实验组,对照组分为阴性对照和正常细胞对照组。实... 目的:探讨miR-192抑制物对于骨肉瘤细胞系SOSP_9607细胞增殖和凋亡的影响。方法:四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖抑制率,流式细胞仪测定细胞凋亡和周期。将SOSP_9607细胞分为对照组和实验组,对照组分为阴性对照和正常细胞对照组。实验组采用miR-192抑制物(hsa-miR-192inhibitors)抑制SOSP_9607细胞内miR-192的活性。结果:与对照组相比,实验组显著抑制SOSP_9607细胞的增殖,有明显的剂量依赖性(P<0.01)。随着浓度从50nmol/L逐渐增加至200nmol/L,抑制率逐渐增高(P<0.01)。与对照组相比,实验组细胞周期G_0/G_1细胞比例显著增加,G_2/M期细胞比例显著减少,S期细胞比例显著减少(P<0.01)。实验组凋亡率(13.6±2.1)%与阴性对照组凋亡率(7.1±0.5)%相比明显增高(P<0.01)。结论:miR-192抑制物通过抑制SOSP_9607细胞中miR-192的活性对SOSP_9607细胞的增殖和凋亡发挥重要作用,可能成为骨肉瘤生物治疗的新靶点。 展开更多
关键词 骨肉瘤 成骨肉瘤细胞系SOSP_9607 miRNA-192 细胞增殖 细胞凋亡
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异体脱钙骨基质骨粒复合骨水泥的临床应用及其配合
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作者 折燕玲 李红 陈艳 《护理学杂志(综合版)》 2003年第2期105-106,共2页
随着骨肿瘤保肢技术的不断提高,处理肿瘤术后骨缺损以防病理性骨折的发生已越来越受到重视.为使骨缺损修复材料既具有较好的生物力学性能及组织相容性,又具备骨诱导和骨引导能力,我院骨肿瘤研究所经过大量的实验研究,将异体脱钙骨基质骨... 随着骨肿瘤保肢技术的不断提高,处理肿瘤术后骨缺损以防病理性骨折的发生已越来越受到重视.为使骨缺损修复材料既具有较好的生物力学性能及组织相容性,又具备骨诱导和骨引导能力,我院骨肿瘤研究所经过大量的实验研究,将异体脱钙骨基质骨粒(decalcified bone matrix,DBM)和骨水泥(bone cement,BC)复合制成生物性骨缺损修复材料,用于骨缺损修复重建.经过临床应用发现,病理性骨折及并发症极少发生,而且异体脱钙骨基质骨粒复合骨水泥材料具有结构合理及良好的赋行性和组织相容性,制备简单,成本较低等优点,可为修复部位提供较为坚固的生物力学支持,是进行骨缺损修复的可行途径[1,2]. 展开更多
关键词 临床应用 骨肿瘤 骨缺损 脱钙骨基质骨粒 骨水泥 骨组织工程
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敲低趋化因子受体7(CCR7)抑制MG63骨肉瘤细胞的增殖和侵袭并诱导其凋亡 被引量:1
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作者 章日春 张弘韬 +4 位作者 鄂震 马琼 颜世举 张恩尉 马保安 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1585-1589,共5页
目的研究小干扰RNA(siRNA)靶向抑制趋化因子受体7(CCR7)表达对MG63人骨肉瘤细胞增殖、侵袭及凋亡的影响。方法设计并合成靶向抑制CCR7表达的siRNA,转入MG63细胞后,采用Western blot法检测CCR7蛋白水平,异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘... 目的研究小干扰RNA(siRNA)靶向抑制趋化因子受体7(CCR7)表达对MG63人骨肉瘤细胞增殖、侵袭及凋亡的影响。方法设计并合成靶向抑制CCR7表达的siRNA,转入MG63细胞后,采用Western blot法检测CCR7蛋白水平,异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测细胞凋亡,MTT法检测细胞增殖,TranswellTM侵袭和迁移实验检测细胞侵袭和迁移能力。结果 MG63细胞转染CCR7-siRNA后,细胞CCR7表达明显下调;同时细胞增殖明显减弱,侵袭和迁移能力明显下降,且细胞凋亡率升高。结论下调MG63骨肉瘤细胞的CCR7,可明显抑制细胞增殖、侵袭和迁移,并能诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 骨肉瘤细胞 小干扰RNA(siRNA) 趋化因子受体7(CCR7) 细胞增殖 细胞侵袭 细胞凋亡
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