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兔骨髓源性血管内皮祖细胞的分离、培养及鉴定被引量：14: 1; 作者吴波卢正茂 +5 位作者王尧罗天航薛绪潮毕建威康俊升方国恩《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第2期454-457,共4页; 本研究探讨兔骨髓源性血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPC)的分离、培养及鉴定方法。抽取兔骨髓细胞,用梯度密度离心法获得单个核细胞,以内皮细胞培养液培养,通过细胞形态观察、免疫组织化学试验、流式细胞术以及内皮祖... 展开更多; 关键词骨髓内皮祖细胞细胞培养细胞分离细胞鉴定; 在线阅读下载PDF 职称材料

胃癌相关基因Serpine1的RT-LAMP快速检测法被引量：7: 2; 作者徐凌殷建华 +3 位作者朱秀唐毕锋曹广文邓松华《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2007年第6期695-697,共3页; 目的建立逆转录-环介导的等温扩增快速检测高侵袭型胃癌转移相关基因。方法快速抽提肝转移胃癌患者标本的RNA用环介导的等温扩增反应(LAMP)扩增转移相关基因Serpine1,扩增条件为63℃保温30min,扩增后产物通过特异性内切酶进行鉴定。结果... 展开更多; 关键词胃肿瘤肿瘤转移; 在线阅读下载PDF 职称材料

环介导等温扩增技术的应用和发展被引量：15: 3; 作者唐毕锋马立业曹广文《实用医学杂志》 CAS 2008年第22期3972-3974,共3页; 核酸扩增是生命科学领域的常用研究工具．20世纪80年代出现的聚合酶链反应（PCR）得到了广泛的应用，但该方法需要特殊的仪器、模板的热变性及长时间的温度循环。20世纪90年代出现了几种核酸等温扩增方法：核酸等温扩增法、自序列复制... 展开更多; 关键词扩增技术介导聚合酶链反应核酸扩增生命科学扩增方法产物检测扩增法; 在线阅读下载PDF 职称材料

人脐静脉内皮细胞的长期传代培养被引量：10: 4; 作者何红兵仲剑平《第一军医大学学报》 CSCD 1990年第4期312-315,共4页; 本实验在纤维连接蛋白(Fibronectin,Fn)预处理的塑料培养皿上,用199培养基(内含20％小牛血清)。成功地将人脐静脉内皮细胞以1:2-3比率传代培养两个月,传15代。培养细胞具有第Ⅷ因子相关抗原;胞质中存在Weible-Palade小体;细胞倍增时间为... 展开更多; 关键词内皮细胞脐静脉传代培养; 在线阅读下载PDF 职称材料

共表达ENDO-VEGI_(151)和survivin-siRNA双功能质粒的构建及其抗瘤活性被引量：1: 5; 作者李喆石林祥 +3 位作者杨生生常涛房林方国恩《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期394-399,共6页; 目的:构建pCDNA3.1-ENDO-VEGI151/survivin-shRNA(pEV/si-survivin)双功能表达质粒,观察其对乳腺癌细胞MDA-MB-231和人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUEVC)增殖和凋亡的影响,探讨其治疗肿瘤的可行性。方法... 展开更多; 关键词乳腺癌 survivin 抗血管生成凋亡基因治疗; 在线阅读下载PDF 职称材料

论胰腺癌手术的术式选择被引量：2: 6; 作者金钢胡先贵《医学与哲学》北大核心 2005年第3期41-41,44,共2页; 胰腺癌是一种高度恶性的腹部肿瘤。胰腺癌切除手术是一种高风险手术 ,如果病例选择或处理不当会造成严重后果。从哲学的高度更新指导思想和方法 ,对胰腺癌术式的合理选择以及提高胰腺癌治疗效果大有裨益。; 关键词胰腺癌治疗手术适应证; 在线阅读下载PDF 职称材料

