免疫介质与肝纤维化 被引量：7

1

作者 高锋 孔宪涛 《临床肝胆病杂志》 CAS 1993年第2期59-61,共3页

肝纤维化是肝硬化前期组织学改变,为病理学上的一种形态诊断。肝纤维化的发病机制至今不明,研究表明免疫调节在其中起重要的作用。免疫介质也称细胞因子,是一类由单核巨噬细胞、淋巴细胞等分泌的多肽物质。

关键词 免疫介质 肝纤维化 肝硬变

在线阅读 下载PDF 职称材料

应用PCR检测恶性淋巴瘤骨髓浸润及其临床意义 被引量：2

2

作者 吕鸣 孔宪涛 黄隆安 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第6期554-557,共4页

目的：检测恶性淋巴瘤（ＭＬ）的骨髓浸润（ＩＢＭ）并探讨其与临床分期、疗效和预后的关系。方法：以克隆性ＩｇＨ和ＴＣＲγ基因重排分别作为Ｂ和Ｔ细胞淋巴瘤克隆基因标志，应用ＰＣＲ基因扩增技术检测ＭＬ患者ＩＢＭ。结果：（１）... 目的：检测恶性淋巴瘤（ＭＬ）的骨髓浸润（ＩＢＭ）并探讨其与临床分期、疗效和预后的关系。方法：以克隆性ＩｇＨ和ＴＣＲγ基因重排分别作为Ｂ和Ｔ细胞淋巴瘤克隆基因标志，应用ＰＣＲ基因扩增技术检测ＭＬ患者ＩＢＭ。结果：（１）３４份ＭＬ患者骨髓标本ＩＢＭ检出率为７０．６％（２４／３４），明显高于形态学检测方法（３８．６％，Ｐ＜０．０５）。（２）１９例形态学检测正常的非霍奇金淋巴瘤（ＮＨＬ）骨髓标本，ＩＢＭ阳性率５７．９％（１１／１９），其中８例Ｂ－ＮＨＬ（８／１４）检测到克隆性ＩｇＨ基因重排；５例同时还检测到克隆性ＴＣＲγ基因重排，２例Ｔ－ＮＨＬ（２／３）检测到克隆性ＴＣＲγ基因重排，无克隆性ＩｇＨ基因重排；２例免疫分型不明确ＮＨＬ患老中１例（１／２）检测到克隆性ＩｇＨ基因重排，无克隆性ＴＣＲ，基因重排。２例霍奇金病（ＨＤ）和１０例非淋巴系肿瘤骨髓ＩＢＭ均阴性。（３）Ⅲ，Ⅳ期ＮＨＬ患者ＩＢＭ检出率显著高于ＩＩ期（ｐ＜０．０１），初诊未治及复发患者也显著高于部分或完全缓解患者（Ｐ＜０．０１）。（４）ＩＢＭ阳性组ＮＨＬ２年死亡率５４．５％（６／１１），明显高于ＩＢＭ阴性（ｐ＜０．０５）。结论：ＰＣＲ方法检测ＩＢＭ有助于估? 展开更多

关键词 恶性 淋巴瘤 骨髓浸润 基因重排 聚合酶链反应

在线阅读 下载PDF 职称材料

IL－2和TNF特异性基因治疗后肝癌组织病理及免疫组化分析 被引量：1

3

作者 曹广文 余永伟 +4 位作者 沈茜 杜平 杨文国 孔宪涛 戚中田 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第6期509-512,共4页

目的：探讨ＴＮＦ和ＩＬ－２基因治疗后实验性肝癌瘤体内细胞水平的改变。方法：应用病理检查和免疫组化分析对ＩＬ－２和ＴＮＦ转基因治疗后的实验性肝癌病理改变及免疫细胞浸润进行分析。结果：发现受白蛋白增强子／启动子转录调控的... 目的：探讨ＴＮＦ和ＩＬ－２基因治疗后实验性肝癌瘤体内细胞水平的改变。方法：应用病理检查和免疫组化分析对ＩＬ－２和ＴＮＦ转基因治疗后的实验性肝癌病理改变及免疫细胞浸润进行分析。结果：发现受白蛋白增强子／启动子转录调控的ＩＬ－２和ＴＮＦ基因在原位感染实验性肝癌可使肝癌逐渐缩小。ＴＮＦ基因可使肝癌组织内广泛出血坏死，Ｍａｃ－１＋炎细胞浸润为主；ＩＬ－２基因可使肝癌组织内大片坏死，Ｌｙｔ２＋炎细胞浸润，两组治疗后期均出现明显的纤维化。结论：ＩＬ－２或ＴＮＦ肝癌特异性原位基因治疗介导免疫抗肿瘤反应，但机理有所不同。 展开更多

