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铅暴露对体外血脑脊液屏障功能及ZO-1和闭合蛋白表达的影响 被引量:4
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作者 刘新秦 郑刚 +3 位作者 苏鹏 曹宇鹏 刘杨 刘明朝 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期615-620,共6页
目的通过建立体外血脑脊液屏障(BCB)模型,研究铅诱导BCB损伤的可能机制。方法使用Z310细胞建立BCB体外细胞模型,分别加入Pb(AC)22.5,5.0和10.0 mmol·L-1,暴露24,48和72 h。采用跨内皮电阻(TEER)检测法及葡聚糖法检测BCB模型通透性;... 目的通过建立体外血脑脊液屏障(BCB)模型,研究铅诱导BCB损伤的可能机制。方法使用Z310细胞建立BCB体外细胞模型,分别加入Pb(AC)22.5,5.0和10.0 mmol·L-1,暴露24,48和72 h。采用跨内皮电阻(TEER)检测法及葡聚糖法检测BCB模型通透性;Western蛋白印迹法和免疫荧光法检测BCB中紧密连接蛋白ZO-1和闭合蛋白表达及分布。结果与细胞对照组相比,Pb(AC)22.5,5.0和10.0 mmol·L-1暴露48 h对Z310细胞存活率和密度均无明显影响。暴露后第12天,与细胞对照组比较,Pb(AC)25.0和10.0 mmol·L-1组TEER值明显降低(P<0.05),葡聚糖通过率显著增高(P<0.05)。Western蛋白印迹法和免疫荧光法检测结果显示,与细胞对照组相比,Pb(AC)2各浓度暴露48 h后,ZO-1和闭合蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论铅暴露能够破坏BCB模型的通透性,其机制可能与抑制紧密连接蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 血脑脊液屏障 铅中毒 ZO-1 闭合蛋白
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复合营养素对急性束缚冷水浸泡应激诱发的Th1/Th2细胞因子变化的影响
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作者 刘亚莉 毕辉 +6 位作者 樊荣 李雨衡 王跃民 陈耀明 陈景元 迟素敏 裴建明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期601-603,606,共4页
目的:探讨复合营养素对大鼠急性束缚冷水浸泡应激时血清Th细胞亚群相关细胞因子变化引起的Th1/Th2失衡的影响。方法:SD雄性大鼠随机分为:正常对照组、急性应激对照组、急性应激喂复合营养素组。采用束缚冷水浸泡应激模型,急性应激30 min... 目的:探讨复合营养素对大鼠急性束缚冷水浸泡应激时血清Th细胞亚群相关细胞因子变化引起的Th1/Th2失衡的影响。方法:SD雄性大鼠随机分为:正常对照组、急性应激对照组、急性应激喂复合营养素组。采用束缚冷水浸泡应激模型,急性应激30 min,应激后0 min、30 min、60 min和120 min处死动物取血,分离血清保存于-70℃备用,ELISA试剂盒检测大鼠血清中的IL-2、IL-6和TNF-α的变化。结果:急性束缚冷水浸泡应激后可引起细胞因子IL-2水平的降低,IL-6和TNF-α升高,不同时间点(0、30、60、120 min)中30min的变化最明显,应用复合营养素可削弱急性束缚冷水浸泡应激引起的IL-2水平的降低和IL-6、TNF-α的升高,同样以应激后30 min复合营养素的改善作用最显著。结论:复合营养素可以显著改善急性束缚冷水浸泡应激应激大鼠Th1/Th2细胞因子IL-2、IL-6和TNF-α的变化,提示复合营养素可改善应激大鼠的免疫调节功能,恢复Th1/Th2平衡,对于提高机体抗应激能力、减轻应激所造成的损伤可能具有一定的作用。 展开更多
关键词 复合营养素 TH细胞 细胞因子 急性束缚冷水浸泡应激
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铅锰联合暴露通过诱导小胶质细胞活化引起星形胶质细胞活化及谷氨酰胺合成酶的活性降低 被引量:4
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作者 官瑞丽 王涛 +2 位作者 陈景元 骆文静 刘明朝 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期313-318,共6页
