人牙髓干细胞的体外培养和鉴定 被引量：19

1

作者 何飞 谭颖徽 张纲 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期75-78,共4页

目的　研究第三恒磨牙来源的人牙髓干细胞的表型和生物学性状。方法　从成人健康阻生牙中获取牙 髓,酶消化法分离获得牙髓干细胞,计算细胞克隆形成率(CFU_F);免疫组化、RT_PCR法检测细胞的表面分子表达; 流式细胞仪测定细胞周期;... 目的　研究第三恒磨牙来源的人牙髓干细胞的表型和生物学性状。方法　从成人健康阻生牙中获取牙 髓,酶消化法分离获得牙髓干细胞,计算细胞克隆形成率(CFU_F);免疫组化、RT_PCR法检测细胞的表面分子表达; 流式细胞仪测定细胞周期;体外分化诱导实验检测细胞的多向分化能力。结果　分离获得的牙髓干细胞在体外具 有一定的克隆形成能力,诱导条件下部分牙髓干细胞可向脂肪、肌细胞和成牙本质细胞方向分化,符合干细胞的特 征。结论　成功的从人第三恒磨牙牙髓中分离得到牙髓干细胞。 展开更多

关键词 第三磨牙 牙髓 干细胞

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日本齿科病医院的人性化服务及对我国医院管理的启示 被引量：2

2

作者 范晓敏 李洁 麻明歌 《解放军护理杂志》 2008年第23期73-73,77,共2页

关键词 口腔医院 人性化服务 启示

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Notch信号分子于小鼠牙髓干细胞样细胞表达的研究 被引量：5

3

作者 陆群 吴补领 +2 位作者 王冀姝 韩骅 周学东 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期54-56,共3页

目的　研究Notch基因在小鼠牙髓干细胞样细胞表达。方法　采用酶消化培养法获得小鼠的单个牙髓细胞悬液 ,调整细胞密度为 1× 10 4 个 孔细胞 ,干细胞培养液培养 14d,挑选细胞克隆扩增 ,提取细胞的总RNA ,反转录聚合酶联反应 (RT_P... 目的　研究Notch基因在小鼠牙髓干细胞样细胞表达。方法　采用酶消化培养法获得小鼠的单个牙髓细胞悬液 ,调整细胞密度为 1× 10 4 个 孔细胞 ,干细胞培养液培养 14d,挑选细胞克隆扩增 ,提取细胞的总RNA ,反转录聚合酶联反应 (RT_PCR)检测Notch基因的表达。结果　小鼠牙髓细胞呈集落状生长 ,克隆形成率约为 1 6～ 2 5个 10 4 细胞 ,所形成的集落细胞结合紧密 ,细胞胞体小、胞核大 ,RT_PCR结果显示Notch的mRNA在牙髓干细胞样细胞中有表达。结论　培养的集落状生长的小鼠牙髓细胞具有干细胞增殖快的特性 ,Notch基因于牙髓干细胞中表达 。 展开更多

关键词 Notch信号分子 小鼠 牙髓干细胞 细胞表达 牙齿发育 反转录聚合酶联反应

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转化生长因子β1对人牙本质基质蛋白1基因转录活性的影响 被引量：3

4

作者 逄键梁 吴补领 +2 位作者 张亚庆 柯杰 吴纲 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期871-875,共5页

目的:观察具有矿化活性的人牙髓干细胞(human dental pulp stem cell,HDPSC)在重组人转录生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)作用下对牙本质基质蛋白1(dentin matrix protein1,Dmp1)表达和Dmp1基因启动子转录活性的... 目的:观察具有矿化活性的人牙髓干细胞(human dental pulp stem cell,HDPSC)在重组人转录生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)作用下对牙本质基质蛋白1(dentin matrix protein1,Dmp1)表达和Dmp1基因启动子转录活性的影响。方法:通过建立体外培养的HDPSC矿化诱导模型,经10ng/L重组人TGF-β1刺激后,运用RT-PCR、报告基因检测等方法检测细胞在TGF-β1作用后Dmp1mRNA表达变化以及对pGL3-P-193～+86和pGL3-P-505～+862个启动子片段重组报告基因载体活性的影响。结果:诱导矿化后具有部分成牙本质细胞样细胞特征的HDPSC经TGF-β1刺激后,Dmp1mRNA的表达水平明显下降,并存在时间依赖性。pGL3-P-193～+86和pGL3-P-505～+86相对荧光素酶活性均下降,以pGL3-P-505～+86活性下降更明显,说明TGF-β1具有下调HDPSCDmp1转录活性的作用。计算机分析结果发现,Dmp1基因启动子-505～+86bp区存在多个TGF-β1下游作用分子Smads的结合位点。结论:TGF-β1可下调Dmp1mRNA的表达水平和转录活性,以pGL3-P-505～+86活性下降更明显。启动子-505～-193bp区存在TGF-β1下游作用分子或转录因子的结合位点,从而参与下调Dmp1转录表达过程。 展开更多

