商陆皂苷甲对兔滑膜细胞产生IL-1和TNF的影响 被引量：22

1

作者 郑钦岳 王慧峰 +2 位作者 郑向民 肖振宇 易杨华 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期425-426,共2页

目的 :研究商陆皂苷甲 (Es A)对脂多糖 (L PS)刺激兔滑膜细胞产生白介素 1(IL - 1)和肿瘤坏死因子 (TNF)的影响。方法 :用胸腺细胞增殖法和用 L92 9细胞作靶细胞的生物测定法 ,分别检测与 Es A共育的受 L PS刺激的兔滑膜细胞培养上清中 ... 目的 :研究商陆皂苷甲 (Es A)对脂多糖 (L PS)刺激兔滑膜细胞产生白介素 1(IL - 1)和肿瘤坏死因子 (TNF)的影响。方法 :用胸腺细胞增殖法和用 L92 9细胞作靶细胞的生物测定法 ,分别检测与 Es A共育的受 L PS刺激的兔滑膜细胞培养上清中 IL- 1和 TNF的含量。结果 :Es A在 5～ 40 μg/ m l范围内能明显抑制 L PS诱导兔滑膜细胞产生 IL- 1和 TNF。结论 :Es A可抑制滑膜细胞产生 IL - 1和 TNF的作用提示其可能有助于消除类风湿性关节炎的关节炎症。 展开更多

关键词 商陆皂苷甲 白细胞介素1 肿瘤坏死因子 兔 滑膜细胞 中药

在线阅读 下载PDF 职称材料

商陆皂苷甲对自身免疫综合征模型小鼠的疗效 被引量：10

2

作者 肖振宇 郑钦岳 +2 位作者 张俊平 陆峰 张大志 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第10期1108-1111,共4页

目的:研究商陆皂苷甲(EsA)对自身免疫综合征模型小鼠的疗效。方法:采用ELISA、3H-TdR掺入和病理学检测3种方法,分别观察EsA对模型小鼠抗ds-DNA抗体水平、淋巴细胞转化水平及内脏炎症的影响。结果:EsA在5～20 mg/kg剂量范围内能降低模型... 目的:研究商陆皂苷甲(EsA)对自身免疫综合征模型小鼠的疗效。方法:采用ELISA、3H-TdR掺入和病理学检测3种方法,分别观察EsA对模型小鼠抗ds-DNA抗体水平、淋巴细胞转化水平及内脏炎症的影响。结果:EsA在5～20 mg/kg剂量范围内能降低模型小鼠升高的抗ds-DNA抗体和淋巴细胞转化水平,且能显著地改善模型小鼠内脏组织的炎症。结论:EsA对自身免疫综合征模型小鼠有显著的治疗作用,EsA有希望成为治疗自身免疫疾病的有效药物。 展开更多

关键词 自身免疫综合征 商陆皂苷甲 治疗 疗效 小鼠 ELISA

在线阅读 下载PDF 职称材料

染料木素和槲皮素对成纤维细胞增殖和胶原合成的抑制作用 被引量：8

3

作者 齐荔红 康鲁平 +3 位作者 张俊平 刘福堂 周俭平 周斌 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第12期1166-1168,共3页

目的 :研究染料木素 ( genistein,GE)和槲皮素 ( quercetin,QU)对成纤维细胞增殖和胶原合成的影响。方法 :用结晶紫染色法测定光密度值检测 NIH3T3成纤维细胞增殖 ,用 3 H-脯氨酸掺入法测定 3 H-脯氨酸掺入 NIH3T3细胞的 Bq值表示胶原... 目的 :研究染料木素 ( genistein,GE)和槲皮素 ( quercetin,QU)对成纤维细胞增殖和胶原合成的影响。方法 :用结晶紫染色法测定光密度值检测 NIH3T3成纤维细胞增殖 ,用 3 H-脯氨酸掺入法测定 3 H-脯氨酸掺入 NIH3T3细胞的 Bq值表示胶原合成作用。 结果 :GE和 QU都能浓度依赖性抑制血清、血小板源生长因子 ( PDGF )或转化生长因子β1( TGF-β1)刺激的NIH3T3细胞增殖和胶原合成。 结论 :GE和 QU具有体外抑制成纤维细胞增殖和胶原合成的作用。 展开更多

