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口腔扁平苔藓发病相关基因cDNA消减文库的建立
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作者 刘青 金岩 +2 位作者 吴织芬 邢向辉 轩东英 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2005年第2期166-168,共3页
目的:建立口腔扁平苔藓差异表达基因的cDNA文库。方法:采用改良消减杂交技术,以口腔扁平苔藓病变组织总mRNA为实验组, 采用改良的SMARTPCRcDNA合成技术进行反转录,正常黏膜组织总mRNA为驱动组,进行扣除杂交,筛选出两组差异表达的cDNA,与... 目的:建立口腔扁平苔藓差异表达基因的cDNA文库。方法:采用改良消减杂交技术,以口腔扁平苔藓病变组织总mRNA为实验组, 采用改良的SMARTPCRcDNA合成技术进行反转录,正常黏膜组织总mRNA为驱动组,进行扣除杂交,筛选出两组差异表达的cDNA,与T载体进行T/A连接构建文库,然后转化高效感受态大肠杆菌DH5а进行文库扩增,随机挑取阳性克隆进行酶切鉴定。结果:扩增消减cDNA文库获得200余个白色阳性克隆,随机挑取的100个阳性克隆酶切后,含500bp以上插入片段的克隆64个,占64%。结论:用改良消减杂交技术成功构建了口腔扁平苔藓差异表达基因的消减cDNA文库,该文库的建立为进一步筛选、克隆口腔扁平苔藓相关基因奠定了基础。 展开更多
关键词 改良消减杂交技术 口腔扁平苔藓 差异表达基因
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