可诱导表达mIL-12单链融合蛋白的腺病毒载体的构建: 7; 作者陈坚薛绪潮 +2 位作者方国恩苏长青钱其军《实用医学杂志》 CAS 2008年第16期2738-2741,共4页; 目的:构建带mIL-12单链融合蛋白基因并可经RU486诱导表达的重组腺病毒载体,以期用于体内的基因治疗研究。方法:构建穿梭质粒pDC-RUmIL-12,使mIL-12单链融合蛋白基因和启动子在RU486诱导表达系统调控之下,酶切、测序鉴定正确后,将其与Ad... 展开更多; 关键词白细胞介素12 腺病毒科遗传载体基因调控 RU486; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名兔骨髓源性血管内皮祖细胞的分离、培养及鉴定被引量：14: 1; 作者吴波卢正茂王尧罗天航薛绪潮毕建威康俊升方国恩; 机构第二军医大学附属长海医院普通外科解放军第; 出处《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第2期454-457,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目编号30672170; 文摘本研究探讨兔骨髓源性血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPC)的分离、培养及鉴定方法。抽取兔骨髓细胞,用梯度密度离心法获得单个核细胞,以内皮细胞培养液培养,通过细胞形态观察、免疫组织化学试验、流式细胞术以及内皮祖细胞吞噬功能进行鉴定。结果表明,新分离的骨髓单个核细胞呈圆形,培养48小时后可见贴壁细胞呈集落样生长,细胞呈圆形或不规则形,核分裂相明显,至培养第7天成片生长的细胞集落相互连接呈梭形的内皮样细胞。内皮祖细胞免疫组织化学检测结果显示CD133(+),CD34(+),Ⅷ因子(++),KDR(++);流式细胞术鉴定结果显示CD133的阳性率为(18.23±7.12)%,CD34的阳性率为(47.71±14.85)%,CD31的阳性率为(71.61±13.51)%,KDR的阳性率为(87.24±11.40)%。细胞吞噬功能鉴定说明超过80%的贴壁细胞都特异性地摄取了Dil-acLDL和FITC-UEA-1。结论:密度梯度离心法体外分离兔骨髓源的单个核细胞,在一定的诱导培养条件下能分化成为血管内皮祖细胞。; 关键词骨髓内皮祖细胞细胞培养细胞分离细胞鉴定; Keywords bone marrow endothelial progenitor cell cell culture cell isolation cell identification; 分类号 R392.28 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名胃癌相关基因Serpine1的RT-LAMP快速检测法被引量：7: 2; 作者徐凌殷建华朱秀唐毕锋曹广文邓松华; 机构安徽医科大学病理生理学教研室第二军医大学流行病教研室第二军医大学附属长海医院普通外科; 出处《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2007年第6期695-697,共3页; 基金安徽省自然科学基金(编号:050430706) 安徽省教育厅自然科学基金(编号:KJ2007B196); 文摘目的建立逆转录-环介导的等温扩增快速检测高侵袭型胃癌转移相关基因。方法快速抽提肝转移胃癌患者标本的RNA用环介导的等温扩增反应(LAMP)扩增转移相关基因Serpine1,扩增条件为63℃保温30min,扩增后产物通过特异性内切酶进行鉴定。结果RT-LAMP能特异性快速的扩增目的基因。结论RT-LAMP能因其特异,快速,高效的优点可以广泛运用于肿瘤转移相关基因的检测,对临床早期诊断提供标准。; 关键词胃肿瘤肿瘤转移; 分类号 R735.2 [医药卫生—肿瘤] R73-37 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名环介导等温扩增技术的应用和发展被引量：15: 3; 作者唐毕锋马立业曹广文; 机构第二军医大学附属长海医院普通外科第二军医大学流行病学教研室; 出处《实用医学杂志》 CAS 2008年第22期3972-3974,共3页; 文摘核酸扩增是生命科学领域的常用研究工具．20世纪80年代出现的聚合酶链反应（PCR）得到了广泛的应用，但该方法需要特殊的仪器、模板的热变性及长时间的温度循环。20世纪90年代出现了几种核酸等温扩增方法：核酸等温扩增法、自序列复制法和链置换扩增法等．它们或者需要精密的仪器，或者在产物检测方面相当繁琐，或者特异性不高等，均限制了其广泛应用。; 关键词扩增技术介导聚合酶链反应核酸扩增生命科学扩增方法产物检测扩增法; 分类号 R450 [医药卫生—治疗学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人脐静脉内皮细胞的长期传代培养被引量：10: 4; 作者何红兵仲剑平; 机构珠江医院普外科第二军医大学附属长海医院普通外科; 出处《第一军医大学学报》 CSCD 1990年第4期312-315,共4页; 文摘本实验在纤维连接蛋白(Fibronectin,Fn)预处理的塑料培养皿上,用199培养基(内含20％小牛血清)。成功地将人脐静脉内皮细胞以1:2-3比率传代培养两个月,传15代。培养细胞具有第Ⅷ因子相关抗原;胞质中存在Weible-Palade小体;细胞倍增时间为24h;培养4—6天,细胞单层融合,复苏成功率为70％左右;染色体检查2n=46。培养50天内,条件培养液中均检测到Von Willebrand因子和6-keto-PGF。; 关键词内皮细胞脐静脉传代培养; Keywords endothelium umbilical cord vein subculture; 分类号 Q2－33 [生物学—细胞生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名共表达ENDO-VEGI_(151)和survivin-siRNA双功能质粒的构建及其抗瘤活性被引量：1: 5; 作者李喆石林祥杨生生常涛房林方国恩; 机构同济大学附属第十人民医院甲状腺乳腺外科第二军医大学生物化学与分子生物学教研室第二军医大学附属长海医院普通外科; 出处《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期394-399,共6页; 基金国家自然科学基金资助项目(No.51003078) 上海市卫生局科研课题(No.2008133)~~; 文摘目的:构建pCDNA3.1-ENDO-VEGI151/survivin-shRNA(pEV/si-survivin)双功能表达质粒,观察其对乳腺癌细胞MDA-MB-231和人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUEVC)增殖和凋亡的影响,探讨其治疗肿瘤的可行性。