Y111是维持血管内皮细胞生长抑制因子生物活性的关键氨基酸 被引量：1

1

作者 张珉 姚静娟 +2 位作者 潘欣 潘卫 戚中田 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期302-306,共5页

目的血管内皮细胞生长抑制因子(Vascu lar endothe-lial cell growth inh ib itor,VEG I)是近年来发现的一类TNF家族新成员,具有抑制内皮细胞增殖与新生血管生成的作用。但目前其结构功能关系研究尚为空白,该文研究VEG I空间结构上重要... 目的血管内皮细胞生长抑制因子(Vascu lar endothe-lial cell growth inh ib itor,VEG I)是近年来发现的一类TNF家族新成员,具有抑制内皮细胞增殖与新生血管生成的作用。但目前其结构功能关系研究尚为空白,该文研究VEG I空间结构上重要残基的作用极其对生物活性的影响。方法采用定点突变技术突变了四个关键氨基酸E45R,G47A,Y111F,Y111T,构建了表达载体并在大肠肝菌中表达及纯化,采用人脐静脉内皮细胞增殖和鸡胚尿囊膜血管生成实验研究了四个突变体的活性。结果E45R突变体的活性显著下降,G47A突变体的活性略低于野生型VEG I,Y111F,Y111T突变体的活性比野生型VEGI下降10倍以上。结论VEGI的第111位氨基酸Y是发挥其功能的关键氨基酸,可能与受体形成直接结合,且氨基酸Y上的苯环与酚羟基均对其活性的发挥具重要作用;第45位氨基酸E对其活性的发挥也具重要作用,而第47氨基酸对其活性的发挥可能不具重要作用。 展开更多

关键词 血管内皮细胞生长抑制因子(VEGI) 内皮细胞 定点突变 生物学活性

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肿瘤生物治疗基本原理探讨 被引量：1

2

作者 杜平 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1995年第3期183-184,共2页

本文从三个不同方面对肿瘤生物治疗基本原理进行了推测,怀抛砖引玉之目的,旨在引起同行对该问题的注意及讨论。“稳态”是一种普遍的生命现象,从“内环境”概念的提出到细胞因子网络调节分析了“稳态”在肿瘤生物治疗中的机制;从免疫监... 本文从三个不同方面对肿瘤生物治疗基本原理进行了推测,怀抛砖引玉之目的,旨在引起同行对该问题的注意及讨论。“稳态”是一种普遍的生命现象,从“内环境”概念的提出到细胞因子网络调节分析了“稳态”在肿瘤生物治疗中的机制;从免疫监督和肿瘤发生这一对矛盾中分析了免疫监督功能降-低肿瘤发生-生物疗法纠正免疫失衡三者之间的关系;癌变源于基因,人类基因组各种功能基因之间存在着“平衡”关系,从癌基因、肿瘤抑制基因及广义抗癌细胞因子基因水平评述这种平衡关系有助于指导现代肿瘤生物治疗和基因治疗研究。 展开更多

关键词 肿瘤生物治疗 免疫失衡 生物疗法 细胞因子网络 内环境 肿瘤发生 基因治疗 人类基因组 功能基因 生命现象

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SARS-CoVS蛋白功能性受体ACE2在人、兔角膜、结膜中的表达 被引量：27

