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PTEN抑癌基因转染粘液表皮样癌细胞系M_3SP_2的建立和鉴定 被引量:12
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作者 刘斌 吴军正 +3 位作者 王廷 杨波 叶维莉 王江华 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期59-61,共3页
目的 :为了研究外源性基因PTEN对粘液表皮样癌细胞生物学行为的影响 ,建立稳定表达PTEN的粘液表皮样癌细胞系。方法 :应用脂质体介导方法将野生型PTEN基因导入高转移性粘液表皮样癌细胞系M3 SP2 ,嘌呤霉素筛选阳性克隆 ,用免疫印迹法和... 目的 :为了研究外源性基因PTEN对粘液表皮样癌细胞生物学行为的影响 ,建立稳定表达PTEN的粘液表皮样癌细胞系。方法 :应用脂质体介导方法将野生型PTEN基因导入高转移性粘液表皮样癌细胞系M3 SP2 ,嘌呤霉素筛选阳性克隆 ,用免疫印迹法和ABC免疫酶染色法检测转染细胞中PTEN蛋白的表达。结果 :野生型PTEN基因成功地导入细胞M3 SP2 ,转染细胞稳定表达PTEN蛋白 ,PTEN蛋白分布于细胞质。结论 :M3 SP2 细胞能稳定表达外源性基因PTEN。 展开更多
关键词 粘液表皮样癌 PTEN 基因转染 细胞系 M3SP2 建立鉴定 抑癌基因
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RC-160对NCI-H446细胞生长抑素受体内化及调变的研究 被引量:1
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作者 汪静 李富军 +1 位作者 邓敬兰 李焰 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期373-375,共3页
目的 探讨人小细胞肺癌细胞株NCI H4 4 6的生长抑素受体体外调变的规律。方法 采用体外放射配基结合分析法 ,以12 5I标记的生长抑素类似物 (RC 16 0 )为配基 ,在与NCI H4 4 6细胞进行体外饱和及竞争结合实验的基础上 ,进行RC 16 0诱导... 目的 探讨人小细胞肺癌细胞株NCI H4 4 6的生长抑素受体体外调变的规律。方法 采用体外放射配基结合分析法 ,以12 5I标记的生长抑素类似物 (RC 16 0 )为配基 ,在与NCI H4 4 6细胞进行体外饱和及竞争结合实验的基础上 ,进行RC 16 0诱导下NCI H4 4 6细胞株的生长抑素受体内化及上调实验。结果 温育 15min时 ,内化组与对照组的内化率分别为 (2 2 .30± 2 .4 8) %和 (8.2 0± 3.2 8) % (P <0 .0 1) ,膜结合率分别为 (43.83± 3.97) %和 (12 .37± 1.6 1) % (P <0 .0 1)。低浓度的非标记RC 16 0暴露前 13h ,上调率增加缓慢 ,仅为 (2 0 .0 0± 1.30 ) % ,其后上调率迅速增加 ,并于暴露后 19h达到顶峰 [(76 .5 0± 2 .6 0 ) % ]。结论 RC 16 0可使NCI H4 4 6细胞表面生长抑素受体内化并上调 。 展开更多
关键词 生长抑素受体 内化 上调 小细胞肺癌
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外源性PTEN抑癌基因对高转移性黏液表皮样癌细胞系形态的影响
3
作者 刘斌 吴军正 +2 位作者 司徒镇强 李洁 李焰 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期140-142,共3页