方法:利用MDA-MB-231细胞筛选获得survivin的高效siRNA序列,构建pEV/si-survivin表达质粒并分别转染MDA-MB-231和HUEVC,以real-time PCR和Western blotting检测转染细胞中ENDO-VEGI151和survivin的表达;MTT法检测细胞增殖抑制情况,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡。结果:成功构建pEV/si-survivin双功能表达质粒,并能在MDA-MB-231和HUEVC中正确表达相应基因产物。该质粒可明显抑制MDA-MB-231细胞内survivin的表达,并抑制细胞增殖[48、72 h的抑制率为(39.36±4.16)%、(48.43±3.49)%],促进MDA-MB-231细胞凋亡[(18.33±1.48)%vs(4.80±1.01)%,P<0.01)和细胞周期阻滞(P<0.05);该质粒也明显抑制HUEVC的增殖[(48、72 h的抑制率为(38.16±3.37)%、(53.75±4.53)%),并促进HUEVC凋亡和细胞周期阻滞(P<0.05)。结论:成功构建的pEV/si-survivin双功能表达质粒可以同时发挥抑制新生血管生成和促肿瘤细胞凋亡的作用,提高抗肿瘤的效果。; 关键词乳腺癌 survivin 抗血管生成凋亡基因治疗; Keywords breast cancer survivin anti-angiogenensis apoptosis gene therapy; 分类号 R737.9 [医药卫生—肿瘤] R730.54 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名论胰腺癌手术的术式选择被引量：2: 6; 作者金钢胡先贵; 机构第二军医大学附属长海医院普通外科; 出处《医学与哲学》北大核心 2005年第3期41-41,44,共2页; 文摘胰腺癌是一种高度恶性的腹部肿瘤。胰腺癌切除手术是一种高风险手术 ,如果病例选择或处理不当会造成严重后果。从哲学的高度更新指导思想和方法 ,对胰腺癌术式的合理选择以及提高胰腺癌治疗效果大有裨益。; 关键词胰腺癌治疗手术适应证; Keywords pancreatic cancer therapy operation indication; 分类号 R-02 [医药卫生] R735.9 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名可诱导表达mIL-12单链融合蛋白的腺病毒载体的构建: 7; 作者陈坚薛绪潮方国恩苏长青钱其军; 机构解放军第第二军医大学附属长海医院普通外科东方肝胆医院病毒基因治疗实验室; 出处《实用医学杂志》 CAS 2008年第16期2738-2741,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目(编号:30571830); 文摘目的:构建带mIL-12单链融合蛋白基因并可经RU486诱导表达的重组腺病毒载体,以期用于体内的基因治疗研究。方法:构建穿梭质粒pDC-RUmIL-12,使mIL-12单链融合蛋白基因和启动子在RU486诱导表达系统调控之下,酶切、测序鉴定正确后,将其与Admax腺病毒包装系统的辅助质粒共转染HEK293细胞后,构建出可调控的重组腺病毒载体,用mIL-12引物对病毒进行鉴定。氯化铯密度梯度离心纯化病毒,最终稀释法测定其滴度,并在结肠癌SW620细胞中Western Blot和ELISA法检测其基因调控效果。结果:经PCR鉴定证实可调控腺病毒载体Ad-RUmIL-12构建正确,病毒滴度达到4.62×1010pfu/mL。当给予诱导剂RU486后,腺病毒载体可以诱导表达mIL-12单链融合蛋白,表达量随着诱导剂浓度而增加,而没有RU486时,几乎没有mIL-12蛋白的表达。结论:成功构建了重组腺病毒Ad-RUmIL-12,可以通过RU486诱导mIL-12单链融合蛋白的表达,为下一步体内基因治疗奠定了良好的基础。; 关键词白细胞介素12 腺病毒科遗传载体基因调控 RU486; Keywords Interleukin-12 Adenoviridae Genetic vectors Gene regulation RU486; 分类号 R346 [医药卫生—基础医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	兔骨髓源性血管内皮祖细胞的分离、培养及鉴定	吴波卢正茂王尧罗天航薛绪潮毕建威康俊升方国恩	《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD	2010	14	在线阅读下载PDF 职称材料
2	胃癌相关基因Serpine1的RT-LAMP快速检测法	徐凌殷建华朱秀唐毕锋曹广文邓松华	《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心	2007	7	在线阅读下载PDF 职称材料
3	环介导等温扩增技术的应用和发展	唐毕锋马立业曹广文	《实用医学杂志》 CAS	2008	15	在线阅读下载PDF 职称材料
4	人脐静脉内皮细胞的长期传代培养	何红兵仲剑平	《第一军医大学学报》 CSCD	1990	10	在线阅读下载PDF 职称材料
5	共表达ENDO-VEGI_(151)和survivin-siRNA双功能质粒的构建及其抗瘤活性	李喆石林祥杨生生常涛房林方国恩	《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心	2011	1	在线阅读下载PDF 职称材料
6	论胰腺癌手术的术式选择	金钢胡先贵	《医学与哲学》北大核心	2005	2	在线阅读下载PDF 职称材料
7	可诱导表达mIL-12单链融合蛋白的腺病毒载体的构建	陈坚薛绪潮方国恩苏长青钱其军	《实用医学杂志》 CAS	2008	0	在线阅读下载PDF 职称材料