关键词 转录生长因子β1 牙本质基质蛋白1 人牙髓干细胞 报告基因 转录活性

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核心结合因子α1对人牙本质基质蛋白1基因转录活性的作用 被引量：2

5

作者 逄键梁 柯杰 +4 位作者 邓天政 朱晓茹 李晓华 张亚庆 吴补领 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期473-476,共4页

目的:观察核心结合因子α1(core binding factorα1,Cbfα1)对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,HDPSCs)牙本质基质蛋白1(dentin matrix protein 1,DMP1)基因转录活性的影响。方法:将pCMV-Osf2瞬时转染至体外矿化诱导的HDPSCs... 目的:观察核心结合因子α1(core binding factorα1,Cbfα1)对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,HDPSCs)牙本质基质蛋白1(dentin matrix protein 1,DMP1)基因转录活性的影响。方法:将pCMV-Osf2瞬时转染至体外矿化诱导的HDPSCs中,检测转染后不同时间Cbfα1蛋白的表达变化。将不同长度的DMP1基因启动子片段重组报告基因载体与pCMV-Osf2分别共转染至细胞中,报告基因检测系统检测荧光素酶活性。结果:诱导后的HDPSCs中少量表达Cbfα1,在瞬时转染Cbfα1后,蛋白主要表达于细胞胞质中,并且在转染48 h后表达量达到最高值;Cbfα1可明显增强6个不同长度的DMP1基因启动子片段重组报告基因载体的荧光素酶活性,以pGL3-P-505～+86启动子活性增强最为明显(P<0.05)。计算机分析结果发现,DMP1基因启动子-505～+86 bp区存在Cbfα1的结合位点。结论:Cbfα1可上调人DMP1基因转录活性,是HDPSCs向成牙本质细胞方向分化重要的调节因子之一,DMP1基因启动子序列-199～-185 bp区可能是Cbfα1结合位点。 展开更多

关键词 核心结合因子Α1 牙本质基质蛋白1 人牙髓干细胞 报告基因 转录活性

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人牙髓细胞与牙龈成纤维细胞差异表达基因的克隆及特征分析 被引量：1

6

作者 王忠东 吴纪楠 +7 位作者 周琳 凌均棨 郭希民 肖明振 朱峰 蒲勤 柴玉波 赵忠良 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期75-78,共4页

目的批量克隆人牙髓细胞(HDPC)与人牙龈成纤维细胞(HGF)的差异表达基因并对其特征进行分析,研究HDPC的生物学特性。方法体外培养HDPC和HGF,应用基于PCR的改良消减杂交技术构建HDPC和HGF的cDNA消减文库,批量克隆HDPC和HGF的差异表达基因... 目的批量克隆人牙髓细胞(HDPC)与人牙龈成纤维细胞(HGF)的差异表达基因并对其特征进行分析,研究HDPC的生物学特性。方法体外培养HDPC和HGF,应用基于PCR的改良消减杂交技术构建HDPC和HGF的cDNA消减文库,批量克隆HDPC和HGF的差异表达基因并测序,使用GenBank的BLAST对测序结果进行同源序列比较。结果经过序列测定,获得12个差异表达基因的序列,经BLAST分析有2个为未知基因。在已知基因中,含有4个与细胞信号转导机制相关的基因;2个与细胞转运机制相关的基因(包括细胞膜及细胞核膜转运);2个与细胞RNA剪接机制相关的基因。结论HDPC的生物学特性是由某些特定基因的差异表达所决定的,其生长、分化机制可能与相对旺盛的蛋白合成及分泌活性相关。 展开更多