目的 :观察外源野生型PTEN基因对高转移性黏液表皮样癌细胞系形态的影响。方法 :应用倒置显微镜观察法、HE染色观察、扫描电镜及透射电镜观察法 ,比较野生型PTEN抑癌基因转染的黏液表皮样癌细胞M 3SP2 PTEN与对照的黏液表皮样癌细胞M 3... 目的 :观察外源野生型PTEN基因对高转移性黏液表皮样癌细胞系形态的影响。方法 :应用倒置显微镜观察法、HE染色观察、扫描电镜及透射电镜观察法 ,比较野生型PTEN抑癌基因转染的黏液表皮样癌细胞M 3SP2 PTEN与对照的黏液表皮样癌细胞M 3SP2 pBp的形态学差异。 结果 :M 3SP2 pBp细胞体外生长活跃 ,细胞数量多 ,核分裂相多 ,细胞表面微绒毛丰富 ,细胞核切迹明显 ,细胞质中线粒体丰富 ;M 3SP2 PTEN细胞生长缓慢 ,分裂相很少 ,细胞数量少 ,部分细胞空泡变性 ,染色质凝集 ,细胞膜彭出 ,线粒体数量少并发生肿胀 ,较多的溶酶体融合。结论 :外源野生型PTEN基因的转染能导致体外培养的高转移性黏液表皮样癌细胞变性、坏死或凋亡。 展开更多
关键词 外源性PTEN抑癌基因 高转移性黏液 表皮样癌细胞系 形态学 基因转染 黏液表皮样癌
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兔脂肪干细胞的分离培养鉴定及诱导分化研究 被引量:9
4
作者 李龙 赵建辉 +5 位作者 刘斌 令狐大科 刘彦普 谭新颖 吕成鹏 徐小方 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2012年第5期426-429,共4页
目的:分离培养家兔脂肪干细胞(Adipose-derived stem cells,ASCs),观察体外培养生长特性,并在特定条件下诱导分化,探讨其成脂成骨分化能力。方法:无菌条件下切取家兔腹股沟处脂肪组织,0.25%Ⅰ型胶原酶消化,分离培养原代细胞,取第3代ASC... 目的:分离培养家兔脂肪干细胞(Adipose-derived stem cells,ASCs),观察体外培养生长特性,并在特定条件下诱导分化,探讨其成脂成骨分化能力。方法:无菌条件下切取家兔腹股沟处脂肪组织,0.25%Ⅰ型胶原酶消化,分离培养原代细胞,取第3代ASCs做实验,用HE染色观察细胞形态,MTT比色法测定细胞生长曲线;用流式细胞仪检测其细胞表面标志物;用油红O染色和茜素红染色鉴定成脂和成骨诱导分化。结果:从家兔脂肪组织中分离获得的ASCs形态为长梭形,成纤维细胞样,生长活力旺盛,具有较强的增殖能力;流式细胞仪分析CD29呈阳性表达,CD31呈阴性表达;成脂诱导的细胞油红O染色阳性,成骨诱导的细胞茜素红染色阳性。结论:本实验分离培养的细胞为ASCs,具有成脂和成骨分化潜能。 展开更多
关键词 ASCs 分离培养 诱导分化
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可注射自体脂肪组织移植动物模型的建立 被引量:8
5
作者 谭新颖 张海霞 +5 位作者 刘斌 刘彦普 李龙 徐小方 令狐大科 安然 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期159-163,共5页
目的:建立一种可注射自体脂肪组织移植的动物模型。方法:从6只新西兰家兔背部获取脂肪颗粒(adipose granule,AG),取部分AG经Ⅰ型胶原酶消化得到基质血管成分(stromal vascular fraction,SVF)。将自体SVF与AG复合作为实验组移植到兔右耳... 目的:建立一种可注射自体脂肪组织移植的动物模型。方法:从6只新西兰家兔背部获取脂肪颗粒(adipose granule,AG),取部分AG经Ⅰ型胶原酶消化得到基质血管成分(stromal vascular fraction,SVF)。将自体SVF与AG复合作为实验组移植到兔右耳移植区,单纯AG为对照移植到兔左耳移植区。术后当日、1、3个月通过B超和游标卡尺测量移植物体积,并用透射光活体观察各时间点新生血管的形成。术后3个月取材,观察移植物组织学变化。结果:术后1、3个月对照组脂肪组织存活率分别为:(64.35±8.36)%、(58.22±2.88)%;实验组脂肪组织存活率分别为:(77.42±5.1)%、(67.95±6.09)%(P<0.05)。术后3个月,实验组与对照组组织学变化未见明显差异。结论:根据兔耳血管分布特点建立的动物模型具有标准统一、易于观察与测量、容易重复的特点,为脂肪组织工程研究提供了一种新的动物模型。 展开更多
关键词 脂肪组织 移植 动物模型
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活体小动物显微CT对氟中毒小鼠骨质特征的分析 被引量:10