3

作者 孙琰 潘欣 +1 位作者 柳林 倪灿荣 《眼科新进展》 CAS 2004年第5期332-336,共5页

目的　SARS冠状病毒 (SARS CoV)的S蛋白介导了病毒与宿主细胞的结合 ,最近已鉴定出SARS CoVS蛋白的功能性受体是血管紧张素转化酶 2 (angiotensin convertingenzyme 2 ,ACE2 )。本研究检测了ACE2在人、兔眼结膜、角膜中的表达 ,由此来... 目的　SARS冠状病毒 (SARS CoV)的S蛋白介导了病毒与宿主细胞的结合 ,最近已鉴定出SARS CoVS蛋白的功能性受体是血管紧张素转化酶 2 (angiotensin convertingenzyme 2 ,ACE2 )。本研究检测了ACE2在人、兔眼结膜、角膜中的表达 ,由此来初步推断SARS CoV由眼部入侵的可能。方法　分别采取 :(1)成人眼球破裂伤摘除的眼角膜和结膜组织 ;(2 ) 4～ 6月中期引产胎儿的眼角膜、结膜、心、肺组织 ;(3)兔眼角膜、结膜、心、肺组织 ;(4 )培养的人结膜成纤维细胞和兔角膜上皮细胞。分别采用RT PCR和免疫组化方法检测各组织、细胞中ACE2的表达。取尸体解剖的成人心、肺组织作为对照。结果　RT PCR法在上述各种组织和细胞中均检测到ACE2的扩增条带 ,其中胎儿、成人和兔的角膜、结膜扩增条带较心、肺稍弱 ,兔各组织的扩增条带亮度与对应的人体组织的扩增条带亮度相近。ACE2免疫组化反应产物主要位于胞浆和胞膜 ,呈棕黄色或棕褐色。角膜和结膜的上皮细胞及角膜内皮细胞呈明显的阳性表达 ,角膜和结膜的成纤维细胞呈弱阳性表达 ,培养的人结膜成纤维细胞和兔角膜上皮细胞亦可见阳性表达。兔组织中的ACE2表达强度及组织定位与人相近。结论　本研究从mRNA和蛋白质水平证实了眼组织存在SARS冠状病毒S蛋白的功能性受体ACE2 ,由? 展开更多

关键词 SARS-CoV S蛋白 功能性受体 血管紧张素转化酶2 角膜 结膜

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携带TIP30与人IFN-γ基因的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌的构建及抗腺样囊性癌的初步研究 被引量：7

4

作者 江中明 赵平 +2 位作者 高军 湛先保 吕春堂 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2004年第1期42-45,共4页

目的:构建含有TIP30与人IFN-γ基因的真核共表达质粒的减毒伤寒沙门氏菌,观察以减毒伤寒沙门氏菌为载体的,联合TIP30与IFN-γ的基因治疗对腺样囊性癌的疗效。方法:PCR扩增TIP30和人IFN-γ基因,分别插入真核表达载体pCI—neo,构建成重组... 目的:构建含有TIP30与人IFN-γ基因的真核共表达质粒的减毒伤寒沙门氏菌,观察以减毒伤寒沙门氏菌为载体的,联合TIP30与IFN-γ的基因治疗对腺样囊性癌的疗效。方法:PCR扩增TIP30和人IFN-γ基因,分别插入真核表达载体pCI—neo,构建成重组表达质粒pCI-TIP30、pCI-IFN和TIP30、IFN-γ基因共表达质粒pCI-TIP30/IFN。分别将重组表达质粒转化到减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207,体外感染小鼠巨噬细胞株,用免疫印迹和ELISA对表达产物进行鉴定,将重组菌口服给腺样囊性癌荷瘤裸鼠,观察其疗效。结果:免疫印迹试验表明质粒pCI-TIP30和pCI-TIP30/IFN转化菌感染的小鼠巨噬细胞能表达TIP30蛋白,ELISA检测则显示pCI-IFN和pCI-TIP30/IFN转化菌感染的小鼠巨噬细胞能分泌性表达人IFN-γ,减毒沙门氏菌本身和3种表达质粒转化的重组沙门氏菌对腺样囊性癌均有治疗作用,且TIP30与IFN-γ具有明显的协同作用。结论:成功构建了分别携有真核表达质粒pCI-TIP30、pCI—IFN、pCI-TIP30/IFN的减毒鼠伤寒沙门氏菌,对腺样囊性癌荷瘤裸鼠有显著的治疗作用。 展开更多

