扩大小隐静脉-腓肠神经营养血管皮瓣的临床应用 被引量：7

1

作者 梁进 陈景明 +4 位作者 王卫国 张强 刘立峰 王平山 蔡锦方 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期S006-S007,共2页

总结扩大小隐静脉 -腓肠神经营养血管皮瓣面积的方法 ,探讨该皮瓣血供特点及临床应用。对 17例大面积皮瓣 (16cm× 10 cm～ 2 5 cm× 16 cm)的病例资料进行回顾性分析。该 17例分别为小腿骨折术后骨外露并感染及骨不连 ,胫前皮... 总结扩大小隐静脉 -腓肠神经营养血管皮瓣面积的方法 ,探讨该皮瓣血供特点及临床应用。对 17例大面积皮瓣 (16cm× 10 cm～ 2 5 cm× 16 cm)的病例资料进行回顾性分析。该 17例分别为小腿骨折术后骨外露并感染及骨不连 ,胫前皮肤溃疡长期不愈 ,踝关节开放骨折脱位并肌腱外露 ,足跟皮肤缺损跟腱断裂 ,足背皮肤缺损肌腱骨外露的病例。均采用逆行小隐静脉 -腓肠神经营养血管皮瓣修复。经随访 6～ 30个月 ,除 1例远端边缘少许表皮坏死外 ,其余皮瓣全部成活 ,无感染复发 ;骨不连愈合 ;外观恢复满意。分析认为 ,扩大面积的皮瓣血供可靠 ,不伤及重要血管 ,是修复小腿及足踝部皮肤软组织缺损的理想方法 。 展开更多

关键词 小隐静脉-腓肠神经 营养血管皮瓣 临床应用 骨外露 足背皮肤缺损

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SBK与LASIK治疗高度近视眼患者的临床对比研究 被引量：16

2

作者 张立军 张岩 +1 位作者 王佼佼 蒋华 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2010年第6期547-550,共4页

目的比较前弹力层下准分子激光原位角膜磨镶术(sub-Bowman keratomileusis,SBK)和传统准分子激光原位角膜磨镶术(laser in situ keratomileusis,LASIK)治疗高度近视眼患者的有效性和安全性。方法随机使用SBK和LASIK2种方法治疗近视度数... 目的比较前弹力层下准分子激光原位角膜磨镶术(sub-Bowman keratomileusis,SBK)和传统准分子激光原位角膜磨镶术(laser in situ keratomileusis,LASIK)治疗高度近视眼患者的有效性和安全性。方法随机使用SBK和LASIK2种方法治疗近视度数大于-6.00D的近视眼患者95例(95眼),术中测量角膜基质床厚度及角膜瓣厚度并进行比较,术后1个月、3个月、6个月、12个月检查并记录裸眼视力、屈光状态、角膜情况等并进行比较。结果 SBK组角膜瓣平均厚度为(108.23±11.63)μm,LASIK组为(143.89±21.65)μm,2组比较差异有显著统计学意义(t=-13.321,P=0.000)。术后1个月、3个月、6个月、12个月,裸眼视力≥1.0者SBK组分别占95.9%、93.9%、91.8%和91.8%,LASIK组分别占91.3%、93.5%、87.0%和84.8%;屈光度在±0.50D之间者SBK组分别占69.4%、73.5%、79.6%和83.7%,LASIK组分别占63.0%、67.4%、69.6%和67.4%,差异均无统计学意义(χ2=0.428、0.422、1.263、3.428,P=0.513、0.516、0.261、0.064)。SBK组1例出现轻微角膜上皮下混浊,LASIK组2例出现屈光回退。SBK组泪膜破裂时间术后3个月恢复至术前水平,LASIK组6个月恢复至术前水平。SBK组角膜基质床厚度平均为(323.27±20.57)μm,LASIK组平均为(295.74±14.58)μm,2组比较差异有统计学意义(t=7.480,P=0.038)。术后12个月时角膜后表面Diff值SBK组为(0.037±0.011)mm,LASIK组为(0.050±0.012)mm,2组比较差异无统计学意义(t=-5.242,P=0.390)。结论 SBK组治疗高度近视的安全性和有效性与LASIK组相同,SBK组术后早期的裸眼视力及12个月时屈光状态优于LASIK组,而治疗后保留的角膜基质更多,干眼恢复更快,生物力学稳定性更好。 展开更多