关键词 染料木素 槲皮素 成纤维细胞 胶原合成 细胞增殖 抑制作用 纤维化疾病

在线阅读 下载PDF 职称材料

趋化因子受体5在乳腺浸润性导管癌组织的表达及意义 被引量：14

4

作者 王栋 郭满盈 郭葆玉 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期657-659,共3页

目的:探讨趋化因子受体5(CCR5)在乳腺浸润性导管癌组织的表达及意义方法:采用酶标记免疫组织化学方法检测30例乳腺浸润性导管癌及10例乳腺良性肿瘤组织中CCR5的表达情况,并应用ELISA双抗体夹心方法检测了相应患者血清中相关趋化因子MIP1... 目的:探讨趋化因子受体5(CCR5)在乳腺浸润性导管癌组织的表达及意义方法:采用酶标记免疫组织化学方法检测30例乳腺浸润性导管癌及10例乳腺良性肿瘤组织中CCR5的表达情况,并应用ELISA双抗体夹心方法检测了相应患者血清中相关趋化因子MIP1α,MIP1β及RANTES的含量。结果:在乳腺浸润性导管癌组织检测到CCR5的表达(16/30,表达率53.3%),而乳腺良性肿瘤组织中无1例表达;与乳腺良性肿瘤患者相比,在乳腺浸润性导管癌患者血清中RANTES含量明显升高[(41.8±10.2)vs(16.5±2.4)ng/ml,P<0.01],而MIP1α,MIP1β无明显变化。结论:在人乳腺浸润性导管癌组织上发现CCR5的表达,其在乳腺癌的发生发展中可能起重要作用,而RANTES可能是与其相互作用的主要配体。 展开更多

关键词 趋化N子受体5 癌 导管 乳腺 RNATES 巨噬细胞炎性蛋白质1

在线阅读 下载PDF 职称材料

陆皂苷甲对小鼠胸腺细胞凋亡的影响 被引量：7

5

作者 肖振宇 郑钦岳 +2 位作者 郑向民 程明和 易杨华 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期659-661,共3页

目的 :研究商陆皂苷甲 (Es A )对小鼠胸腺细胞的凋亡效应的影响。方法 :采用电镜、DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪三种分析方法 ,测定 Es A对小鼠胸腺细胞的凋亡效应的影响。 结果 :Es A在 2 .5～ 10μg/ ml的浓度范围内 ,对小鼠胸腺细... 目的 :研究商陆皂苷甲 (Es A )对小鼠胸腺细胞的凋亡效应的影响。方法 :采用电镜、DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪三种分析方法 ,测定 Es A对小鼠胸腺细胞的凋亡效应的影响。 结果 :Es A在 2 .5～ 10μg/ ml的浓度范围内 ,对小鼠胸腺细胞自发出现的细胞凋亡无影响 ,但能显著地促进 Con A活化的胸腺细胞的凋亡。 结论 :Es A有促进 Con A活化的胸腺细胞凋亡的作用 ,显示商陆皂苷甲对细胞免疫有调节作用。 展开更多

关键词 陆皂苷甲 小鼠 胸腺细胞 影响 细胞凋亡

在线阅读 下载PDF 职称材料

黄颜木素对HSC-T6细胞增殖和胶原合成的影响 被引量：27

6

作者 张珉 张俊平 +1 位作者 王杰松 钱定华 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期304-305,共2页