关键词 肝肿瘤 基因治疗 肿瘤坏死因子 白细胞介素2

在线阅读 下载PDF 职称材料

自身免疫性疾病研究中的几个问题 被引量：6

4

作者 仲人前 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期391-393,共3页

自身免疫性疾病是由于正常免疫耐受功能受损导致免疫细胞及其成分对自身组织结构和功能的破坏，并出现一定临床表现的一类疾病。尽管具有一些共性，如常呈慢性发作、多发于女性、血清中存在特异或非特异性自身抗体、激素或免疫抑制剂治... 自身免疫性疾病是由于正常免疫耐受功能受损导致免疫细胞及其成分对自身组织结构和功能的破坏，并出现一定临床表现的一类疾病。尽管具有一些共性，如常呈慢性发作、多发于女性、血清中存在特异或非特异性自身抗体、激素或免疫抑制剂治疗有效，但其发病机制仍是众说纷坛，临床治疗效果不甚理想。近年来由于边缘学科及本身免疫学科的迅速发展，对自身免疫性疾病的研究也越来越深入，研究热点层出不穷。本文就其中的几个研究热点如Ｔ细胞亚群及细胞因子、细胞凋亡、相关基因、自身抗体的检测，以及该病与其他疾病的关系作一文献综述。 展开更多

关键词 自身免疫疾病 细胞因子 自身抗体 细胞凋亡

在线阅读 下载PDF 职称材料

γ射线照射后小鼠骨髓造血细胞凋亡及Fas表达的研究 被引量：11

5

作者 李百龙 杨如俊 +5 位作者 项莺松 吴玮 蔡建明 闵锐 李雨 张玲珍 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第8期516-518,共3页

目的：研究γ射线照射后小鼠骨髓造血细胞凋亡及其与 Ｆａｓ 表达的关系。方法：采用电镜、 Ｄ Ｎ Ａ 琼脂糖凝胶电泳及流式细胞术观察小鼠经６０ Ｃｏ γ射线照射后不同时间的骨髓造血细胞凋亡及 Ｆａｓ 的表达情况。结果：在照射后４ ... 目的：研究γ射线照射后小鼠骨髓造血细胞凋亡及其与 Ｆａｓ 表达的关系。方法：采用电镜、 Ｄ Ｎ Ａ 琼脂糖凝胶电泳及流式细胞术观察小鼠经６０ Ｃｏ γ射线照射后不同时间的骨髓造血细胞凋亡及 Ｆａｓ 的表达情况。结果：在照射后４ ｈ 细胞即出现核固缩、染色质凝集； Ｄ Ｎ Ａ 琼脂糖凝胶电泳有大量的小分子片段，呈典型“梯状”图谱；流式细胞术分析表明，凋亡细胞百分率在照射后４ ｈ 明显增加，８ ｈ 达到高峰；照后４ ｈ， Ｆａｓ 表达显著增强。结论：γ射线照射后可引起骨髓造血细胞凋亡， Ｆａｓ 可能参与了辐射诱导的造血细胞凋亡过程。 展开更多

关键词 造血细胞凋亡 FAS Γ射线 骨髓型 放射损伤

在线阅读 下载PDF 职称材料

小鼠α2(Ⅰ)型原胶原基因启动子活性研究 被引量：9

6

作者 高春芳 王皓 +1 位作者 黄超 孔宪涛 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第10期733-736,共4页