关键词 角膜 近视 激光原位角膜磨镶术 前弹力层下

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穿透性角膜移植屈光控制的临床研究 被引量：2

3

作者 张霞 蒋华 +2 位作者 路振莉 高洪瑞 范军华 《眼科新进展》 CAS 2006年第3期206-207,209,共3页

目的评价通过植片和植床大小匹配、间断缝线、选择性拆线相结合，对穿透性角膜移植术后屈光控制的效果。方法17例（20眼）根据术前不同屈光状态采用不同角膜移植片、植床大小及间断缝线技术进行穿透性角膜移植。术后1个月、3个月、6个月... 目的评价通过植片和植床大小匹配、间断缝线、选择性拆线相结合，对穿透性角膜移植术后屈光控制的效果。方法17例（20眼）根据术前不同屈光状态采用不同角膜移植片、植床大小及间断缝线技术进行穿透性角膜移植。术后1个月、3个月、6个月、12个月进行视力、角膜曲率、角膜地形图及屈光检查并行选择性拆线，通过比较视力、角膜屈折力、散光、等效球镜，评价术后不同时间的视光学状态。结果裸眼视力〉0．5者11眼，0．3～0．5者5眼，0．1～0．3者4眼；平均裸眼视力0．58±0．37，最佳矫正视力0．96±0．27。首次拆线前角膜屈折力（37．26±2．85）D，拆线后最终角膜屈折力（41．52±5．15）D，2者有统计学差异，P〈0．05。拆线前角膜散光平均（4．30±4．60）D，拆线后1个月、3个月、6个月分别为（3．29±3．81）D、（2．07±3．29）D、（2．13±3．21）D，最终散光（1．65±2．73）D。术后等效球镜1个月、3个月、6个月、12个月分别是（7．20±2．63）D、（5．23±3．49）D、（4．01±5．26）D、（1．07±3．21）D。术后1个月与3个月、6个月、12个月对照差异显著，术后3个月、12个月之间有明显差异，P〈0．05，术后3个月、6个月之间无明显差异，P〉0．05。结论植片植床大小匹配、间断缝线和选择性拆线相结合可以有效改善PKP术后的屈光状态，提高视力，达到控制屈光的目的。[眼科新进展2006；26（3）：206—207，209] 展开更多

关键词 穿透性角膜移植 屈光

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带腓肠肌腱膜的腓动脉穿支皮瓣修复儿童复杂跟腱缺损 被引量：4

4

作者 王季 蔡锦方 +2 位作者 王建超 李宗玉 曹学成 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第10期1660-1663,共4页

目的:了解带腓肠肌腱膜的腓动脉穿支皮瓣修复儿童复杂跟腱缺损的效果。方法:2009年10月至2014年12月采用带腓肠肌腱膜的腓动脉穿支皮瓣修复儿童复杂跟腱缺损12例。统计手术前后踝关节动度、AOFAS评分、SF36评分,评价疗效。结果:一期愈合... 目的:了解带腓肠肌腱膜的腓动脉穿支皮瓣修复儿童复杂跟腱缺损的效果。方法:2009年10月至2014年12月采用带腓肠肌腱膜的腓动脉穿支皮瓣修复儿童复杂跟腱缺损12例。统计手术前后踝关节动度、AOFAS评分、SF36评分,评价疗效。结果:一期愈合8例,皮瓣表皮坏死2例,皮瓣远端坏死1例,感染复发1例。术后平均随访时间18个月。术后1年踝关节跖屈优于术前及术后3个月,差异有统计学意义(P<0.01);术后1年踝关节背伸略低于术前,差异无统计学意义(P>0.01)。术后1年AOFAS评分及SF36评分均较术前和术后3个月高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:带腓肠肌腱膜的腓动脉穿支皮瓣是一种修复儿童复杂跟腱缺损的较理想方法。 展开更多