目的：研究黄颜木素对激活的永生型大鼠肝储脂细胞——ＨＳＣ－Ｔ６细胞增殖和胶原合成的影响。方法：细胞增殖采用结晶紫染色法检测，胶原合成采用３Ｈ－脯氨酸掺入法分析。结果：黄颜木素（６．２５～５０．００μｍｏｌ／Ｌ）以剂量... 目的：研究黄颜木素对激活的永生型大鼠肝储脂细胞——ＨＳＣ－Ｔ６细胞增殖和胶原合成的影响。方法：细胞增殖采用结晶紫染色法检测，胶原合成采用３Ｈ－脯氨酸掺入法分析。结果：黄颜木素（６．２５～５０．００μｍｏｌ／Ｌ）以剂量依赖方式显著抑制血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）刺激的ＨＳＣ－Ｔ６细胞增殖，并抑制转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）诱导的细胞内胶原合成。结论：黄颜木素具有抑制激活的肝储脂细胞增殖和胶原合成的作用。 展开更多

关键词 黄颜木素 转化生长因子Β 肝硬化 PDGF 小鼠

在线阅读 下载PDF 职称材料

重组胸腺素α1的表达、纯化和生物学活性 被引量：6

7

作者 苗红 郭葆玉 +1 位作者 张冉 张莉 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期636-639,共4页

为获得重组人胸腺素α1(recombinantthymosinα1,Tα1) ,采用融合表达方式表达Tα1基因 ,重组融合表达载体Tα1 pGEX 4XT 1转化大肠杆菌DE3(lys)构建工程菌 .对工程菌进行补料分批培养并诱导表达 ,得到目的蛋白的可溶性表达 .亲和层析... 为获得重组人胸腺素α1(recombinantthymosinα1,Tα1) ,采用融合表达方式表达Tα1基因 ,重组融合表达载体Tα1 pGEX 4XT 1转化大肠杆菌DE3(lys)构建工程菌 .对工程菌进行补料分批培养并诱导表达 ,得到目的蛋白的可溶性表达 .亲和层析纯化融合蛋白GST Tα1,经凝血酶裂解融合蛋白 ,亲和层析除去GST ,SourceQ离子交换 ,得到Tα1单体 ,得率为 30mg L发酵液 .生物学活性分析显示 ,重组Tα1能显著促进小鼠脾细胞增殖 (P <0 0 1) 。 展开更多

关键词 重组胸腺素α1 表达 纯化 生物学活性 融合表达

在线阅读 下载PDF 职称材料

人胸腺素原α的克隆、表达和活性初步研究 被引量：5

8

作者 王栋 郭满盈 +2 位作者 邱磊 吕岩 郭葆玉 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期415-417,共3页

目的:克隆人胸腺素原αcDNA并在大肠杆菌系统内表达。方法:利用RT- PCR技术从健康男性外周血PBMC中扩增胸腺素原αcDNA,纯化后用EcoRⅠ和SalⅠ双酶切PCR 产物,然后将该基因插入经同样双酶切的原核表达载体PBV220中,在PLPR 启动子控制下... 目的:克隆人胸腺素原αcDNA并在大肠杆菌系统内表达。方法:利用RT- PCR技术从健康男性外周血PBMC中扩增胸腺素原αcDNA,纯化后用EcoRⅠ和SalⅠ双酶切PCR 产物,然后将该基因插入经同样双酶切的原核表达载体PBV220中,在PLPR 启动子控制下,热诱导天然表达胸腺素原α,表达产物部分纯化后利用淋巴细胞玫瑰花结实验进行了初步的活性测定。结果:凝胶电泳显示PCR扩增产物的长度为300 bp左右,重组质粒测序结果表明,插入片段与人胸腺素原α的序列完全一致,DE3重组菌在热诱导下高效表达相对分子质量为12 000 的蛋白,该蛋白能提高淋巴细胞玫瑰花结形成率,表明具有一定活性。结论:成功克隆人胸腺素原α基因并在大肠杆菌中得到表达。 展开更多

关键词 胸腺素原α 原核表达 基因克隆

在线阅读 下载PDF 职称材料

CXCR4在前列腺癌组织中的表达与意义 被引量：3

9

作者 张冉 王栋 +3 位作者 王菊蓉 郭满盈 邱磊 郭葆玉 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期965-968,共4页

