非小细胞肺癌患者高温射频治疗前、后免疫功能的变化 被引量：13

1

作者 张卫强 程庆书 +3 位作者 王云杰 刘锟 殷缨 付勇 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期144-145,148,共3页

目的研究非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）患者高温射频（ＲＦＡ）治疗前、后机体免疫功能的变化。方法　ＣＴ引导下经皮肺穿刺可伸展锚状电极配合ＲＦ－２０００射频治疗仪高温射频消融，治疗ＮＳＣＬＣ患者３０例。采用流式细胞术及双抗体... 目的研究非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）患者高温射频（ＲＦＡ）治疗前、后机体免疫功能的变化。方法　ＣＴ引导下经皮肺穿刺可伸展锚状电极配合ＲＦ－２０００射频治疗仪高温射频消融，治疗ＮＳＣＬＣ患者３０例。采用流式细胞术及双抗体夹心法，检测治疗前、后外周血Ｔ细胞亚群（ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋）、ＮＫ细胞的百分率及ｓＩＬ－２Ｒ含量的变化。采用ＬＤＨ释放法检测ＮＫ细胞的杀伤活性。结果治疗前ＮＳＣＬＣ患者外周血中ＣＤ３＋、ＣＤ４＋细胞的百分率及ＣＤ４＋／　ＣＤ８＋细胞的比值降低，ＮＫ细胞的百分率和ＮＫ细胞杀伤活性亦降低，与对照组相比较差异显著　（Ｐ＜０．０１）。ＣＤ８＋细胞的百分率及ｓＩＬ－２Ｒ含量明显高于正常对照组（Ｐ＜０．０１），提示患者处于免疫抑制状态。治疗后免疫抑制减轻，ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、ＮＫ细胞的百分率及ＣＤ４＋／ＣＤ８＋细胞的比值明显升高，ＮＫ细胞杀伤活性也升高，而ＣＤ８＋细胞的百分率及ｓＩＬ－２Ｒ的含量明显降低，治疗前、后相比较差别明显　（Ｐ＜０．０１）。结论　锚状电极高温射频消融具有免疫激活作用，可使机体的免疫功能得到一定程度的改善。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 锚状电极 高温射频消融 T细胞亚群 NK细胞 NK细胞杀伤活性 治疗 免疫功能

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皮肤病患者IL-2R、T细胞亚群及红细胞免疫功能的测定及分析 被引量：11

2

作者 余春艳 张立朝 +1 位作者 顾群 陶秦瑜 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期195-196,共2页

目的研究某些皮肤病中细胞免疫功能改变情况。方法采用双抗体夹心ELISA法检测血清可溶性白细胞介素2受体SIL2R,流式细胞仪测定外周血T淋巴细胞亚群D3+、CD4+、CD8+,及红细胞C3b受体花环RBCC3bRR和红细胞免疫复合物花环RBCICR试验... 目的研究某些皮肤病中细胞免疫功能改变情况。方法采用双抗体夹心ELISA法检测血清可溶性白细胞介素2受体SIL2R,流式细胞仪测定外周血T淋巴细胞亚群D3+、CD4+、CD8+,及红细胞C3b受体花环RBCC3bRR和红细胞免疫复合物花环RBCICR试验。结果皮肤病组SIL2R明显高于正常组P0.01,T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+与正常组比较明显降低P0.01,CD4+/CD8+与正常组比较降低P0.05,RBCC3bRR较正常组明显降低P0.01,RBCICR与正常组比较明显增高P0.01。结论某些皮肤病中存在细胞免疫功能改变。 展开更多

关键词 皮肤病 白细胞介素2受体 T细胞亚群 红细胞免疫

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恶性肿瘤和带状疱疹患者红细胞的免疫功能 被引量：11

3

作者 余春艳 张立朝 +1 位作者 顾群 陶秦瑜 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 2000年第1期69-69,共1页