关键词 牙髓细胞 牙龈成纤维细胞 差异表达 消减文库

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几种牙髓治疗药物的抗菌作用 被引量：4

7

作者 文玲英 徐修理 丁振若 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1990年第4期254-256,共3页

本研究采用多种方法检验与评价几种牙髓治疗药物的抗菌作用,结果证实FC、愈创木酚等对金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、绿脓杆菌及产黑色素类杆菌、消化链球菌的作用最有效,而2.5%戊二醛的杀菌作用远不如FC和愈创木酚,依据实验结果,本文... 本研究采用多种方法检验与评价几种牙髓治疗药物的抗菌作用,结果证实FC、愈创木酚等对金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、绿脓杆菌及产黑色素类杆菌、消化链球菌的作用最有效,而2.5%戊二醛的杀菌作用远不如FC和愈创木酚,依据实验结果,本文提出了这些药物的临床应用适宜剂量。 展开更多

关键词 牙髓治疗 抗菌作用 口腔科药

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细胞内信号转导分子——Smad7在人牙胚发育中的表达和意义 被引量：2

8

作者 包柳郁 牛忠英 +1 位作者 史俊南 汪平 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期438-440,共3页

目的　探讨Smad7在TGF_β调节牙胚发育过程中的作用。方法　采用免疫组化ABC法观察Smad7在人牙胚发育各个时期的表达分布及其变化情况。结果　人牙胚发育各个时期均表达Smad7,但各期分布模式有所不同。Smad7在不同发育时期牙胚中的分布... 目的　探讨Smad7在TGF_β调节牙胚发育过程中的作用。方法　采用免疫组化ABC法观察Smad7在人牙胚发育各个时期的表达分布及其变化情况。结果　人牙胚发育各个时期均表达Smad7,但各期分布模式有所不同。Smad7在不同发育时期牙胚中的分布与TGF_β及其特异的信号转导分子Smad2、3有相似之处。 结论　Smad7可能在TGF_β调节成釉细胞和成牙本质细胞分化的信号转导通路中起一定的作用。 展开更多

关键词 细胞内 信号转导分子 SMAD7 人牙胚发育 表达 免疫组织化学

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转录因子c-Jun和c-Fos在牙本质涎磷蛋白基因表达中的作用 被引量：2

9

作者 何文喜 牛忠英 +2 位作者 赵守亮 李萍 高杰 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期67-69,共3页

目的研究成牙本质细胞内转录因子c-Jun和c-Fos在牙本质涎磷蛋白(DSPP)基因转录调控中的作用,探索成牙本质细胞内DSPP基因表达的调控机制。方法细胞免疫组化观察MDPC-23细胞内c-Jun和c-Fos蛋白分子的表达。瞬时转染和报告基因检测c-Jun和... 目的研究成牙本质细胞内转录因子c-Jun和c-Fos在牙本质涎磷蛋白(DSPP)基因转录调控中的作用,探索成牙本质细胞内DSPP基因表达的调控机制。方法细胞免疫组化观察MDPC-23细胞内c-Jun和c-Fos蛋白分子的表达。瞬时转染和报告基因检测c-Jun和c-Fos在DSPP基因转录中的作用。结果MDPC-23细胞表达c-Jun和c-Fos蛋白,c-Jun和c-Fos主要分布在MDPC-23细胞胞核。c-Jun或c-Fos过表达均显著抑制DSPP基因启动子活性。结论证实成牙本质细胞内转录因子c-Jun和c-Fos参与下调DSPP基因表达。 展开更多

关键词 牙本质涎磷蛋白 C-JUN C-FOS 基因转录

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牙本质涎磷蛋白反义核酸对牙胚超微结构的影响 被引量：2

10

作者 张蓉 肖明振 +3 位作者 赵守亮 徐平西 张春宝 汪平 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期281-283,共3页