关键词 组织缺损 跟腱 腓肠肌腱瓣 修复

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糖尿病大鼠视网膜中央动、静脉血流动力学观察 被引量：2

5

作者 陈瑛 张康兰 +2 位作者 刘兰芬 丁吉元 张莲英 《中国医学影像技术》 CSCD 北大核心 2005年第7期998-1002,共5页

目的通过对糖尿病(DM)大鼠视网膜中央动脉(CRA)、静脉(CRV)血流检测,结合视网膜血管消化铺片结果,研究糖尿病早期视网膜血流动力学的变化规律。方法采用右下腹腔内一次性注射Streptozotocin60mg/kg诱导Wistar大鼠糖尿病模型52只,分别于... 目的通过对糖尿病(DM)大鼠视网膜中央动脉(CRA)、静脉(CRV)血流检测,结合视网膜血管消化铺片结果,研究糖尿病早期视网膜血流动力学的变化规律。方法采用右下腹腔内一次性注射Streptozotocin60mg/kg诱导Wistar大鼠糖尿病模型52只,分别于成模后1、2、3、4、5和6个月,行彩色多普勒超声(CDI)检查,检查结束后处死大鼠,取出左眼球固定于4%多聚甲醛中,行视网膜血管消化铺片、PAS染色。糖尿病大鼠成模后1～6个月分别标记为DM1、DM2、DM3、DM4、DM5、DM6。结果DM1时,CRA的收缩期血流峰值(PSV)减低,与对照组比较有显著性差异(P<0.05);随病程延长,PSV、舒张末期血流峰值(EDV)和平均流速峰值(MV)减低持续减低,在DM6达到最低水平;阻力指数(RI)、搏动指数(PI)及CRV血流参数在DM5、6时显著增高;DM3,视网膜血管周细胞出现形态学改变;DM4以后,周细胞逐渐减少,内皮细胞逐渐增多,逐渐出现大量的、闭塞的血管和血管瘤。结论CRA的PSV、EDV的改变发生在糖尿病视网膜微血管出现病理改变之前,是糖尿病早期视网膜血流变化最敏感的指标;MV、PI、RI的改变提示视网膜微血管病理性改变的发生,与血管闭塞和大量无灌注区的形成有关。通过对CRA、CRV血流参数的变化的观察可以推测糖尿病视网膜病变(DR)的病变程度。 展开更多

关键词 糖尿病视网膜病变 超声检查 多普勒 彩色 视网膜动脉 视网膜静脉

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两性霉素B角膜基质和前房内注射治疗真菌性角膜脓肿 被引量：4

6

作者 曾庆延 蒋华 +1 位作者 吴尚操 金晓丽 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2012年第4期365-368,共4页