关键词 TIP30 干扰素-Γ 减毒伤寒沙门氏菌 基因治疗

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腺病毒介导mIFN-β基因转染的小鼠黑色素瘤细胞体内致瘤性及抗肿瘤作用的实验研究 被引量：4

5

作者 吴云 徐容 +6 位作者 曹广文 潘卫 陈秋莉 沈毅君 卢海妹 蔡春晓 邓松华 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期677-680,共4页

目的　研究腺病毒 (adenovirus,Ad)介导mIFN β基因转染的B16小鼠黑色素瘤细胞的体内致瘤性及抗肿瘤作用。方法　用携带mIFN β基因的重组腺病毒载体体外转染B16细胞 ,将该细胞接种于小鼠 ,观察其在小鼠体内的致瘤性及对野生型B16细胞... 目的　研究腺病毒 (adenovirus,Ad)介导mIFN β基因转染的B16小鼠黑色素瘤细胞的体内致瘤性及抗肿瘤作用。方法　用携带mIFN β基因的重组腺病毒载体体外转染B16细胞 ,将该细胞接种于小鼠 ,观察其在小鼠体内的致瘤性及对野生型B16细胞的致瘤性有无影响。结果　经腺病毒介导 ,mIFN β基因成功地导入B16细胞并获得有效表达 ;转mIFN β基因的B16细胞的体内致瘤性明显降低 ,并能抑制对侧野生型B16细胞的致瘤性。结论　该研究结果提示利用腺病毒载体携带IFN β基因来开发瘤苗治疗肿瘤具有良好的应用前景。目的　研究腺病毒 (adenovirus,Ad)介导mIFN β基因转染的B16小鼠黑色素瘤细胞的体内致瘤性及抗肿瘤作用。方法　用携带mIFN β基因的重组腺病毒载体体外转染B16细胞 ,将该细胞接种于小鼠 ,观察其在小鼠体内的致瘤性及对野生型B16细胞的致瘤性有无影响。结果　经腺病毒介导 ,mIFN β基因成功地导入B16细胞并获得有效表达 ;转mIFN β基因的B16细胞的体内致瘤性明显降低 ,并能抑制对侧野生型B16细胞的致瘤性。结论　该研究结果提示利用腺病毒载体携带IFN β基因来开发瘤苗治疗肿瘤具有良好的应用前景。 展开更多

关键词 干扰素-Β 瘤苗 腺病毒 黑色素瘤

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鲁南地区输血后丙型肝炎患者HCV基因分型 被引量：3

6

作者 于建国 张光曙 +4 位作者 杨德利 孙思才 韩纪举 潘伟 戚中田 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第6期443-444,共2页

鲁南地区输血后丙型肝炎患者ＨＣＶ基因分型２７１０００泰安解放军第８８医院于建国张光曙杨德利孙思才韩纪举潘伟①戚中田①关键词肝炎，丙型；聚合酶链反应中国图书资料分类号Ｒ５１２．６３丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因型与临床病情... 鲁南地区输血后丙型肝炎患者ＨＣＶ基因分型２７１０００泰安解放军第８８医院于建国张光曙杨德利孙思才韩纪举潘伟①戚中田①关键词肝炎，丙型；聚合酶链反应中国图书资料分类号Ｒ５１２．６３丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因型与临床病情及病理关系十分密切〔１〕。ＨＣＶ感... 展开更多

关键词 丙型肝炎 聚合酶链反应 输血 基因分型

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HIV-1 vif基因的RNA干扰体外研究 被引量：3

7

作者 江雪艳 卢洪洲 +3 位作者 陈秋丽 潘卫 张云智 沈银忠 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期32-36,共5页