目的:探讨趋化因子受体在前列腺癌组织中的表达及其意义。方法:采用酶标记免疫组织化学方法检测45例前列腺癌及10例前列腺增生组织中趋化因子受体CCR1、CCR3、CXCR4和CCR5的表达情况,应用ELISA双抗体夹心方法检测相应患者血清中趋化因子... 目的:探讨趋化因子受体在前列腺癌组织中的表达及其意义。方法:采用酶标记免疫组织化学方法检测45例前列腺癌及10例前列腺增生组织中趋化因子受体CCR1、CCR3、CXCR4和CCR5的表达情况,应用ELISA双抗体夹心方法检测相应患者血清中趋化因子SDF-1的含量,并应用免疫发光方法检测相应患者血清中前列腺特异性抗原PSA的含量。结果:在前列腺癌组织上检测到趋化因子受体CXCR4的表达(表达率55.5%),PSA>20 ng/ml与PSA<20 ng/ml的前列腺癌组织上CXCR4的表达率分别为61.2%和42.8%,而前列腺增生组织中未发现这4种趋化因子受体的表达;与前列腺增生患者相比,在前列腺癌患者血清中SDF-1含量明显升高[(567.9±90.73)vs(169.1±46.01)pg/ml,P<0.01]。结论:在前列腺癌组织上发现有趋化因子受体CXCR4的表达,其表达可能在前列腺癌的发生、发展和转移中起重要作用。 展开更多

关键词 受体 趋化因子 前列腺特异性抗原 SDF-1 前列腺肿瘤

在线阅读 下载PDF 职称材料

胸腺素а原的生物学活性及基因表达谱芯片分析 被引量：3

10

作者 邱磊 郭葆玉 +4 位作者 苗红 道书艳 张冉 袁鹏群 杨旭 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期639-642,共4页

目的 :对一个新的胸腺素α原 (human prothymosinα,Pro Tα)进行生物学活性研究及基因表达谱分析。 方法 :用体外刺激小鼠脾细胞增殖进行实验及 EL ISA法检测 Pro Tα对 IL - 2和 TNF-α的诱导分泌作用 ,并用基因芯片技术对其表达谱进... 目的 :对一个新的胸腺素α原 (human prothymosinα,Pro Tα)进行生物学活性研究及基因表达谱分析。 方法 :用体外刺激小鼠脾细胞增殖进行实验及 EL ISA法检测 Pro Tα对 IL - 2和 TNF-α的诱导分泌作用 ,并用基因芯片技术对其表达谱进行分析。结果 :Pro Tα对小鼠脾细胞有明显的促进增殖作用 ,对 IL - 2和 TNF-α有明显的诱导分泌作用 (P<0 .0 1)。基因芯片研究发现 Pro Tα对蛋白酪氨酸磷酸酶基因、淋巴细胞抗原 6复合体、增殖相关基因 A等的表达有上调作用。 结论 :该新型Pro Tα在体外实验中有免疫调节活性 ,并诱导一些基因的表达。 展开更多

关键词 胸腺素Α原 生物学活性 基因表达谱 芯片分析

在线阅读 下载PDF 职称材料

乙型肝炎前S1蛋白的融合表达 被引量：3

11

作者 郭葆玉 李文捷 +3 位作者 杜风鸣 张淑英 汤琰 程振球 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期294-295,共2页

关键词 乙型肝炎 前S1蛋白 蛋白凳合 基因表达

在线阅读 下载PDF 职称材料

C57BL/6小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎模型的建立 被引量：6

12

作者 王菊蓉 张冉 +4 位作者 王栋 邱磊 郭满盈 弓雪莲 郭葆玉 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1089-1091,共3页