关键词 恶性肿瘤 带状疱疹 红细胞免疫

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窒息对新生鼠红细胞免疫功能和LPO的影响 被引量：9

4

作者 王玲 王为农 +1 位作者 陶秦渝 鱼绥和 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 2000年第4期300-300,共1页

关键词 新生儿窒息 红细胞免疫功能 脂质过氧化

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人源性羧肽酶A突变体基因的构建及表达 被引量：3

5

作者 董轲 郝晓柯 +2 位作者 刘新平 张盈华 季少平 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期106-108,122,共4页

目的从人正常肺组织中提取羧肽酶A基因并进行定点突变。方法从人正常肺组织中提取RNA,并进行逆转录得到人羧肽酶AhCPA。以计算机模拟hCPA的结构,寻找合适的突变位点。用PCR重叠延伸法,对羧肽酶A进行定点突变并在大肠杆菌中表达。结果序... 目的从人正常肺组织中提取羧肽酶A基因并进行定点突变。方法从人正常肺组织中提取RNA,并进行逆转录得到人羧肽酶AhCPA。以计算机模拟hCPA的结构,寻找合适的突变位点。用PCR重叠延伸法,对羧肽酶A进行定点突变并在大肠杆菌中表达。结果序列分析表明,所获hCPA的核苷酸序列为1251bp,编码417个氨基酸。hCPA突变体mhCPA基因的1126位核苷酸由G变为A,其余核苷酸序列均未发生变化,相应的此突变体蛋白质的376位核苷酸残基由丙氨酸突变为苏氨酸。将mhC-PA基因在E.coli中诱导表达3h后表达量高达30%左右。结论成功地构建并表达了mhCPA基因,为hCPA在肿瘤的“抗体导向酶前药疗法”ADEPT中的应用奠定了基础。 展开更多

关键词 人源性羧肽酸A 基因突变 基因克隆 基因表达

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miR-141-3p靶向调控前列腺癌LNCaP细胞雄激素受体的表达 被引量：3

6

作者 王琛 欧阳永日 +2 位作者 路蔓 卫军霞 张惠中 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期736-739,共4页

目的检测LNCa P细胞内miR-141-3p对雄激素受体(AR)基因靶向调控作用,明确AR是否为miR-141-3p的靶基因。方法将miR-141-3p mimics转染LNCa P细胞后,利用反转录PCR和Western blot法分别检测LNCa P细胞中AR的mRNA和蛋白表达。采用PCR方法... 目的检测LNCa P细胞内miR-141-3p对雄激素受体(AR)基因靶向调控作用,明确AR是否为miR-141-3p的靶基因。方法将miR-141-3p mimics转染LNCa P细胞后,利用反转录PCR和Western blot法分别检测LNCa P细胞中AR的mRNA和蛋白表达。采用PCR方法扩增得到含有miR-141-3p结合位点的AR mRNA 3'非翻译区(3'UTR)片段,并插入到pmiR-report载体萤光素酶基因的3'下游区,并将所构建载体命名为pmiR-AR-3'UTR;萤光素酶报告基因检测试剂盒检测miR-141-3p对pmiR-AR-3'UTR靶向抑制效果。结果转染miR-141-3p mimics可降低LNCa P细胞内源AR的mRNA和蛋白水平;萤光素酶活性检测结果显示:与对照组相比,miR-141-3p可明显抑制pmiR-AR-3'UTR萤光素酶活性。结论 AR是miR-141-3p的靶基因。 展开更多

关键词 前列腺癌 雄激素受体 miR-141-3p

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截短型转位肽重组抗体/颗粒酶B基因的构建及表达 被引量：2

7

作者 张莉 赵晶 +4 位作者 王智 温伟红 张盈华 王成济 杨安钢 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期434-436,共3页