目的　探讨牙本质涎磷蛋白 (DSPP)在牙胚发育和矿化中的作用及其机制。方法　胎龄为 17dBalb C胎鼠上颌第一磨牙 ,分为 2组 ,对照组牙胚置于无血清BGJb半固定培养基中培养 ;DSPP反义核酸组牙胚置于含有30 μmol L ,长 15bp的DSPP反义寡... 目的　探讨牙本质涎磷蛋白 (DSPP)在牙胚发育和矿化中的作用及其机制。方法　胎龄为 17dBalb C胎鼠上颌第一磨牙 ,分为 2组 ,对照组牙胚置于无血清BGJb半固定培养基中培养 ;DSPP反义核酸组牙胚置于含有30 μmol L ,长 15bp的DSPP反义寡核苷酸的半固体培养基中培养。牙胚体外培养 10d后 ,进行透射电镜观察。 结果　 2组牙胚牙尖处成牙本质细胞中均含有大量的细胞器 ,线粒体肿胀 ,粗面内质网扩张 ,且DSPP反义核酸组成牙本质细胞中粗面内质网扩张更为明显 ;胞外基质超微结构显示 :对照组胶原纤维聚集成束 ,排列具有一定的方向 ,牙尖基质带平均厚度为 3μm ;DSPP反义核酸组胶原纤维粗细不等 ,排列紊乱 ,牙尖基质带平均厚度为 2 5 μm。 结论　DSPP可能通过控制成牙本质细胞正常的分泌功能、胶原纤维的正常形态和排列在牙胚生长、矿化中起重要作用。 展开更多

关键词 牙本质涎磷蛋白 反义核酸 牙胚 超微结构 影响

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小鼠牙本质涎磷蛋白基因上游启动子的克隆和序列测定 被引量：2

11

作者 郭婷 余擎 +4 位作者 肖明振 赵守亮 高杰 朱庆林 曹罡 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期513-515,共3页

目的　克隆并测定小鼠牙本质涎磷蛋白 (DSPP)基因上游启动子的序列。方法　提取成年Balb c鼠基因组DNA ,设计引物 ,通过聚合酶链反应 (PCR)得到小鼠牙本质涎磷蛋白基因上游启动子的序列。再将目的片段定向连入T载体 ,酶切鉴定并测序。... 目的　克隆并测定小鼠牙本质涎磷蛋白 (DSPP)基因上游启动子的序列。方法　提取成年Balb c鼠基因组DNA ,设计引物 ,通过聚合酶链反应 (PCR)得到小鼠牙本质涎磷蛋白基因上游启动子的序列。再将目的片段定向连入T载体 ,酶切鉴定并测序。结果　将小鼠牙本质涎磷蛋白基因上游启动子序列分 3段克隆 ,分别得到 997bp、10 0 4bp及 6 74bp大小的目的片段。连入载体后 ,酶切结果测定重组质粒成功。其测序结果与小鼠基因组染色体位置 5q2 1处的相应序列 99%一致。结论　成功克隆到牙本质涎磷蛋白基因上游启动子的序列 ,为进一步研究DSPP基因的转录调控机制奠定了基础。 展开更多

关键词 牙本质涎磷蛋白 聚合酶链式反应 启动子

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不同根管预备方法对热塑牙胶充填根管微渗漏的影响 被引量：1

12

作者 张丽萍 吴补领 朱文忠 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2005年第3期345-345,共1页

关键词 根管预备 热塑牙胶 充填根管 微渗漏

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人牙本质基质蛋白1基因启动子在不同细胞中的活性比较和分析 被引量：7

13

作者 逄键梁 吴补领 +2 位作者 张亚庆 赵红萍 刘艳丽 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期148-152,共5页