目的:建立实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的小鼠模型,为探讨多发性硬化的免疫病理机制和实验性治疗提供依据。方法:C57BL/6小鼠40只,分为3组。EAE组25只,采用皮下注射完全弗氏佐剂与300μg MOG35-55制备的乳化抗原,辅以腹腔注射109个/m... 目的:建立实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的小鼠模型,为探讨多发性硬化的免疫病理机制和实验性治疗提供依据。方法:C57BL/6小鼠40只,分为3组。EAE组25只,采用皮下注射完全弗氏佐剂与300μg MOG35-55制备的乳化抗原,辅以腹腔注射109个/ml百日咳疫苗的方法诱导发病;佐剂组8只,用生理盐水代替抗原肽制备免疫乳剂,余同EAE组;正常对照组7只,仅注射生理盐水。采用H-E和LFB染色的方法观察小鼠EAE模型的组织学改变。结果:从免疫后11 d开始,EAE组小鼠有22只陆续出现EAE临床症状,发病率为88%。佐剂组与正常对照组小鼠均未出现临床神经系统症状。光镜下可见EAE组小鼠的大脑和脊髓组织中有大量的炎性细胞浸润,白质脱髓鞘改变明显。结论:此种造模方法简单可行,模型稳定,可在国内广泛推广。 展开更多

关键词 脑脊髓炎 自身免疫性 实验性 模型 动物

在线阅读 下载PDF 职称材料

尖锐湿疣患者疣体组织趋化因子受体的表达及意义 被引量：3

13

作者 郭满盈 王栋 +2 位作者 张淑英 邱磊 郭葆玉 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期913-915,共3页

目的:探讨趋化因子MIP1α、MIP1β和RANTES及趋化因子受体CCR1、CCR3、CCR5和CXCR4在尖锐湿疣发病机制中的作用。方法:采用酶标记免疫组织化学方法检测78例尖锐湿疣患者疣体组织细胞上CCR1、CCR3、CCR5和CXCR4的表达,用ELISA双抗体夹心... 目的:探讨趋化因子MIP1α、MIP1β和RANTES及趋化因子受体CCR1、CCR3、CCR5和CXCR4在尖锐湿疣发病机制中的作用。方法:采用酶标记免疫组织化学方法检测78例尖锐湿疣患者疣体组织细胞上CCR1、CCR3、CCR5和CXCR4的表达,用ELISA双抗体夹心法测定78例尖锐湿疣患者血清中MIP1α、MIP1β和RANTES的含量。结果:在48例尖锐湿疣复发者中,疣体组织细胞表达CCR5的有19例(19/48,39.5%)、表达CCR3的11例(11/48,22.9%),5例(5/48,10.4%)同时表达这两种受体;所有待测患者疣体组织细胞中未发现有CCR1和CXCR4的阳性表达;尖锐湿疣患者MIP1α和MIP1β水平高于正常人组(P<0.01),两组的RANTES水平则无显著性差异。结论:尖锐湿疣患者疣体细胞趋化因子受体CCR3和CCR5的表达及MIP1α和MIP1β的水平升高可能与患者免疫功能低下及病毒逃避机体免疫反应有关,对于揭示尖锐湿疣的复发及病毒的免疫逃逸机制可能具有一定的意义。 展开更多

关键词 尖锐湿疣 炎症趋化因子类 受体 趋化因子

在线阅读 下载PDF 职称材料

水飞蓟宾对大鼠肝贮脂细胞HSC-T6增殖和胶原合成的影响 被引量：4

14

作者 张珉 张俊平 +5 位作者 王杰松 周斌 郭澄 谢渭芬 张纯 钱定华 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第10期932-934,共3页

目的 :观察水飞蓟宾对大鼠肝贮脂细胞 HSC- T6增殖和胶原合成的影响 ,探讨其保护肝脏及抗硬化机制。 方法 :采用结晶紫染色法测定细胞增殖 ,3H-脯氨酸掺入法测定胶原合成。 结果 :水飞蓟宾 ( 6 .2 5～ 5 0μg/ m l)以浓度依赖方式抑制... 目的 :观察水飞蓟宾对大鼠肝贮脂细胞 HSC- T6增殖和胶原合成的影响 ,探讨其保护肝脏及抗硬化机制。 方法 :采用结晶紫染色法测定细胞增殖 ,3H-脯氨酸掺入法测定胶原合成。 结果 :水飞蓟宾 ( 6 .2 5～ 5 0μg/ m l)以浓度依赖方式抑制血清、巨噬细胞条件培养液以及血小板源生长因子或转化生长因子β1 诱导的细胞增殖和胶原合成。结论 :抑制贮脂细胞增殖和胶原合成可能是水飞蓟宾保护肝脏抗硬化机制之一。 展开更多