目的以小胶质细胞与星形胶质细胞建立共培养模型,研究铅、锰单独及联合暴露下不同类型胶质细胞的反应及小胶质细胞活化对星形胶质细胞功能的影响。方法先通过MTT法筛选对C6星形胶质细胞生长无影响的铅和锰的暴露剂量和作用时间,再选取BV... 目的以小胶质细胞与星形胶质细胞建立共培养模型,研究铅、锰单独及联合暴露下不同类型胶质细胞的反应及小胶质细胞活化对星形胶质细胞功能的影响。方法先通过MTT法筛选对C6星形胶质细胞生长无影响的铅和锰的暴露剂量和作用时间,再选取BV2小胶质细胞和C6细胞以铅、锰单独及联合染毒建立细胞模型。分为直接刺激法、条件培养基法和共培养法3种细胞模型。直接刺激法采用完全培养基或含醋酸铅、氯化锰培养基直接作用于C6细胞24 h;条件培养基法采用完全培养基或含铅、锰培养基作用于BV2细胞24 h,取上清经离心后作用于C6细胞24 h;共培养法将BV2细胞接种于TranswellTM共培养模型上层小室内,再将上层小室置入空白12孔板内,将C6细胞接种于另一12孔板内,以完全培养基或含铅、锰培养基作用接种于TranswellTM共培养模型上层小室内的BV2细胞,24 h后弃去培养基,以完全培养基轻柔洗涤后,将含BV2细胞的上层小室置入接种C6细胞的12孔板内继续培养24 h。采用Western blot法检测补体受体3(CR3/CD11b/OX42)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)水平,确定铅、锰单独及联合暴露下对不同类型胶质细胞的影响;检测谷氨酰胺合成酶(GS)水平确定小胶质细胞的活化对星形胶质细胞谷氨酸-谷氨酰胺循环环路的影响。结果直接刺激模型中,10μmol/L铅、100μmol/L锰作用星形胶质细胞24 h,铅、锰单独及联合暴露不能引起星形胶质细胞显著活化及其GS表达的改变;条件培养基模型中,10μmol/L铅、100μmol/L锰作用于BV2小胶质细胞24 h,BV2小胶质细胞OX42表达水平显著升高,将其培养基作用于C6星形胶质细胞24 h后,C6细胞GFAP表达显著性升高,GS表达显著性降低;共培养模型中,10μmol/L铅、100μmol/L锰作用于BV2小胶质细胞24 h,BV2小胶质细胞OX42表达水平显著升高,将其洗涤后与C6星形胶质细胞共培养24 h后,星形胶质细胞GFAP表达显著性升高,GS表达显著性降低。结论低剂量铅、锰单独及联合暴露能够引起体外培养的小胶质细胞活化,而活化的小胶质细胞能够诱导星形胶质细胞活性增强及GS表达水平降低,且铅锰联合暴露比单独暴露效应更为显著。 展开更多
关键词 小胶质细胞 星形胶质细胞 谷氨酰胺合成酶
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慢性低压低氧暴露对小鼠海马CA1区神经元树突棘形态及细丝蛋白A表达的影响 被引量:7
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作者 周杨 赵再华 +2 位作者 沈学锋 骆文静 曹子鹏 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期2209-2214,共6页
目的:探讨低压低氧暴露对小鼠海马CA1区神经元树突棘形态及细丝蛋白A表达的影响。方法:6~8周龄C57BL/6雄性小鼠分为常氧暴露7 d组、常氧暴露14 d组、低压低氧暴露7 d组和低压低氧暴露14 d组。低压低氧暴露组置于低压舱模拟6 000 m海拔... 目的:探讨低压低氧暴露对小鼠海马CA1区神经元树突棘形态及细丝蛋白A表达的影响。方法:6~8周龄C57BL/6雄性小鼠分为常氧暴露7 d组、常氧暴露14 d组、低压低氧暴露7 d组和低压低氧暴露14 d组。低压低氧暴露组置于低压舱模拟6 000 m海拔高原进行低压低氧暴露。Golgi染色法观察小鼠海马CA1区树突的分支数,以及基树突棘和顶树突棘长度和密度的变化; Western blot方法检测小鼠海马细丝蛋白A表达水平的变化;免疫组织荧光染色法检测小鼠海马CA1区细丝蛋白A的表达及分布变化。结果:与常氧暴露组相比,低压低氧暴露后,小鼠海马CA1区树突分支数的差异无统计学显著性,但基树突棘和顶树突棘的长度显著增加(P <0. 05),密度显著降低(P <0. 01)。低压低氧暴露后,小鼠海马细丝蛋白A表达水平低于常氧暴露组(P <0. 01或P<0. 05)。免疫组织荧光染色显示细丝蛋白A在小鼠海马CA1区表达,低压低氧暴露后,海马CA1区细丝蛋白A表达水平降低(P <0. 05)。结论:慢性低压低氧暴露可影响小鼠海马CA1区细丝蛋白A表达,并导致海马CA1区神经元树突棘形态发生改变。 展开更多
关键词 低压低氧暴露 树突棘 细丝蛋白A 海马
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