目的利用RNAi技术对HIV-1 vif基因的转录后水平进行下调,达到抑制vif蛋白表达的目的,为新的抗HIV治疗和预防研究提供理论基础。方法通过体外转录法合成siRNA,与转接有vif基因的表达质粒共同转染HEK293T细胞,荧光显微镜下观察干扰效果,... 目的利用RNAi技术对HIV-1 vif基因的转录后水平进行下调,达到抑制vif蛋白表达的目的,为新的抗HIV治疗和预防研究提供理论基础。方法通过体外转录法合成siRNA,与转接有vif基因的表达质粒共同转染HEK293T细胞,荧光显微镜下观察干扰效果,并利用Real-time PCR和Western blot对HIV-1 vif分别从转录和表达水平进行验证。结果将pEGFP-N1-vif重组载体转染HEK 293T细胞后,结果显示vif蛋白可以在细胞中高水平表达;针对vif设计的3段特异的siRNA可以有效且特异地降低vif蛋白的表达。结论RNAi技术可以下调HIV-1蛋白的表达,此技术可以作为一项新的治疗和预防HIV-1的方法用于进一步的研究。 展开更多

关键词 人类免疫缺陷病毒(HIV) vif基因 vif蛋白 RNAI siRNA 人胚肾293T细胞 pEGFP—N1质粒

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肺腺癌组织特异性自杀基因治疗实验研究 被引量：3

8

作者 赵立军 李强 +3 位作者 白冲 李玉光 曹广文 戚中田 《中国肺癌杂志》 CAS 2004年第4期290-293,共4页

目的　探讨肺腺癌组织特异性自杀基因治疗的安全性及有效性。方法　采用病毒感染法 ,将癌胚抗原 (CEA)基因启动子所驱动的CD基因的组织特异性逆转录病毒载体 (G1 CEACDNa) ,导入分泌CEA的肺腺癌细胞系A5 49细胞 ,研究裸鼠体内抑瘤效果 ... 目的　探讨肺腺癌组织特异性自杀基因治疗的安全性及有效性。方法　采用病毒感染法 ,将癌胚抗原 (CEA)基因启动子所驱动的CD基因的组织特异性逆转录病毒载体 (G1 CEACDNa) ,导入分泌CEA的肺腺癌细胞系A5 49细胞 ,研究裸鼠体内抑瘤效果 ;应用重组逆转录病毒裸鼠体内治疗A5 49肿瘤 ,观察G1 CEACDNa/5 氟胞嘧啶 ( 5 FC)对A5 49细胞致瘤裸鼠的治疗作用及毒副反应。结果　 ( 1)将转基因的A5 49细胞和未转基因的A5 49细胞接种至裸鼠皮下 ,两者成瘤性无明显差异 ;( 2 )在转基因细胞致瘤裸鼠实验中 ,5 FC对转CEA启动子调控自杀基因的肿瘤生长具有明显的抑制作用 ;( 3 )将G1 CEACDNa重组逆转录病毒上清直接注射到裸鼠成瘤部位 ,然后腹腔内注射 5 FC同样获得明显的抑瘤效果 ;( 4 )与直接注射 5 FU相比 ,组织特异性自杀基因治疗对骨髓的抑制明显降低。结论　组织特异性自杀基因治疗可能成为肿瘤治疗个体化的重要方法之一。 展开更多

关键词 肺腺癌 自杀基因 癌胚抗原 基因治疗

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维持性血液透析病人HCV感染标志的检测及临床意义 被引量：3

9

作者 汪年松 竺艳娟 +2 位作者 潘卫 方芳 廖履坦 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 1999年第2期106-108,共3页