关键词 水飞蓟宾 肝贮脂细胞 胶原合成 大鼠 细胞增殖

在线阅读 下载PDF 职称材料

纤维蛋白原降解产物对大鼠主动脉血管细胞的作用及蛋白激酶C抑制剂的影响 被引量：8

15

作者 周斌 张俊平 +1 位作者 胡振林 钱定华 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期179-180,共2页

目的：研究蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）抑制剂对纤维蛋白原降解产物（ＦＦＤＰ）引起的大鼠主动脉血管内皮细胞（ＲＡＥＣ）损伤的保护作用和平滑肌细胞（ＲＡＳＭＣ）增殖的抑制作用。方法：ＲＡＥＣ损伤以乳酸脱氢酶释放测定，ＲＡＳＭＣ增... 目的：研究蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）抑制剂对纤维蛋白原降解产物（ＦＦＤＰ）引起的大鼠主动脉血管内皮细胞（ＲＡＥＣ）损伤的保护作用和平滑肌细胞（ＲＡＳＭＣ）增殖的抑制作用。方法：ＲＡＥＣ损伤以乳酸脱氢酶释放测定，ＲＡＳＭＣ增殖以结晶紫染色法测定。结果：ＦＦＤＰ能促进ＲＡＥＣ释放乳酸脱氢酶，诱导ＲＡＳＭＣ增殖；ＰＫＣ抑制剂槲皮素、Ｒｏ３１－８２２０剂量依赖性地抑制ＦＦＤＰ对ＲＡＥＣ的损伤，并抑制ＦＦＤＰ诱导的ＲＡＳＭＣ增殖。结论：ＰＫＣ抑制剂对ＦＦＤＰ引起的ＲＡＥＣ有保护作用，对ＲＡＳＭＣ增殖有抑制作用。 展开更多

关键词 平滑肌细胞 主动脉 内皮细胞 FFDP 蛋白激酶C

在线阅读 下载PDF 职称材料

PRDM5基因抑制前列腺癌细胞22Rv1生长 被引量：2

16

作者 王洋 夏梓元 +8 位作者 黄美金 任善成 朱焱 高莉 贺湘洁 徐光 丁桂龄 陆斌 孙颖浩 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期724-728,共5页

目的探讨PRDM5基因在前列腺癌细胞中的抑癌作用。方法采用聚合酶链反应(PCR)、限制性内切酶酶切、T4DNA连接酶连接等方法,克隆PRDM5基因并插入慢病毒载体中。将携带PRDM5基因的慢病毒质粒(或阴性对照质粒)与慢病毒包装质粒通过脂质体法... 目的探讨PRDM5基因在前列腺癌细胞中的抑癌作用。方法采用聚合酶链反应(PCR)、限制性内切酶酶切、T4DNA连接酶连接等方法,克隆PRDM5基因并插入慢病毒载体中。将携带PRDM5基因的慢病毒质粒(或阴性对照质粒)与慢病毒包装质粒通过脂质体法共转染293T细胞,收集病毒上清,感染人前列腺癌细胞株22Rv1。用蛋白质印迹法检测细胞PRDM5的表达,细胞倍增实验和平板克隆实验检测细胞增殖和克隆形成能力,软琼脂克隆形成实验检测细胞非锚着依赖性生长能力。结果成功构建PRDM5重组慢病毒载体,并包装获得慢病毒上清。将PRDM5重组慢病毒载体感染22Rv1细胞后,筛选得到稳定表达细胞株,蛋白质印迹法结果显示该细胞株能稳定表达外源性PRDM5蛋白。过表达PRDM5的前列腺癌22Rv1细胞的增殖能力[倍增时间:(52.5±1.4)h vs(44.0±1.3)h]、克隆形成能力[克隆形成数:(1 114±98)/皿vs(1 361±123)/皿]和非锚着依赖性生长能力[克隆形成数:(94.6±8.7)/孔vs(154.0±3.5)/孔]均低于阴性对照组(P<0.05)。结论前列腺癌22Rv1细胞中PRDM5的过表达具有抑制肿瘤细胞增殖、克隆形成和非锚着依赖性生长的能力。 展开更多