目的： 明确纤维化形成中调控Ⅰ型胶原基因高水平转录的启动子片段，逐段研究小鼠α２（Ⅰ）原胶原基因２ ｋｂ 的启动子序列。方法： 从小鼠α２（Ⅰ）原胶原基因转录起始点上游－ ２ ｋｂ～＋ ５４ ｂｐ 的片段中，取长度不等的片段... 目的： 明确纤维化形成中调控Ⅰ型胶原基因高水平转录的启动子片段，逐段研究小鼠α２（Ⅰ）原胶原基因２ ｋｂ 的启动子序列。方法： 从小鼠α２（Ⅰ）原胶原基因转录起始点上游－ ２ ｋｂ～＋ ５４ ｂｐ 的片段中，取长度不等的片段作为启动子，与含氯霉素乙酰基转移酶（ＣＡＴ）报告基因的质粒组成６ 个重组体，脂质体转染法转染上述重组体至胶原产生细胞（ＮＩＨ３Ｔ３）和非胶原产生细胞（ＣＯＳ７）， ＣＡＴ－ＥＬＩＳＡ测定细胞ＣＡＴ表达水平以比较各重组体的启动子活性。结果： － ７８０～＋ ５４ ｂｐ 序列具有最高启动ＣＡＴ表达活性且有不完全细胞特异性，缺失近转录起始点５００ ｂｐ， 即－ ２～－ ０．５ ｋｂ 片段的启动子活性最低。结论： 近转录起始点５００ ｂｐ 的序列为小鼠α２（Ⅰ）原胶原基因启动激活所必需，－ ７８０～＋ ５４ ｂｐ 片段有高启动活性，并有望以此序列发现纤维化相关的特异ＤＮＡ 展开更多

关键词 基因 启动子 肝纤维化 α2(Ⅰ)型胶原

在线阅读 下载PDF 职称材料

葵样细胞:凋亡的特征性形态改变 被引量：6

7

作者 鲍一笑 孔宪涛 +3 位作者 叶挺军 李莉 张玲珍 张登海 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期273-276,F003,共5页

目的：观察雷公藤红素诱导人肥大细胞系（ＨＭＣ－１）细胞凋亡过程中细胞形态的变化，并探讨其意义。方法：在ＨＭＣ－１细胞培养体系中加入雷公藤红素，用光镜、电镜观察细胞的形态变化，用ＴＵＮＥＬ和流式细胞术（ＦＣＭ）检测细胞... 目的：观察雷公藤红素诱导人肥大细胞系（ＨＭＣ－１）细胞凋亡过程中细胞形态的变化，并探讨其意义。方法：在ＨＭＣ－１细胞培养体系中加入雷公藤红素，用光镜、电镜观察细胞的形态变化，用ＴＵＮＥＬ和流式细胞术（ＦＣＭ）检测细胞凋亡。结果：细胞在雷公藤红素作用下呈葵样改变：细胞母体居中，周边围以形成或正在形成的凋亡小体。葵样细胞（ｓｕｎｆｌｏｗｅｒ－ｌｉｋｅｃｅｌ，ＳＬＣ）对锥虫蓝拒染，可伴有核染色质浓缩和着边，药物作用２０ｍｉｎ即可形成，持续数小时后完全裂解为凋亡小体，或凋亡小体游离，残留细胞母体，最后崩溃；ＳＬＣ的形成具有时间和药物浓度依赖性；在８ｈ内与ＴＵＮＥＬ标记和碘化丙啶染色／ＦＣＭ检测的凋亡结果有显著相关性；ＳＬＣ清晰易辨，个体内和个体间计数重复性良好。结论：ＳＬＣ是凋亡细胞的特征性形态改变，可作为检测ＨＭＣ－１细胞凋亡的定性和定量指标。 展开更多

关键词 肥大细胞 葵样细胞 细胞凋亡 雷公藤公素

在线阅读 下载PDF 职称材料

一步亲和纯化制备基因工程人源抗HBs单克隆抗体Fab片段 被引量：6

8

作者 胡栋平 韩焕兴 +2 位作者 尤长宣 罗荣城 毛庆民 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期50-52,共3页