目的分析两性霉素B角膜基质联合前房注射治疗真菌性角膜脓肿的临床效果。方法回顾性分析我院真菌性角膜脓肿12例12眼,患者均有植物性外伤史,病灶均位于角膜深基质层或内皮面,共焦显微镜检查均见角膜基质内真菌菌丝。常规治疗无效后给予... 目的分析两性霉素B角膜基质联合前房注射治疗真菌性角膜脓肿的临床效果。方法回顾性分析我院真菌性角膜脓肿12例12眼,患者均有植物性外伤史,病灶均位于角膜深基质层或内皮面,共焦显微镜检查均见角膜基质内真菌菌丝。常规治疗无效后给予基质联合前房注射0.10g·L-1两性霉素B,其中,基质注射时为在角膜脓肿病灶边缘相对健康角膜处选取4～6个注射点,每点注射约0.02mL,前房注射时为一次性前房注入0.10mL。记录治疗前及治疗后视力、眼压、角膜情况、前房反应以及晶状体状况。术前及术后3个月行角膜内皮检查。结果 6眼1次注射后病灶缩小,未需重复注射病情痊愈;4眼行2～3次注射后病情控制;2眼1次注射后病情仍发展,改行球结膜瓣遮盖术痊愈。术后视力较术前平均提高1.3行。角膜内皮细胞密度治疗前为(2164±156)mm-2,治疗后3个月为(2218±262)mm-2,治疗前后差异无统计学意义(P=0.874)。1眼2次注射后晶状体混浊加重;1眼有一过性眼压升高;5眼治疗后24h前房反应明显,48h后消退。结论两性霉素B角膜基质联合前房注射可以有效治疗真菌性角膜脓肿。 展开更多

关键词 真菌 角膜脓肿 角膜基质注射 前房注射 两性霉素B

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单纯疱疹病毒性角膜炎患者双眼泪液功能改变 被引量：3

7

作者 曾庆延 蒋华 +2 位作者 牛晓光 吴尚操 喻长泰 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2012年第5期467-469,共3页

目的观察单纯疱疹病毒性角膜炎(herpes simplex keratitis,HSK)患者双眼泪液量及泪膜稳定性的改变,并通过共焦显微镜观察双眼角膜神经的变化。方法选取2007年1月至2010年1月间我院门诊就诊的HSK患者132例(132眼),对所有患者的双眼进行... 目的观察单纯疱疹病毒性角膜炎(herpes simplex keratitis,HSK)患者双眼泪液量及泪膜稳定性的改变,并通过共焦显微镜观察双眼角膜神经的变化。方法选取2007年1月至2010年1月间我院门诊就诊的HSK患者132例(132眼),对所有患者的双眼进行泪液分泌试验(Schirmer I test,SIt)、泪膜破裂时间(tear break-up time,BUT)及角膜知觉的检查。并通过共焦显微镜对患者角膜上皮下神经和基质神经进行观察。设立相应年龄段的正常人51例51眼为对照组。结果 HSK患者健眼的SIt为(8.80±7.34)mm,明显短于对照组的(17.30±4.13)mm(P=0.013),BUT为(9.60±4.94)s,明显短于对照组的(14.51±5.32)s(P=0.049)。基质型及内皮型HSK患者健眼SIt分别为(4.23±2.79)mm和(4.72±3.93)mm,BUT分别为(8.00±3.89)s和(7.50±4.51)s,均明显低于对照组(均为P<0.05),而上皮型HSK患者健眼SIt为(17.51±4.77)mm,BUT为(13.20±4.88)s,与对照组相比差异均无统计学意义(均为P>0.05)。HSK患者健眼的角膜知觉略低于对照组,但差异无统计学意义(P=0.899)。HSK患者患眼的BUT及角膜知觉均明显少于对照组(P=0.000、0.003),而SIt无明显差异(P=0.498)。HSK患者患眼由于角膜水肿及炎症等因素影响均未看到基质神经干及角膜上皮下神经丛;健眼基质中可见粗大神经干,但上皮下神经丛神经纤维数目较对照组有所减少(P=0.001),而且26.5%的HSK患者健眼神经纤维走行为横向,对照组仅为4.3%。结论 HSK患者患眼及健眼泪液功能均存在不同程度异常,可能与神经调控异常有关。HSK患者在治疗患眼的同时应密切观察健眼的变化,并可预防性应用人工泪液。 展开更多

关键词 单纯疱疹病毒 角膜炎 泪液 角膜知觉检查 角膜神经

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Wolter锁骨钢板治疗度肩锁关节脱位 被引量：1

8

作者 梁进 陈景明 +4 位作者 张强 王卫国 王平山 刘立峰 蔡锦方 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期807-808,共2页