关键词 PRDM5 前列腺肿瘤 细胞增殖 克隆形成 非锚着依赖性生长

在线阅读 下载PDF 职称材料

克隆人胸腺素α原cDNA及RNA二级结构分析和带Xa因子的融合表达 被引量：7

17

作者 郭葆玉 余建国 +3 位作者 张淑英 道书艳 苗红 邱磊 《第二军医大学学报》 CSCD 北大核心 2000年第1期34-37,共4页

目的：克隆表达具有重要生物功能的胸腺素α原ｃＤＮＡ（ｈｕｍ ａｎ ｐｒｏｔｈｙｍ ｏｓｉｎα， ｈｕＰＴＭＡα）。方法：从健康中国人ＰＢＭＣｐｏｌｙ（Ａ）＋ ＲＮＡ中采用ＲＴ－ＰＣＲ法克隆ｈｕＰＴＭＡαｃＤＮＡ，并作ＲＮ... 目的：克隆表达具有重要生物功能的胸腺素α原ｃＤＮＡ（ｈｕｍ ａｎ ｐｒｏｔｈｙｍ ｏｓｉｎα， ｈｕＰＴＭＡα）。方法：从健康中国人ＰＢＭＣｐｏｌｙ（Ａ）＋ ＲＮＡ中采用ＲＴ－ＰＣＲ法克隆ｈｕＰＴＭＡαｃＤＮＡ，并作ＲＮＡ二级结构分析。结果：克隆出长度为３００ ｂｐ，编码１００ 个氨基酸的ｈｕＰＴＭＡαｃＤＮＡ，经氨基酸序列分析发现在３７～４１ 位缺失Ａｓｎ３７ －Ｇｌｙ３８ －Ａｓｎ３９ －Ａｌａ４０－Ｇｌｕ４１ 和６５～６８ 位缺失Ｇｌｕ６５－Ｇｌｕ６６ －Ｇｌｕ６７ －Ｇｌｕ６８ ，与国际基因库连接检索证明是与ｈｕＰＴＭＡα有８６．４％ 同源性的一个新亚型，融合表达蛋白的相对分子质量为３．７×１０４，有促进ＩＦＮ和ＴＮＦ产生的生物学活性。结论：本研究克隆的ｈｕＰＴＭＡαｃＤＮＡ是中国人中新发现的一个多态型基因序列，它的克隆并表达成功为今后该基因的免疫功能研究及中国人基因型研究分析提供了有用的材料。 展开更多

关键词 胸腺素Α原 RNA 融合表达 克隆 CDNA

在线阅读 下载PDF 职称材料

融合表达β趋化因子受体5NH_2端膜外第一襻及其特异抗体F(ab′)_2的制备 被引量：2

18

作者 郭葆玉 张淑英 +2 位作者 程振球 汪建斌 松岛纲治 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期142-145,共4页

目的：研究β趋化因子受体５（ＣＣＲ５）ＮＨ２端膜外第一襻结构域的功能及其特异抗体Ｆ（ａｂ′）２的制备。方法：计算机分析趋化因子超基因家族，定位超基因家族中同源顺序最低的结构域ＮＨ２端膜外结构域，ＰＣＲ扩增出该结构域１... 目的：研究β趋化因子受体５（ＣＣＲ５）ＮＨ２端膜外第一襻结构域的功能及其特异抗体Ｆ（ａｂ′）２的制备。方法：计算机分析趋化因子超基因家族，定位超基因家族中同源顺序最低的结构域ＮＨ２端膜外结构域，ＰＣＲ扩增出该结构域１１４个核苷酸序列。构建融合表达载体ｐＧＥＸ－ＩＮ／ＮＲ５，经测序鉴定正确后，在Ｅ．ｃｏｌｉ中表达，经纯化后免疫新西兰兔。蛋白Ａ亲和层析和胰蛋白酶消化ＩｇＧ，经Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ－１２柱层析制备Ｆ（ａｂ′）２。结果：经还原和非还原聚丙烯酰胺凝胶电泳和ＦＡＸ分析证明得到抗ＣＣＲ５ＮＨ２端的特异性抗体。结论：本方法为一简捷快速的特定功能结构域抗体Ｆ（ａｂ′）２制备方法，对研究该基因在体内的表达及生物学功能提供了重要的实验材料，同时也对超基因家族中亚家族特异抗体研制提供了一种研究思路和方法。 展开更多