目的观察并比较不同长度的人牙本质基质蛋白1(Dmp1)基因上游启动子片段在人牙髓干细胞(HDPSC)、成骨细胞(OC)和子宫颈癌上皮细胞株Hela中的启动子活性,为进一步研究Dmp1基因在矿化组织中的特异性转录调控特点和作用机制奠定基础。方法... 目的观察并比较不同长度的人牙本质基质蛋白1(Dmp1)基因上游启动子片段在人牙髓干细胞(HDPSC)、成骨细胞(OC)和子宫颈癌上皮细胞株Hela中的启动子活性,为进一步研究Dmp1基因在矿化组织中的特异性转录调控特点和作用机制奠定基础。方法以获得正确序列的2 195 bp Dmp1基因上游启动子重组T载体为模板,通过 PCR方法获得不同长度的Dmp1基因上游启动子片段,将其构建至报告基因载体pGL3-Basic中,瞬时转染至HDP- SC、OC和Hela细胞,荧光素酶检测这些细胞中启动子活性并进行分析。结果成功地获得了6段不同长度的Dmp1 启动子目的片段。酶切鉴定表明不同长度启动子报告基因载体构建成功,不同片段的Dmp1启动子在不同细胞中活性不同,在HDPSC和OC中活性较强,而在Hela细胞中活性最低。在-505--193 bp区和-935--505 bp区可能分别存在HDPSC和OC较为特异的转录调控作用区域点,该区可能包含Dmp1表达的基础调控元件。结论成功克隆了不同长度的Dmp1上游启动子的序列,不同启动子片段在牙髓干细胞和成骨细胞等矿化性细胞中活性较强,并初步确定了Dmp1启动子在矿化性细胞中的基本启动子区域,而在非矿化性细胞Hela细胞中活性较低。 展开更多

关键词 牙本质基质蛋白1 人牙髓干细胞 成骨细胞

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牙髓干细胞向神经细胞方向的诱导分化实验 被引量：11

14

作者 贺慧霞 金岩 +4 位作者 史俊南 罗玉庆 周艳妮 彭智 许玉和 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期331-334,共4页

目的探讨克隆化培养分离的人牙髓干细胞是否具有向神经细胞方向分化的潜能,并确定其诱导条件。方法克隆化培养的人牙髓干细胞预诱导24h,然后换含一定浓度二甲基亚砜(DMSO)、丁羟基茴香醚(BHA)、forskolin、β-巯基乙醇(β-ME)和氢化可的... 目的探讨克隆化培养分离的人牙髓干细胞是否具有向神经细胞方向分化的潜能,并确定其诱导条件。方法克隆化培养的人牙髓干细胞预诱导24h,然后换含一定浓度二甲基亚砜(DMSO)、丁羟基茴香醚(BHA)、forskolin、β-巯基乙醇(β-ME)和氢化可的松(hydrocortisone)的联合诱导液连续诱导4d,对诱导细胞进行形态学观察,神经胶质酸性蛋白(GFAP)、非特异性酯酶(NSE)免疫组化染色和GFAP mRNA RT-PCR检测。同时,以未诱导细胞为对照。结果诱导12h时细胞形态开始改变,24h时分化为较为典型的神经细胞样细胞,继续诱导分化细胞数量增多;诱导细胞表达神经元细胞特异性标志NSE和GFAP蛋白;RT-PCR检测诱导细胞表达GFAP mRNA,而未诱导细胞均无上述改变和表达。结论人牙髓干细胞在一定的诱导条件下可横向分化为神经元样细胞。 展开更多

关键词 牙髓干细胞 诱导 分化

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经典Wnt通路调节骨髓间充质干细胞向成牙本质样细胞的分化 被引量：4

15

作者 董金山 郝靖惠 +4 位作者 段晴月 杨博 白庆霞 张艳 陆群 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期673-676,共4页

目的:探讨经典Wnt通路在骨髓间充质干细胞向成牙本质样细胞分化中的作用,以期为临床治疗牙髓损伤提供新策略。方法:用牙胚细胞条件培养液诱导骨髓间充质干细胞向成牙本质样细胞的分化,培养液内分别加入外源性Wnt激活剂Wnt3a/抑制剂DKK-1... 目的:探讨经典Wnt通路在骨髓间充质干细胞向成牙本质样细胞分化中的作用,以期为临床治疗牙髓损伤提供新策略。方法:用牙胚细胞条件培养液诱导骨髓间充质干细胞向成牙本质样细胞的分化,培养液内分别加入外源性Wnt激活剂Wnt3a/抑制剂DKK-1,检测经典Wnt通路中β-catenin、LEF1、TCF4及成牙本质样细胞特异表达物DSPP、DMP-1变化。结果:骨髓间充质干细胞经Wnt激活剂/抑制剂处理后,胞浆内β-catenin水平明显上升/下降,其下游核内转录因子LEF1、TCF4基因水平明显上升/下降,而细胞内DSPP、DMP-1的表达明显降低/升高。结论:Wnt信号通路抑制骨髓间充质干细胞向成牙本质样细胞分化。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 成牙本质样细胞 WNT β-catenin通路