为了评价血液透析病人ＨＣＶ 感染状况及对肝功能的影响，对６２ 例维持性血液透析病人应用第二代酶联免疫吸附试验和逆转录聚合酶链反应检查抗－ ＨＣＶ 和ＨＣＶＲＮＡ。结果显示：６２ 例病人中，抗－ ＨＣＶ 阳性ＩｇＭ２７ 例（４... 为了评价血液透析病人ＨＣＶ 感染状况及对肝功能的影响，对６２ 例维持性血液透析病人应用第二代酶联免疫吸附试验和逆转录聚合酶链反应检查抗－ ＨＣＶ 和ＨＣＶＲＮＡ。结果显示：６２ 例病人中，抗－ ＨＣＶ 阳性ＩｇＭ２７ 例（４３－６ ％ ） ，抗－ ＨＣＶＩｇＧ 阳性２９ 例（４６－８ ％ ） ，ＨＣＶＲＮＡ阳性３４ 例（５４－８ ％ ） ，三项任一项阳性者３８ 例（５９－７ ％ ） ，阳性组与阴性组相比，两者在性别、年龄、肾功能、ＨＢＶ 标志、ＥＰＯ 应用、ＣＡＰＤ史无显著差异，而与平均透析时间、输血史、ＡＬＴ 异常、肾移植史有显著差异。提示血透病人中ＨＣＶ感染严重，输血为血透病人感染ＨＣＶ 的主要途径。 展开更多

关键词 丙型肝炎病毒 血液透析 输血 医源性传播

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血液透析患者感染丙型肝炎病毒分子流行病学研究 被引量：2

10

作者 汪年松 唐令诠 +3 位作者 竺艳娟 廖履坦 潘卫 方芳 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2000年第1期24-25,共2页

关键词 丙型肝炎病毒 血液透析 医源性 分子流行病学

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SARS冠状病毒S蛋白的功能性受体-ACE2 被引量：5

11

作者 孙琰 柳林 潘欣 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2004年第4期25-30,共6页

SARS冠状病毒的棘突S蛋白 ,与细胞受体介导的感染有关。血管紧张素转化酶 2 (ACE2 )是SARS CoVS蛋白的功能性受体 ,人类ACE2酶的细胞外区域由 2个亚基组成 ,其中锌金属肽酶区域可以进一步分成 2个亚域 (I和II) ,形成一个长而深的裂缝 ,... SARS冠状病毒的棘突S蛋白 ,与细胞受体介导的感染有关。血管紧张素转化酶 2 (ACE2 )是SARS CoVS蛋白的功能性受体 ,人类ACE2酶的细胞外区域由 2个亚基组成 ,其中锌金属肽酶区域可以进一步分成 2个亚域 (I和II) ,形成一个长而深的裂缝 ,环绕裂缝顶端的隆起线可能作为与S 糖蛋白结合的区域。ACE2可以与SARS CoVS蛋白的S3 1 8 5 1 0结合。这将为发展新型SARS疫苗和SARS的预防和治疗提供新的研究方向。 展开更多

关键词 SARS冠状病毒S蛋白 血管紧张素转化酶2 受体

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SARS-CoV S666蛋白与眼部ACE2受体的结合作用 被引量：4

12

作者 孙琰 柳林 潘欣 《眼科新进展》 CAS 2007年第4期250-253,共4页

目的研究SARS冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus,SARS-CoV)S666蛋白与眼部功能性受体-血管紧张素转化酶2(angiotensin-converting enzyme2,ACE2)的结合作用。方法构建SARS-CoV S666蛋白融合基因pS666-EGFP,并在... 目的研究SARS冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus,SARS-CoV)S666蛋白与眼部功能性受体-血管紧张素转化酶2(angiotensin-converting enzyme2,ACE2)的结合作用。方法构建SARS-CoV S666蛋白融合基因pS666-EGFP,并在哺乳动物细胞(293T细胞)中表达;酶联免疫吸附实验及流式细胞仪检测法进行SARS-CoV S666蛋白与结膜、角膜细胞及心、肺组织的体外结合研究。结果构建了融合基因pS666-EG-FP,琼脂糖凝胶电泳、SDS-PAGE及Western Blot分析证明SARS-CoV pS666-EGFP融合基因构建正确,基因表达产物与理论推算值相符,相对分子量约为100.7×103。酶联免疫吸附实验结果经析因方差分析显示:S666-EGFP蛋白与角膜上皮细胞、结膜成纤维细胞、结膜上皮细胞及结膜、角膜组织的结合能力比EGFP蛋白强(有统计学差异,P<0·001)。流式细胞仪检测结果显示:结膜上皮细胞、结膜成纤维细胞、角膜上皮细胞与S666-EGFP蛋白结合,但与EGFP蛋白均无结合。上述细胞及组织的结合能力较vero E6细胞及心、肺组织的结合能力稍弱。结合反应能够被ACE2抗体所阻滞,证实其为特异性结合。结论SARS-CoV S666蛋白与结膜、角膜细胞能够结合,对了解SARS的病理机制及进一步研究SARS的防护和治疗具有一定的参考意义。 展开更多