目的：探索亲和纯化人源单克隆抗体片段的简便实用方法。方法：应用自制的抗人免疫球蛋白片段抗体（Ａｎｔｉ－Ｆａｂ）与链球菌蛋白Ｇ亲和胶（Ｇａｍ ｍ ａ Ｂｉｎｄ）交联制备亲和层析柱，用一步法从工程菌培养上清中纯化人源抗ＨＢ... 目的：探索亲和纯化人源单克隆抗体片段的简便实用方法。方法：应用自制的抗人免疫球蛋白片段抗体（Ａｎｔｉ－Ｆａｂ）与链球菌蛋白Ｇ亲和胶（Ｇａｍ ｍ ａ Ｂｉｎｄ）交联制备亲和层析柱，用一步法从工程菌培养上清中纯化人源抗ＨＢｓ单克隆Ｆａｂ 片段。经依沙吖啶沉淀、离子交换、分子筛纯化人混合血清提取ＩｇＧ组分，木瓜酶处理后分离、纯化出Ｆａｂ，免疫绵羊制备高效价抗血清。用Ｇａｍ ｍ ａＢｉｎｄ 一步纯化出抗血清中的ＩｇＧ组分，再将该ＩｇＧ经交联剂与Ｇａｍ ｍ ａ Ｂｉｎｄ 交联后制成亲和胶。人源抗ＨＢｓ阳性菌培养上清与亲和胶共育后装柱，ＰＢＳ洗去非特异结合蛋白，再用５ ｍ ｏｌ／Ｌ氯化锂洗脱特异Ｆａｂ。结果：聚丙烯酰胺电泳纯化产物显示，纯化后的抗体片段在电泳中形成单一区带，达到电泳纯；用酶标抗Ｆａｂ 抗体免疫印迹结果证明，电泳显示的单一区带为Ｆａｂ 蛋白区带；抗原特异Ｄｏｔｂｌｏｔ检测表明，该法制备出的Ｆａｂ 保持了抗原结合活性。结论：本实验建立的一步亲和纯化法具操作简便、纯化快速和高效的特点，是人源性单克隆抗体Ｆａｂ 展开更多

关键词 乙型肝炎 抗HBS 单克隆抗体 FAB片段

在线阅读 下载PDF 职称材料

子宫内膜异位症患者外周血及腹腔液中自然杀伤细胞的测定 被引量：3

9

作者 李文 杨帆 +3 位作者 杨云纺 金志军 张玲珍 李立 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期133-134,共2页

很多证据表明子宫内膜异位症（ＥＭ）与免疫机能的改变有着密切的关系。自然杀伤（ＮＫ）细胞是人体免疫的第一线防御细胞，在体内多种生理及病理过程中均发挥着重要作用。本研究对ＥＭ患者外周血及腹腔液ＮＫ细胞活性及数量进行检测，... 很多证据表明子宫内膜异位症（ＥＭ）与免疫机能的改变有着密切的关系。自然杀伤（ＮＫ）细胞是人体免疫的第一线防御细胞，在体内多种生理及病理过程中均发挥着重要作用。本研究对ＥＭ患者外周血及腹腔液ＮＫ细胞活性及数量进行检测，以探讨ＮＫ细胞在ＥＭ发病机制中的作... 展开更多

关键词 子宫内膜异位 外周血 腹腔液 自然杀伤细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

自身抗原Ro-60 cDNA克隆构建及表达 被引量：4

10

作者 邓安梅 仲人前 孔宪涛 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期20-22,共3页

目的：采用基因工程方法克隆并表达自身抗原Ｒｏ－６０融合蛋白。方法：用ＰＣＲ法克隆Ｒｏ－６０多肽分子的ｃＤＮＡ，经测序证实后定向插入表达载体ｐＧＥＸ－２Ｔ，并经酶切电泳鉴定。进而导入大肠杆菌ＪＭ１０９中表达重组融合蛋白... 目的：采用基因工程方法克隆并表达自身抗原Ｒｏ－６０融合蛋白。方法：用ＰＣＲ法克隆Ｒｏ－６０多肽分子的ｃＤＮＡ，经测序证实后定向插入表达载体ｐＧＥＸ－２Ｔ，并经酶切电泳鉴定。进而导入大肠杆菌ＪＭ１０９中表达重组融合蛋白。结果：经蛋白印迹证实，重组融合蛋白具有Ｒｏ抗原性。结论：重组融合蛋白可用于对Ｒｏ抗原表位的精确定位，分析特定抗原表位与疾病的相关性及制备重组抗原用于临床检测。 展开更多