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低分子量猪釉原蛋白和氟离子共同作用对磷灰石晶体矿化作用的研究 被引量：5

16

作者 王疆 薛云鹏 +1 位作者 王捍国 倪龙兴 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2014年第2期104-107,共4页

目的:利用双膜体外矿化模型研究低分子量猪釉原蛋白(LMWPA)与氟离子(F)共同作用对磷灰石晶体矿化的作用。方法:将LMWPA,LMWPA+1mg/L F,LMWPA+2mg/L F分别加入双膜系统的反应空间内反应,同时设DDW(双蒸水),BSA(牛血清白蛋白),BSA+1mg/L F... 目的:利用双膜体外矿化模型研究低分子量猪釉原蛋白(LMWPA)与氟离子(F)共同作用对磷灰石晶体矿化的作用。方法:将LMWPA,LMWPA+1mg/L F,LMWPA+2mg/L F分别加入双膜系统的反应空间内反应,同时设DDW(双蒸水),BSA(牛血清白蛋白),BSA+1mg/L F,BSA+2mg/L F组作为对照,37℃,反应3d后,扫描电镜(SEM)、能谱分析(EDX),X线衍射法(XRD)检测矿化产物。结果:与空白对照组相比,BSA和LMWPA的加入均能显著改变晶体的形态,但对晶体成份无明显作用,均为磷酸八钙(OCP)。与氟离子共同作用后,LMWPA组形成了磷灰石晶体,而BSA组则形成了透钙磷石。结论:LMWPA与氟离子的共同作用可能是釉质矿化过程中重要的调控机制。 展开更多

关键词 釉原蛋白 氟 矿化 磷灰石

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牙龈炎患者180例的菌斑控制及护理干预 被引量：3

17

作者 李洁 杨文晔 +1 位作者 范晓敏 宋超峰 《解放军护理杂志》 2007年第4期43-44,共2页

目的探讨减轻口腔常见病、多发病牙龈炎症状的方法。方法由专业口腔医护人员使用超声洁牙机对180例患者的牙龈进行上、下全面洁治,后随机分为试验组和对照组各90例。洁治术后,试验组采取包括刷牙方法指导、牙线使用等一系列的后期护理干... 目的探讨减轻口腔常见病、多发病牙龈炎症状的方法。方法由专业口腔医护人员使用超声洁牙机对180例患者的牙龈进行上、下全面洁治,后随机分为试验组和对照组各90例。洁治术后,试验组采取包括刷牙方法指导、牙线使用等一系列的后期护理干预,对照组不再做任何干预。于基线调查后1周、4周对所有患者进行回顾性牙龈指数调查,比较两组间的差异。结果两组牙龈炎患者在第一次基线调查时牙龈炎属重度流行,牙龈指数无统计学意义(P>0.05);洁治术后1周的调查中两组牙龈指数均出现明显下降,4周后试验组、对照组牙龈指数分别为0.51、0.92,两者有显著性差异(P<0.01)。结论口腔洁治术是去除结石、菌斑最有效的方法,但后期正确的口腔卫生行为是保持口腔健康、维持疗效的关键。 展开更多