目的 :观察 Wolter锁骨钢板治疗 度肩锁关节脱位的疗效。方法 :自 2 0 0 1年 5月至 2 0 0 2年 1 0月采用德国 L ink公司 Wolter锁骨钢板及韧带修复术治疗 1 2例 度肩锁关节脱位患者并观察疗效。结果 :术后 1周所有患者均能进行肩关节... 目的 :观察 Wolter锁骨钢板治疗 度肩锁关节脱位的疗效。方法 :自 2 0 0 1年 5月至 2 0 0 2年 1 0月采用德国 L ink公司 Wolter锁骨钢板及韧带修复术治疗 1 2例 度肩锁关节脱位患者并观察疗效。结果 :术后 1周所有患者均能进行肩关节主动活动。术后 4～ 6周均完全恢复日常生活。随访未见钢板断裂和松动的表现 ,5例除去内固定后未见肩锁关节脱位复发。治疗结果按 L azzcano标准评价 ,优 1 1例 ,良 1例。 结论 :Wolter锁骨钢板固定是治疗 度肩锁关节脱位的一种较好的手术方法。 展开更多

关键词 肩锁关节脱位 Wolter锁骨钢板 韧带修复

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低浓度乙醇诱导与紫外线照射对HepG2细胞周期及p53/p21蛋白表达的影响 被引量：1

9

作者 张修礼 曲建慧 +1 位作者 孙自勤 李兆申 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1166-1168,共3页

目的观察低浓度乙醇诱导与紫外线照射导致HepG2肝癌细胞损伤的分子路径。方法选用HepG2肝癌细胞株，分别给予低浓度乙醇诱导与紫外线照射处理，观察两种损伤因素作用后细胞周期分布的差异，细胞中p53蛋白和p21蛋白表达的改变，分析蛋白... 目的观察低浓度乙醇诱导与紫外线照射导致HepG2肝癌细胞损伤的分子路径。方法选用HepG2肝癌细胞株，分别给予低浓度乙醇诱导与紫外线照射处理，观察两种损伤因素作用后细胞周期分布的差异，细胞中p53蛋白和p21蛋白表达的改变，分析蛋白表达与细胞周期改变的关系。结果紫外线照射后细胞中p53、p21蛋白表达均明显增强，出现G0～G1／G2～M期阻滞；低浓度乙醇诱导后主要出现G2～M期阻滞与p21蛋白表达的增强，p53蛋白表达改变不明显；两种损伤因素均能导致细胞凋亡率的增加。结论低浓度乙醇诱导与紫外线照射通过激活细胞内不同的分子事件，导致细胞周期与细胞凋亡的改变。 展开更多

关键词 乙醇 紫外线 细胞周期 蛋白表达

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肾上腺髓质素对清醒兔的降眼压作用 被引量：2

10

作者 魏捷 张康兰 《眼科新进展》 CAS 2003年第2期107-110,共4页

目的　研究肾上腺髓质素 ( adrenomedullin,ADM)前房内注射对清醒正常眼压兔和急性高眼压模型兔眼压的作用 ;测定房水中环磷腺苷酸 ( c AMP)和环磷鸟苷酸 ( c GMP)浓度 ,探讨其作用机制。方法　测量 ADM前房内注射后不同时刻正常眼压兔... 目的　研究肾上腺髓质素 ( adrenomedullin,ADM)前房内注射对清醒正常眼压兔和急性高眼压模型兔眼压的作用 ;测定房水中环磷腺苷酸 ( c AMP)和环磷鸟苷酸 ( c GMP)浓度 ,探讨其作用机制。方法　测量 ADM前房内注射后不同时刻正常眼压兔及急性高眼压模型兔眼压 ,至眼压恢复到基线水平。运用放射免疫分析方法测定 c AMP和 c GMP浓度。结果　 5× 10 - 7～ 10 - 4 m ol· L- 1 ADM呈浓度依赖性地降低兔正常眼压和抑制兔急性眼压升高 ,以 10 - 6～ 10 - 4 m ol· L- 1 ADM降压作用显著。 ADM可降低正常眼压达1.33k Pa,最大降压效应出现在用药后 4～ 8h。在高眼压模型兔 ,10 - 5mol· L- 1 ADM峰值时眼压下降幅度为 1.45 k Pa,10 - 6 、10 - 4 m ol· L- 1 ADM则分别降低眼压 0 .88k Pa与0 .6 0 k Pa。与对照组比较 ,ADM的应用未引起房水中 c AMP和 c GMP浓度的变化。结论　在清醒兔 ,ADM前房内注射可显著降低正常眼压并抑制由葡萄糖诱导的急性眼压升高 ,其作用呈浓度依赖性。但 c AMP、c GMP并未参与其降眼压过程 ,具体通路需要进一步研究。 展开更多