关键词 自身抗原 聚合酶链反应 CDNA Ro-60抗原 克隆

在线阅读 下载PDF 职称材料

^(131)I人源抗HBs Fab在裸鼠人肝癌模型定位的研究 被引量：4

11

作者 吴桂臣 罗荣城 +5 位作者 韩焕兴 尤长宣 丁雪梅 李爱民 王传斌 张鸣江 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2000年第4期288-290,共3页

目的 :在人源抗HBsFab表达载体构建、抗体片段表达及纯化成功后 ,进行放射免疫显像研究 ,以评价其在动物模型中的免疫导向活性。方法 :用13 1I标记人源抗HBsFab ,经腹腔注射 1,3,5 ,7d后行裸鼠人肝癌模型放射免疫显像 ,于第 7天作组织... 目的 :在人源抗HBsFab表达载体构建、抗体片段表达及纯化成功后 ,进行放射免疫显像研究 ,以评价其在动物模型中的免疫导向活性。方法 :用13 1I标记人源抗HBsFab ,经腹腔注射 1,3,5 ,7d后行裸鼠人肝癌模型放射免疫显像 ,于第 7天作组织分布测定 ,并以鼠源抗HBsAg单抗为对照进行比较。 结果 :实验组在标记抗体注入后第 3天即获阳性显像 ,第 5天更加清晰 ,此时人源抗HBsFab、鼠源单抗及无关Fab的瘤 /肝放射性比值分别为 5 .4,4.0和 0 .9。结论 :人源抗HBsFab具有良好的导向活性 ,为其用于肝癌的导向治疗提供了实验依据。 展开更多

关键词 肝细胞癌 裸鼠 单克隆抗体 碘^131I-人源抗HBs-Fab

在线阅读 下载PDF 职称材料

生物工程技术制备人源抗-HBs Fab片段 被引量：4

12

作者 安峰 陈玉川 +1 位作者 陆慧琦 韩焕兴 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期74-76,共3页

目的:用生物工程技术制备人源性抗-HBs F-ah。方法:将从抗体文库中筛选出的人源抗-HBs Fab基因克隆人pBAD/gⅢA载体,进而转化Top10大肠杆菌。对重组质粒菌发酵表达后,利用Ni-NTA-Agarose螯合层析柱纯化周质腔可溶性Fab 蛋白。对所得包... 目的:用生物工程技术制备人源性抗-HBs F-ah。方法:将从抗体文库中筛选出的人源抗-HBs Fab基因克隆人pBAD/gⅢA载体,进而转化Top10大肠杆菌。对重组质粒菌发酵表达后,利用Ni-NTA-Agarose螯合层析柱纯化周质腔可溶性Fab 蛋白。对所得包涵体依次变性、溶解、纯化后,利用透析进行复性。用Western blot检测Fab蛋白的特异性,Dot blot测定其生物学活性。结果:经Ni-NTA-Agarose柱纯化的周质腔可溶性Fab蛋白,有较好的生物学活性,并且总量达到80mg/L。对所获包涵体进行透析复性后,也可得到少量有活性的蛋白,但比例很小。结论:用pBAD/gⅢA-Top10表达系统表达人源抗-HBs Fab片段,发酵培养后,经有效纯化可得到生物学活性较好的可溶性蛋白,为人源抗-HBs Fab片段的大量制备提供了有效手段。 展开更多

关键词 FAB片段 六聚组氨酸尾 亲和层析 生物工程技术

在线阅读 下载PDF 职称材料

四氯化碳诱发大鼠肝硬变过程中血清和肝组织透明质酸含量的变化 被引量：4

13

作者 高锋 曹曼林 孔宪涛 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第4期333-335,共3页