关键词 牙龈炎 龈上 下洁治术 牙龈指数

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体外磷灰石晶体矿化模型构建及应用的初步研究 被引量：1

18

作者 王疆 倪龙兴 王捍国 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期588-591,共4页

目的构建磷灰石晶体矿化的体外模型,研究牛血清白蛋白(BSA)和不同浓度的氟离子对磷灰石晶体体外矿化的影响。方法利用阳离子膜和透析膜建立磷灰石晶体矿化的体外模型。在模型中分别加入去离子水、BSA和不同浓度的氟离子(5、20、100mg
... 目的构建磷灰石晶体矿化的体外模型,研究牛血清白蛋白(BSA)和不同浓度的氟离子对磷灰石晶体体外矿化的影响。方法利用阳离子膜和透析膜建立磷灰石晶体矿化的体外模型。在模型中分别加入去离子水、BSA和不同浓度的氟离子(5、20、100mg·L-1),反应3d后,扫描电镜(SEM)、X线衍射法检测矿化产物。结果成功构建了磷灰石晶体体外矿化模型,加入去离子水和BSA后,晶体成分主要为磷酸八钙(OCP),但晶体形态差异显著。加入氟离子后,形成了柱状、杆状的氟磷灰石(FAP)晶体,且随着氟离子浓度的增加,晶体的尺寸和矿化程度均增加。结论该体外模型是检测磷灰石晶体矿化调控因素的有效方法。 展开更多

关键词 磷灰石 矿化 模型

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小鼠牙胚发育在下颌弓培养模型中的动态观察

19

作者 刘世森 吴补领 +1 位作者 余擎 董绍忠 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期202-204,共3页

目的 :建立研究牙胚发生、早期发育的研究模型。方法 :取 11dpc胎鼠下颌弓 ,用Trowell培养系统进行培养。培养 1、3、5、7、9、11d后进行常规HE染色 ,观察牙胚的发生发育过程。结果 :下颌弓生长良好 ,可动态地观察到牙胚发生以及发育至... 目的 :建立研究牙胚发生、早期发育的研究模型。方法 :取 11dpc胎鼠下颌弓 ,用Trowell培养系统进行培养。培养 1、3、5、7、9、11d后进行常规HE染色 ,观察牙胚的发生发育过程。结果 :下颌弓生长良好 ,可动态地观察到牙胚发生以及发育至帽状期的过程。结论 展开更多

关键词 小鼠 牙胚 发育 下颌弓培养模型 动态观察 牙齿

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端粒酶反转录酶基因介导的人骨髓基质干细胞永生化研究 被引量：6

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作者 滕勇 胡蕴玉 +3 位作者 王捍国 王臻 关玉成 高杰 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1230-1234,共5页

目的建立永生化人骨髓基质干细胞系,为组织工程提供种子细胞库及标准化细胞系。方法取单克隆培养的人骨髓基质干细胞,采用脂质体转染法将人端粒酶反转录酶(hTERT)基因导入细胞,G418筛选后获得阳性克隆,体外连续扩增培养,RT-PCR检测转染... 目的建立永生化人骨髓基质干细胞系,为组织工程提供种子细胞库及标准化细胞系。方法取单克隆培养的人骨髓基质干细胞,采用脂质体转染法将人端粒酶反转录酶(hTERT)基因导入细胞,G418筛选后获得阳性克隆,体外连续扩增培养,RT-PCR检测转染细胞内hTERT基因的整合与表达。取转染后第100代细胞,用成骨诱导条件培养基(普通培养基加地塞米松、β-甘油磷酸、维生素C)、软骨诱导条件培养基(普通培养基加地塞米松、TGF-β、维生素C)、心肌细胞诱导条件培养基(普通培养基加5-氮胞苷)分别向成骨、软骨、心肌细胞诱导培养。于培养后第7、14、21、28天,采用免疫细胞化学染色观察成骨细胞诱导Ⅰ型胶原、骨钙素的表达;采用茜素红染色观察钙结节形成;采用免疫细胞化学染色观察软骨细胞诱导Ⅱ型胶原的表达,同时进行甲苯胺蓝染色;采用免疫细胞化学染色观察心肌细胞诱导横纹肌肌动蛋白的表达,分析细胞系向成骨、软骨及心肌细胞分化的能力。结果 hTERT稳定转染入人骨髓基质干细胞,转化细胞端粒酶表达阳性。转化细胞在体外长期连续培养下生长良好,已传至136代。取第100代细胞进行诱导分化,结果显示其能向成骨、软骨及心肌细胞分化。结论外源性hTERT的导入可致人骨髓基质干细胞永生化,并维持成体干细胞的多向分化特性,可为组织工程提供种子细胞库并为组织工程种子细胞研究提供标准化细胞。 展开更多

关键词 基因 转染 细胞永生化 端粒 末端转移酶 骨髓基质干细胞

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