关键词 严重急性呼吸综合征冠状病毒 S666蛋白 血管紧张素转化酶2 结膜 角膜

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HIV Gag CAP2NC噬菌体蛋白酶切割模型的构建 被引量：1

13

作者 贾建安 周波 +7 位作者 蒋少华 陈秋莉 赵平 潘欣 温宗梅 邓松华 卢洪洲 潘卫 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第3期317-325,共9页

HIV蛋白酶(protease,PR)耐药突变的大量出现严重地影响了AIDS的治疗.应用突变PR对展示HIVPR靶序列随机文库的噬菌体进行切割筛选,可获得突变PR的敏感噬菌体,该噬菌体可用于针对HIVPR耐药突变株的蛋白酶抑制剂(protease inhibitor,PI)新... HIV蛋白酶(protease,PR)耐药突变的大量出现严重地影响了AIDS的治疗.应用突变PR对展示HIVPR靶序列随机文库的噬菌体进行切割筛选,可获得突变PR的敏感噬菌体,该噬菌体可用于针对HIVPR耐药突变株的蛋白酶抑制剂(protease inhibitor,PI)新药筛选.为了探索这一可能性,将包含HIVPR靶位点P2/NC序列的Gag蛋白CAP2NC片段展示于噬菌体表面,并在该片段的N端连接一可与人免疫球蛋白分子特异结合的固相化标签序列LD3,将该噬菌体固定于人免疫球蛋白包被的酶标板上,用HIVSF2PR进行切割,用抗M13噬菌体酶标抗体ELISA法检测未被切割的剩余噬菌体以反映切割效果.结果表明,所构建的噬菌体能被HIVPR有效切割,最大切割效应可达80%以上,其ELISA检测值明显下降,并且该切割效应与HIVPR呈明显的量效关系,能被PI类药物Indinavir(IDV)特异抑制.首次成功构建了展示HIV Gag CAP2NC片段的噬菌体蛋白酶切割模型,不仅可为研究HIVPR的耐药性变异及其靶序列的适应性变异提供一新的研究平台,同时也为构建一种全新的PI类药物,尤其是针对耐药的PI类药物大规模体外噬菌体筛选模型打下基础. 展开更多

关键词 人类免疫缺陷病毒 蛋白酶 蛋白酶抑制剂 药物筛选 噬菌体展示

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噬菌体展示免疫球蛋白结合分子定点随机突变组合文库的构建 被引量：1

14

作者 何俊 周霞 +7 位作者 陈璐 陈秋莉 王锦红 蒋少华 陈铭 卢海妹 潘卫 邓松华 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2007年第2期128-132,共5页