用四氯化碳诱发大鼠出现肝脏纤维化，采用ＥＬＩＳＡ方法检测大鼠血清和肝组织匀浆中透明质酸（Ｈｙａｌｕｒｏｎａｔｅ，ＨＡ）的含量，并分析ＨＡ与肝组织病理改变之间的关系。结果发现，血清ＨＡ含量在大鼠肝脏受损后早期即增加，并... 用四氯化碳诱发大鼠出现肝脏纤维化，采用ＥＬＩＳＡ方法检测大鼠血清和肝组织匀浆中透明质酸（Ｈｙａｌｕｒｏｎａｔｅ，ＨＡ）的含量，并分析ＨＡ与肝组织病理改变之间的关系。结果发现，血清ＨＡ含量在大鼠肝脏受损后早期即增加，并随肝组织损伤程度的加重而升高。肝组织内ＨＡ含量在肝硬变完全形成期时才明显高于正常组，与肝组织病理改变没有明显相关性。提示血清ＨＡ含量是早期判断肝细胞损伤和肝纤维化程度的有用指标。 展开更多

关键词 四氯化碳 透明质酸 肝硬变 大鼠

在线阅读 下载PDF 职称材料

鼻咽癌组织中BHRF1基因的研究 被引量：3

14

作者 黄海 潘星华 +6 位作者 周水淼 李兆基 温武 余龙 孔宪涛 孙喜元 傅强 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期85-86,共2页

目的：探讨鼻咽癌组织中ＥＢ病毒基因ＢＨＲＦ１的存在和表达与癌细胞分化及其患者预后间的关系。方法：利用斑点杂交技术检测鼻咽未分化癌、低分化及高分化鳞癌中ＢＨＲＦ１的存在和表达情况，并且观察患者对放疗的效果。结果：ＢＨＲ... 目的：探讨鼻咽癌组织中ＥＢ病毒基因ＢＨＲＦ１的存在和表达与癌细胞分化及其患者预后间的关系。方法：利用斑点杂交技术检测鼻咽未分化癌、低分化及高分化鳞癌中ＢＨＲＦ１的存在和表达情况，并且观察患者对放疗的效果。结果：ＢＨＲＦ１的存在与表达与鼻咽癌的分化无关，但其表达可导致癌细胞对辐射敏感性的下降（Ｐ＜０．０１）。结论：ＢＨＲＦ１在鼻咽癌细胞中的表达可增强其抵抗辐射诱发细胞凋亡的能力，这在鼻咽癌诊断、治疗和预后判断上具有重要意义。 展开更多

关键词 EB病毒基因 鼻咽肿瘤 细胞分化

在线阅读 下载PDF 职称材料

人源性抗HBsAg单克隆抗体Fab片段的制备及其纯化 被引量：2

15

作者 范列英 韩焕兴 +1 位作者 胡东平 孔宪涛 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期334-336,共3页

目的：制备人源性重组ＨＢｓＡｇ抗体Ｆａｂ片段。方法：采用固相ＨＢｓＡｇ，从已建立的人源性抗体组合文库中筛选针对ＨＢｓＡｇ的抗体子文库，并转入大肠杆菌中表达。反复冻融细菌，获得可溶性Ｆａｂ片段。制备羊抗人ＩｇＧＦａｂ抗... 目的：制备人源性重组ＨＢｓＡｇ抗体Ｆａｂ片段。方法：采用固相ＨＢｓＡｇ，从已建立的人源性抗体组合文库中筛选针对ＨＢｓＡｇ的抗体子文库，并转入大肠杆菌中表达。反复冻融细菌，获得可溶性Ｆａｂ片段。制备羊抗人ＩｇＧＦａｂ抗体亲和层析柱、纯化Ｆａｂ片段。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及点印迹法分析鉴定纯化后Ｆａｂ片段的纯度及结合ＨＢｓＡｇ的能力。结果：蛋白印迹显示转化后的细菌内有可溶性Ｆａｂ片段的表达。纯化后的Ｆａｂ片段达免疫纯，并具有特异性结合ＨＢｓＡｇ的能力。结论：该研究为人源性抗ＨＢｓＡｇＦａｂ用于临床治疗打下基础。 展开更多

关键词 乙肝病毒 表面抗原 抗体 FAB片段 纯化

在线阅读 下载PDF 职称材料

TNF诱导肿瘤细胞产生氧自由基 被引量：2

16

作者 李进 孔宪涛 +4 位作者 赵亚南 沙金 燕惠宁 朱玲仙 张其 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期51-53,共3页