目的 :构建携带截短型转位肽重组抗体 /颗粒酶B基因的真核表达载体 ,并将其在HER2阳性SKBR 3肿瘤细胞及HER2阴性Hela肿瘤细胞中表达。方法 :用PCR法获得截短型转位肽重组抗体 /颗粒酶B基因片段 ,并克隆构建真核表达载体 ,以脂质体法转染... 目的 :构建携带截短型转位肽重组抗体 /颗粒酶B基因的真核表达载体 ,并将其在HER2阳性SKBR 3肿瘤细胞及HER2阴性Hela肿瘤细胞中表达。方法 :用PCR法获得截短型转位肽重组抗体 /颗粒酶B基因片段 ,并克隆构建真核表达载体 ,以脂质体法转染SKBR 3细胞及Hela细胞 ,用免疫细胞化学染色检测其在不同细胞中的表达及对细胞形态的影响。结果 :成功构建了编码截短型转位肽重组抗体 /颗粒酶B基因的真核表达载体pCMV e2 3sFv FSD GrB ,用免疫细胞化学检测发现 ,绝大多数Hela细胞可高表达e2 3sFv FSD GrB蛋白 ,且细胞形态正常 ,而表达e2 3sFv FSD GrB蛋白的SKBR 3细胞形态发生变化 ,出现固缩细胞。结论 :截短型转位肽重组抗体 /颗粒酶B基因真核表达体系的建立 ,为确定PE转位肽的最小转位功能区段奠定了基础。 展开更多

关键词 绿脓杆菌外毒素转位肽 颗粒酶B 截短型转位肽重组抗体 基因表达 基因构建

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大鼠CD40基因RNA干扰真核表达载体的构建及鉴定 被引量：2

8

作者 王楠 马庆久 +3 位作者 鲁建国 何显力 邹爱民 李坤 《医学研究生学报》 CAS 2008年第3期259-262,I0003,共5页

目的:构建靶向大鼠CD40基因小分子干扰RNA(siRNA)真核细胞表达载体。方法:利用Ambion公司的网上设计工具,设计2个靶向CD40基因的发夹状siRNA,通过化学合成的方法合成2对分别互补的寡核苷酸链,退火后将双链DNA片段连接至pSilencer4.1-CMV... 目的:构建靶向大鼠CD40基因小分子干扰RNA(siRNA)真核细胞表达载体。方法:利用Ambion公司的网上设计工具,设计2个靶向CD40基因的发夹状siRNA,通过化学合成的方法合成2对分别互补的寡核苷酸链,退火后将双链DNA片段连接至pSilencer4.1-CMV neo vector的多克隆位点,转化扩增提取质粒,对重组质粒进行BamHⅠ和HindⅢ双酶切电泳鉴定和DNA序列分析鉴定。结果:经酶切电泳鉴定和DNA序列分析鉴定,目的片段与pSilencer4.1-CMV neo vector连接正确,靶向大鼠CD40基因的siRNA重组表达质粒构建成功。结论:成功构建了大鼠CD40基因的RNA干扰真核表达载体pSilencer4.1-CMV-CD40.1和pSilencer4.1-CMV-CD40.2,为进一步研究CD40基因在同种器官移植排斥反应中的作用奠定基础。 展开更多

关键词 RNA干扰 CD40 重组载体

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重组TRAIL基因真核表达载体的构建及其诱导喉癌细胞株Hep2凋亡的效应 被引量：1

9

作者 陈剑秋 成诗银 +2 位作者 张惠中 韩明坤 张丽 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期229-232,共4页

　目的: 研究TRAIL基因结合端粒酶启动子特异性靶向治疗的作用。方法: 利用已有编码凋亡诱导功能区的TRAILcDNA片断的表达载体pRNDE2 -1和IL- 2信号肽基因序列, 扩增IL- 2信号肽基因和TRAIL基因的融合基因, 并克隆入真核表达载体pGL3 18... 　目的: 研究TRAIL基因结合端粒酶启动子特异性靶向治疗的作用。方法: 利用已有编码凋亡诱导功能区的TRAILcDNA片断的表达载体pRNDE2 -1和IL- 2信号肽基因序列, 扩增IL- 2信号肽基因和TRAIL基因的融合基因, 并克隆入真核表达载体pGL3 181hTERT肿瘤特异性端粒酶启动子的下游, 构建TRAIL基因的重组真核表达载体pGL3 181hTERT/TRAIL。将该重组载体经阳离子脂质体转染入人喉癌细胞株Hep2中, 以台盼蓝拒染法和基因组DNA琼脂糖凝胶电泳, 观察转染的Hep2细胞的凋亡。结果: 构建了肿瘤人可溶性TRAIL基因的重组真核表达载体pGL3 181hTERT/TRAIL, 其表达产物能诱导喉癌细胞Hep2凋亡。结论: 成功地构建了重组真核表达载体pGL3 181hTERT/TRAIL, 为肿瘤的基因靶向治疗提供了可能性。 展开更多