关键词 肾上腺髓质素 眼压 青光眼 环核苷酸 兔

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前弹力层下角膜磨镶术治疗近视的视觉质量观察 被引量：1

11

作者 张立军 张岩 蒋华 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2010年第12期1157-1160,共4页

目的探讨前弹力层下角膜磨镶术（sub-Bowman＇s keratomileusis,SBK）治疗近视散光患者术后的高阶像差、对比敏感度。方法采用随机对照临床研究,将自愿接受激光治疗的近视散光患者分为2组。A组71例（71眼）患者接受SBK,B组67例（67眼）... 目的探讨前弹力层下角膜磨镶术（sub-Bowman＇s keratomileusis,SBK）治疗近视散光患者术后的高阶像差、对比敏感度。方法采用随机对照临床研究,将自愿接受激光治疗的近视散光患者分为2组。A组71例（71眼）患者接受SBK,B组67例（67眼）患者接受常规LASIK。所有患者均取右眼进行分析,并将结果进行比较。术前及术后检测高阶像差、对比敏感度,进行视觉质量主观满意度调查问卷等。随诊时间为术后1周、1个月、3个月、6个月、12个月。结果术前2组各项指标比较,差异无统计学意义（均为P〉0.05）。术后12个月,SBK组平均高阶像差为（0.416±0.067）μm,LASIK组为（0.614±0.098）μm,2者差异有统计学意义（t=-13.922,P=0.001）;SBK组对比敏感度术后3~6个月恢复至术前水平,LASIK组术后6~12个月恢复至术前水平,术后12个月,在明亮及昏暗状态下,SBK组各空间频率对比敏感度优于LASIK组,其中明亮状态下低、中空间频率差异均有统计学意义;昏暗状态下低、中、高空间频率差异均有统计学意义。SBK组的患者主观满意率为95.8%,LASIK组为89.6%。结论与常规LASIK相比,SBK可减少手术诱导的高阶像差,更快地恢复低、中、高空间频率的对比敏感度,患者的满意度更高。 展开更多