目的：了解氧自由基的产生与ＴＮＦ抗肿瘤活性之间的关系。方法：采用３Ｈ－ＴｄＲ摄入法测定ＴＮＦ对胃癌细胞株Ｘ－１０８、卵巢癌细胞株３ＡＯ和ＡＯ肿瘤细胞的杀伤活性；用细胞色素Ｃ氧化法测定靶细胞经ＴＮＦ刺激后产生的超氧离子... 目的：了解氧自由基的产生与ＴＮＦ抗肿瘤活性之间的关系。方法：采用３Ｈ－ＴｄＲ摄入法测定ＴＮＦ对胃癌细胞株Ｘ－１０８、卵巢癌细胞株３ＡＯ和ＡＯ肿瘤细胞的杀伤活性；用细胞色素Ｃ氧化法测定靶细胞经ＴＮＦ刺激后产生的超氧离子水平。结果：ＴＮＦ对Ｘ－１０８、ＡＯ有较明显的杀伤活性，３Ｈ－ＴｄＲ摄入量的降低与ＴＮＦ浓度的增加一致，而３ＡＯ则对ＴＮＦ呈明显的抵抗。Ｘ－１０８细胞株在经ＴＮＦ处理８ｈ后即可检测出超氧离子，并且在２４ｈ后达到高峰。Ｘ－１０８和ＡＯ细胞内超氧离子的水平与ＴＮＦ的剂量有关。对于抵抗ＴＮＦ的３ＡＯ卵巢癌细胞株，其超氧离子的水平与对照组无明显差别。阿霉素能够增强ＴＮＦ诱导氧自由基的能力。结论：ＴＮＦ的受体后效应——自由基的产生可能是ＴＮＦ杀伤靶细胞的重要机制之一。 展开更多

关键词 肿瘤坏死因子 肿瘤 肿瘤细胞 氧自由基

在线阅读 下载PDF 职称材料

左氧氟沙星壳聚糖微球对兔海水浸泡创伤的早期治疗作用 被引量：3

17

作者 沈宏亮 王强 +2 位作者 钱方 李扬 范列英 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期262-264,共3页

目的 了解早期应用左氧氟沙星壳聚糖微球对兔海水浸泡创伤的治疗作用。方法 建立兔软组织海水浸泡伤模型。比较对照组（n=8）、原料药组（n=8）和局部应用左氧氟沙星壳聚糖微球组（n=8）在海水浸泡前和浸泡结束后6、12、24、48、72h创... 目的 了解早期应用左氧氟沙星壳聚糖微球对兔海水浸泡创伤的治疗作用。方法 建立兔软组织海水浸泡伤模型。比较对照组（n=8）、原料药组（n=8）和局部应用左氧氟沙星壳聚糖微球组（n=8）在海水浸泡前和浸泡结束后6、12、24、48、72h创伤局部菌落计数、血浆内毒素、局部组织和血浆TNF-a水平，以及后两组浸泡后72h局部组织和血浆中左氧氟沙星浓度的变化。结果 海水浸泡后6h起微球组和原料药组菌落计数明显低于对照组（P〈0．01）。浸泡后48h起微球组菌落计数较原料药组更低（P〈0．01）。微球组于海水浸泡后6～72h、原料药组于浸泡后6～48h血浆内毒素水平低于对照组（P〈０．01）。微球组在海水浸泡后6～72h、原料药组在浸泡后6～24h局部组织TNF－a浓度低于对照组（P〈0．01或P〈0．05）；微球组在海水浸泡后12～72h、原料药组在海水浸泡后12～48h血浆TNF－a浓度低于对照组（P〈０．01）。微球组局部组织药物浓度升高较原料药组缓慢，并能在72h内维持较高的抗菌药浓度。微球组血浆药物浓度变化也较原料药组平缓。结论　该药物微球如局部应用于海水浸泡伤口，可缓慢释出抗菌药物，发挥抑制局部感染、减少局部组织继发损伤的作用。 展开更多

关键词 创伤和损伤 海水 氧氟沙星 壳聚糖

在线阅读 下载PDF 职称材料

脑胶质瘤浸润淋巴细胞的分离、培养、NK细胞活性和T细胞表型研究 被引量：2

18

作者 李有君 朱诚 +2 位作者 张光霁 周小平 孔宪涛 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1993年第3期152-154,共3页