关键词 融合蛋白 抗体 β趋化因子 CCR5 NH2端膜

在线阅读 下载PDF 职称材料

大叶延胡索的抗实验性心肌缺血作用 被引量：4

19

作者 秦永文 尉挺 +1 位作者 许冠生 吴焕 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1989年第2期119-122,共4页

本文报告大叶延胡索对实验性心肌缺血和对冠状动脉血流量的作用。结果表明大叶延胡索能提高常压下小鼠对缺氧的耐受能力,延长大剂量异丙肾上腺素所致的高耗氧状态下的存活时间;减轻大剂量异丙肾上腺素所致的心肌缺血性坏死的程度;缩小... 本文报告大叶延胡索对实验性心肌缺血和对冠状动脉血流量的作用。结果表明大叶延胡索能提高常压下小鼠对缺氧的耐受能力,延长大剂量异丙肾上腺素所致的高耗氧状态下的存活时间;减轻大剂量异丙肾上腺素所致的心肌缺血性坏死的程度;缩小大鼠左冠状动脉结扎后12h的心肌梗塞范围。增加猫冠状动脉血流量,轻度降低血压,减慢心率。 展开更多

关键词 延胡索 心肌缺血 疾病模型 动物

在线阅读 下载PDF 职称材料

重组huM CP-1融合蛋白对人外周血单核细胞体外溶瘤活性的影响 被引量：1

20

作者 王汉涛 郭葆玉 +3 位作者 谈冶雄 屠岳 王元和 孟荣贵 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第11期875-877,共3页

目的：研究重组人单核细胞趋化蛋白－１ （ｈｕＭＣＰ－１）融合蛋白对人外周血单核细胞体外溶瘤活性的影响。方法：采用乳酸脱氢酶释放法检测ｈｕＭＣＰ－１单独或与细胞因子协同作用下的单核细胞溶瘤活性。结果：１０ μｇ／ｍ ｌ的... 目的：研究重组人单核细胞趋化蛋白－１ （ｈｕＭＣＰ－１）融合蛋白对人外周血单核细胞体外溶瘤活性的影响。方法：采用乳酸脱氢酶释放法检测ｈｕＭＣＰ－１单独或与细胞因子协同作用下的单核细胞溶瘤活性。结果：１０ μｇ／ｍ ｌ的重组ｈｕＭＣＰ－１可促进人单核细胞对人胃腺癌细胞ＳＧＣ－７９０１ 和人结肠癌细胞Ｈｃｅ－８６９３ 的体外溶瘤活性（Ｐ＜ ０．０１）。１００ Ｕ／ｍ ｌ的ＩＦＮγ与１ μｇ／ｍ ｌ的重组ｈｕＭＣＰ－１ 在增强单核细胞对ＳＧＣ－７９０１ 和Ｈｃｅ－８６９３ 细胞的溶瘤作用方面具有协同作用（Ｐ＜ ０．０５）。１００ Ｕ／ｍ ｌＴＮＦ可分别与０．１ 或１ μｇ／ｍ ｌ重组ｈｕＭＣＰ－１协同增强单核细胞的溶瘤作用（Ｐ＜ ０．０１）。结论：ｈｕＭＣＰ－１单独或与ＴＮＦ、ＩＦＮγ协同作用可增强单核细胞的体外溶瘤活性。 展开更多

关键词 单核细胞 溶瘤活性 肿瘤 hrMCp-1

在线阅读 下载PDF 职称材料