关键词 近视 散光 角膜磨镶术 对比敏感度 高阶像差

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接合黏附分子-1在大鼠角膜中的表达研究 被引量：1

12

作者 王光洁 蒋华 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期204-208,共5页

背景接合黏附分子-1（JAM-1）是新发现的跨膜蛋白，参与细胞紧密连接的结构组成和功能发挥。在眼组织方面，紧密连接对维持角膜的透明性十分重要，但是目前就JAM-1在角膜紧密连接结构和功能方面的研究较少。目的确定JAM-1在大鼠角膜上... 背景接合黏附分子-1（JAM-1）是新发现的跨膜蛋白，参与细胞紧密连接的结构组成和功能发挥。在眼组织方面，紧密连接对维持角膜的透明性十分重要，但是目前就JAM-1在角膜紧密连接结构和功能方面的研究较少。目的确定JAM-1在大鼠角膜上皮层、基质层和内皮层的构成。方法选取4只SPF级Wistar大鼠，2只用于MM-J基因在角膜组织中表达的逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测，另2只用于免疫组织化学检测。动物过量麻醉处死后获得角膜组织并制备角膜上皮、基质和内皮标本，RT—PCR法检测角膜标本中JAM-1、occludin和claudin-1mRNA的表达。反应产物行质量分数1．5％琼脂糖凝胶电泳并用凝胶成像系统进行分析。用兔抗鼠JAM-1单克隆抗体对角膜石蜡切片、上皮及内皮铺片行免疫组织化学检测，评估JAM-1蛋白在大鼠角膜组织各层的表达部位和表达强度。结果在大鼠角膜各层均可检测到JAM-1、occludin和claudin-1mRNA的表达，PCR熔解曲线为清晰的单峰。角膜组织各层中JAM-1mRNA表达水平与occludinmRNA相似，均高于claudin-1mRNA。3种黏附分子均在上皮层表达最强，角膜基质层表达较弱。免疫组织化学检测显示，JAM-1蛋白在角膜各层均有明确的阳性染色，角膜上皮基底层的表达强于基质层和内皮层。角膜上皮、内皮铺片检测显示，JAM-1蛋白主要表达于上皮细胞和内皮细胞的连接部位，而角膜内皮中JAM-1蛋白的阳性染色广泛而弥散。结论JAM．1作为细胞连接的构成成分，在角膜上皮层、内皮层和基质层均有表达，但其表达的形态和水平因组织层次的不同而不同。 展开更多

关键词 接合黏附分子-1 紧密连接 角膜 逆转录聚合酶链反应 免疫组织化学

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干扰素-α转染HepG2细胞内下调表达基因的筛选

13

作者 张修礼 曲建慧 +4 位作者 徐东平 钟彦伟 刘妍 孙自勤 李兆申 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期35-38,共4页

目的筛选干扰素-α真核表达质粒转染HepG2细胞后细胞内表达下调的基因,以进一步探讨干扰素-α作用的分子生物学机制。方法将pcDNA3.1(-)-IFN-α以及pcDNA3.1(-)空载体分别转染肝母细胞瘤HepG2细胞系,用抑制性消减杂交技术筛选pcDNA3.1(-... 目的筛选干扰素-α真核表达质粒转染HepG2细胞后细胞内表达下调的基因,以进一步探讨干扰素-α作用的分子生物学机制。方法将pcDNA3.1(-)-IFN-α以及pcDNA3.1(-)空载体分别转染肝母细胞瘤HepG2细胞系,用抑制性消减杂交技术筛选pcDNA3.1(-)-IFN-α转染HepG2细胞内表达下调的基因。以pcDNA3.1(-)转染组细胞作为tester,pcDNA3.1(-)-IFN-α转染组作为driver,建立消减文库,随机挑选阳性克隆,测序并进行序列比对,得到下调表达的基因。应用RT-PCR技术,进一步证明IFN-α对Hsp90的下调表达作用关系。结果成功构建了IFN-α真核表达质粒转染HepG2细胞后表达下调的cDNA消减文库。从文库中随机挑选克隆,测序并进行生物信息学分析后,得到下调表达的基因有铁蛋白,热休克蛋白90,S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶1,真核翻译延伸因子1β,信号序列受体β(SSR2),组织因子路径抑制子,RAD23同源物B。RT-PCR进一步表明,IFN-α真核表达质粒转染的HepG2细胞内Hsp90mRNA表达水平下调。结论应用SSH技术成功构建了pcDNA3.1(-)-IFN-α转染的HepG2细胞内表达下调的cDNA消减文库,并筛选出下调表达基因,半定量RT-PCR表明IFN-α对Hsp90mRNA具有下调表达作用。为进一步阐明IFN-α作用的分子生物学机制提供了重要的理论依据。 展开更多

关键词 干扰素-Α 细胞系 肿瘤 抑制性消减杂交技术

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