关键词 TRAIL 端粒酶启动子 分泌表达 凋亡 基因治疗

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带状疱疹患者可溶性IL-2R和T细胞亚群的变化 被引量：1

10

作者 余春艳 张盈华 +2 位作者 张立朝 顾群 陶秦瑜 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 2000年第2期146-146,共1页

关键词 带状疱疹 SIL-2R T细胞亚群

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恶性骨肿瘤患者T细胞亚群、红细胞免疫功能与Ag—NORs定量分析的关系及临床意义 被引量：1

11

作者 许丽艳 齐继峰 等 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 2000年第6期519-520,共2页

目的 定量分析恶性骨肿瘤患者T细胞亚群、红细胞免疫功能及核仁组成区相关嗜银蛋白（Ag-NORs)的关系及其临床意义。方法 采用单克隆抗体直接免疫荧光法、红细胞花环试验及肿瘤免疫图像分析方法，分别对23例骨肿瘤患者和20例正常人（... 目的 定量分析恶性骨肿瘤患者T细胞亚群、红细胞免疫功能及核仁组成区相关嗜银蛋白（Ag-NORs)的关系及其临床意义。方法 采用单克隆抗体直接免疫荧光法、红细胞花环试验及肿瘤免疫图像分析方法，分别对23例骨肿瘤患者和20例正常人（对照组）的外周血T细胞亚群、红细胞免疫功能及核仁银染区面积／细胞核面积比值（I．S％）进行分析。 结果 患者CD3^+`CD4^+,T细胞及CD4^+`/CD8^+比值以及E－C3bRR和I．S%值均明显降低，CD8^+及E－ICR明显升高，与对照组相比较差异显著（P＜0．01）。结论 上述结果显示，恶性骨肿瘤患者免疫功能低下；Ag-NORs的检测与T细胞亚群、红细胞免疫功能的检测，能较全面地反映肿瘤患者的免疫功能状态，并可指导临床治疗。 展开更多

关键词 骨肿瘤 T淋巴细胞亚群 红细胞 Ag-NORs定量分析

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大鼠补体调节因子DAF功能区的表达纯化及功能鉴定

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作者 徐江 张惠中 +4 位作者 林芳 刘丽 王燕 任继鸿 李柱一 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期533-535,共3页

目的:重组表达促衰变因子(DAF)功能区的4个短的保守重复序列(SCR1-4)。方法:通过克隆大鼠DAF的SCR1-4并插入到原核表达载体pET32a(+),IPTG诱导共表达,根据表达结果选择纯化方式。结果:诱导后表达产物为不溶蛋白,通过纯化包涵体并复性,... 目的:重组表达促衰变因子(DAF)功能区的4个短的保守重复序列(SCR1-4)。方法:通过克隆大鼠DAF的SCR1-4并插入到原核表达载体pET32a(+),IPTG诱导共表达,根据表达结果选择纯化方式。结果:诱导后表达产物为不溶蛋白,通过纯化包涵体并复性,得到了具有抑制致敏绵羊红细胞发生溶血的可溶性蛋白成分。结论:原核表达SCR1-4易于形成包涵体,稀释复性法适用于DAFSCR1-4包涵体的复性。 展开更多

关键词 DAF 原核表达 包涵体 蛋白复性

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