本文应用酶消化和不连续密度梯度离心法,从9例原发性脑胶质瘤手术切除的瘤组织中分离出胶质瘤浸润淋巴细胞(GIL),在含IL-2培养液内培养4周,GIL 平均扩增48.4倍,最高达118倍;新制备GIL 的NK 活性极低,经过1周培养,NK 活性明显升高;新制备... 本文应用酶消化和不连续密度梯度离心法,从9例原发性脑胶质瘤手术切除的瘤组织中分离出胶质瘤浸润淋巴细胞(GIL),在含IL-2培养液内培养4周,GIL 平均扩增48.4倍,最高达118倍;新制备GIL 的NK 活性极低,经过1周培养,NK 活性明显升高;新制备GIL 中CD_3^+细胞为71.0士11.9%,其中CD_8^+细胞多于CD_4^+细胞。 展开更多

关键词 脑胶质瘤 淋巴细胞 天然 杀伤细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

BHRF1反义寡核苷酸对BHRF1-CNE2细胞生存能力的影响 被引量：2

19

作者 黄海 周江红 +2 位作者 潘星华 余龙 孔宪涛 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第10期720-722,共3页

目的：探讨ＢＨＲＦ１ 反义寡核苷酸对表达ＢＨＲＦ１ 的鼻咽癌细胞株ＣＮＥ２ 生存能力的影响。方法：检测反义阻断ＢＨＲＦ１ 表达后ＢＨＲＦ１－ＣＮＥ２细胞在喜树碱作用下增殖能力和凋亡指数的变化。结果：在喜树碱作用下，应用Ｂ... 目的：探讨ＢＨＲＦ１ 反义寡核苷酸对表达ＢＨＲＦ１ 的鼻咽癌细胞株ＣＮＥ２ 生存能力的影响。方法：检测反义阻断ＢＨＲＦ１ 表达后ＢＨＲＦ１－ＣＮＥ２细胞在喜树碱作用下增殖能力和凋亡指数的变化。结果：在喜树碱作用下，应用ＢＨＲＦ１ 反义寡核苷酸组的癌细胞较对照组的增殖率下降，凋亡率增高。结论：反义阻断ＢＨＲＦ１的表达可降低ＣＮＥ２细胞的生存能力。 展开更多

关键词 鼻咽肿瘤 BHRF1基因 反义寡核苷酸 CNE2细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

寻常型天疱疮自身抗原Dsg3片段的重组表达和特异性细胞反应 被引量：1

20

作者 邓安梅 仲人前 +2 位作者 陈孙孝 周晔 孔宪涛 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期204-206,共3页

目的 :探讨寻常型天疱疮自身抗原Dsg3在特异性T细胞反应中的作用 ,为自身免疫性疾病机制的研究提供依据。方法 :根据Genbank中的Dsg3序列分析 ,采用RT PCR法克隆自身抗原Dsg3E1,E2 ,E3,E4,E5多肽片段的cDNA ,定向插入表达载体PGEX 2T ,... 目的 :探讨寻常型天疱疮自身抗原Dsg3在特异性T细胞反应中的作用 ,为自身免疫性疾病机制的研究提供依据。方法 :根据Genbank中的Dsg3序列分析 ,采用RT PCR法克隆自身抗原Dsg3E1,E2 ,E3,E4,E5多肽片段的cDNA ,定向插入表达载体PGEX 2T ,导入大肠杆菌JM10 9中表达重组融合蛋白并经GST层析柱纯化 ;进一步与PV患者及疾病对照组、正常对照组T细胞混合培养 ,观察T细胞增殖反应。结果 :Dsg3E1,E2和E4,E5可刺激PV患者T细胞反应 ,而不与疾病对照组、正常对照组反应。结论 :Dsg3E1,E2和E4,E5中包含T B细胞作用相关的抗原表位 ,在PV发病中起重要作用。 展开更多

关键词 寻常型天疱疮 重组抗原 DSG3 T细胞反应 重组表达 自身免疫性疾病

在线阅读 下载PDF 职称材料