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作者 郑冬冬 周涛 段小红 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期181-184,共4页
目的:运用活体小动物显微CT技术分析氟中毒小鼠与正常小鼠股骨骭骺端骨质特征三维微观结构的区别,以期为氟中毒小动物研究提供一种新方法。方法:20只3周龄C57BL/6J小鼠,对照组小鼠(n=10)用去离子水自由饮用;实验组(n=10)以100 mg/L NaF... 目的:运用活体小动物显微CT技术分析氟中毒小鼠与正常小鼠股骨骭骺端骨质特征三维微观结构的区别,以期为氟中毒小动物研究提供一种新方法。方法:20只3周龄C57BL/6J小鼠,对照组小鼠(n=10)用去离子水自由饮用;实验组(n=10)以100 mg/L NaF溶液自由饮用。2组小鼠分别在喂养2个月和6个月时进行麻醉活体扫描其股骨骭骺端,利用显微CT(Micro CT)影像分析骨质特征。结果:氟中毒小鼠的骨质特征为骨密度降低,骨量丢失,骨小梁结构发生了改变,骨强度下降,表现为骨质疏松样改变。结论:活体小动物显微CT技术是研究氟中毒小动物的一种有效方法。 展开更多
关键词 氟中毒 显微CT 骨质疏松
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成釉细胞受体介导的内吞功能的研究 被引量:3
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作者 杨婷 周涛 +1 位作者 高佳 段小红 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期307-310,共4页
目的:相对定量地研究成釉细胞的内吞功能,并在细胞水平上动态观察成釉细胞的内吞过程,以期为成釉细胞内吞功能研究提供2种新的可行的方法。方法:用视磺酸和地塞米粉(RA/DEX)诱导分泌期成釉细胞LS8细胞成熟,对照组细胞不经诱导处理。分... 目的:相对定量地研究成釉细胞的内吞功能,并在细胞水平上动态观察成釉细胞的内吞过程,以期为成釉细胞内吞功能研究提供2种新的可行的方法。方法:用视磺酸和地塞米粉(RA/DEX)诱导分泌期成釉细胞LS8细胞成熟,对照组细胞不经诱导处理。分别用激光共聚焦显微镜和活细胞工作站观察细胞内吞荧光标记的FITC-白蛋白的过程。结果:2种方法均显示RA/DEX诱导组细胞内吞活动较对照组强。结论:激光共聚焦显微镜和活细胞工作站都是研究成釉细胞内吞功能的有效方法。 展开更多
关键词 成釉细胞 内吞作用 活细胞工作站
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脆性组氨酸三聚体基因对黏液表皮样癌细胞生长抑制作用的研究
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作者 刘峰 吴军正 +2 位作者 李峰 李焰 李洁 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期252-255,共4页
目的探讨外源性脆性组氨酸三聚体(FHIT)基因的转入对黏液表皮样癌细胞增殖和生长的抑制作用。方法通过透射电镜、流式细胞仪测试、免疫组化染色及肿瘤细胞裸鼠移植实验,将转入外源性FHIT基因前后的黏液表皮样癌MEC-1细胞的体外生物学活... 目的探讨外源性脆性组氨酸三聚体(FHIT)基因的转入对黏液表皮样癌细胞增殖和生长的抑制作用。方法通过透射电镜、流式细胞仪测试、免疫组化染色及肿瘤细胞裸鼠移植实验,将转入外源性FHIT基因前后的黏液表皮样癌MEC-1细胞的体外生物学活性和体内成瘤能力进行比较。结果外源性FHIT基因转入黏液表皮样癌MEC-1细胞后,S期细胞显著减少,G1期细胞增多;细胞倍增时间从(21.03±0.41)h延长为(26.86±0.71)h;软琼脂克隆形成率显著降低;细胞发生退行性改变和出现凋亡早期表现。FHIT基因转染后细胞间质黏液增多,说明细胞向黏液细胞分化。结论外源性FHIT基因能够抑制黏液表皮样癌MEC-1细胞的生长和MEC-1细胞在体内的成瘤活性,而且可以提高MEC-1癌细胞的分化程度。 展开更多
关键词 脆性组氨酸三聚体 基因转染 黏液表皮样癌 成瘤性
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