目的构建噬菌体展示免疫球蛋白结合分子定点随机突变组合文库,为应用各种类型免疫球蛋白对该文库进行体外分子进化筛选及结构和功能的研究打下基础。方法应用overlapping PCR制备Protein A的Z结构域。用含随机核苷酸序列的引物,制备对Z... 目的构建噬菌体展示免疫球蛋白结合分子定点随机突变组合文库,为应用各种类型免疫球蛋白对该文库进行体外分子进化筛选及结构和功能的研究打下基础。方法应用overlapping PCR制备Protein A的Z结构域。用含随机核苷酸序列的引物,制备对Z结构域的第10、13、27、28、31和32位氨基酸进行随机突变的定点随机突变体库。并在突变体片段两端引入KpnⅠ位点,3′端引入3个氨基酸大小随机连接肽的序列。经KpnⅠ酶切后随机连接,克隆于噬菌粒展示载体pCANTAB5S。克隆产物转化大肠杆菌TG1,辅助噬菌体M13K07拯救,构建噬菌体展示定点随机突变组合文库。结果该定点随机突变组合文库的转化子数目为6.4×106个,滴度为1.4×1015TU/L;文库中含0.72以上的阳性克隆,其中有2个单结构域的阳性克隆占0.15;15个样品的序列分析显示各突变位点和随机连接肽的氨基酸序列呈随机性分布。结论成功构建了噬菌体展示免疫球蛋白结合分子定点随机突变组合文库,该库库容量在一级结构上具有良好的随机性和多样性,可满足体外分子进化研究的要求。 展开更多

关键词 细菌噬菌体/遗传学 基因文库 免疫球蛋白结合分子 定点随机突变 随机连接肽 组合文库 体外分子进化

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HIV-1 HXB2株Tat蛋白在大肠杆菌中的分段表达及免疫原性分析 被引量：1

15

作者 陈璐 潘卫 +7 位作者 曹洁 卢海妹 何俊 蒋少华 唐萍 李存枚 廖文婷 邓松华 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2008年第3期239-243,共5页

目的研究对人类免疫缺陷病毒Ⅰ型HXB2株调控蛋白Tat原核表达产生影响的区域和Tat蛋白重要的抗原表位。方法用PCR方法获得Tat(1-48aa)、Tat(22-72aa)和Tat(38-101aa)DNA片段,构建其原核表达质粒pET32a-Tat(1-48aa)、pET32a-Tat(22-72aa)... 目的研究对人类免疫缺陷病毒Ⅰ型HXB2株调控蛋白Tat原核表达产生影响的区域和Tat蛋白重要的抗原表位。方法用PCR方法获得Tat(1-48aa)、Tat(22-72aa)和Tat(38-101aa)DNA片段,构建其原核表达质粒pET32a-Tat(1-48aa)、pET32a-Tat(22-72aa)和pET32a-Tat(38-101aa),并转入E.coliBL21(DE3)中进行诱导表达及纯化,SDS-PAGE鉴定表达及纯化产物。采用间接ELISA方法用兔抗pET32a-Tat抗血清对三种肽段进行免疫原性分析。结果成功构建了pET32a-Tat(1-48aa)、pET32a-Tat(22-72aa)和pET32a-Tat(38-101aa)质粒,分别表达出相对分子质量(Mr)为23×103、23×103和25×103的融合肽段,其浓度分别为4.26、3.35和5.11mg/ml。间接ELISA结果表明三种融合肽段与兔抗pET32a-Tat抗血清均呈特异性结合反应,其抗体滴度分别为1:128000、1:32000、1:64000,而抗血清与pET32a蛋白仅有较弱结合。结论半胱氨酸富集区(22-37位氨基酸)对Tat蛋白的原核表达有较显著影响;Tat蛋白的N端区、碱性区和C端区是其重要的抗原表位,其中N端区的免疫原性最强。 展开更多

关键词 HIV-1/遗传学 大肠杆菌/遗传学 基因产物 tat/遗传学 基因表达

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丙型肝炎病毒感染与治疗药物 被引量：10

16

作者 戚中田 《临床肝胆病杂志》 CAS 2011年第1期15-18,27,共5页

丙型肝炎病毒(HCV)通过在宿主细胞内持续复制,导致慢性感染。目前用于治疗慢性丙型肝炎(CHC)的药物主要是聚乙二醇干扰素(PEG-IFN)和利巴韦林的联合用药。本文将就HCV的细胞入侵、复制、逃避宿主的固有和获得性免疫,以及抗HCV临床试验... 丙型肝炎病毒(HCV)通过在宿主细胞内持续复制,导致慢性感染。目前用于治疗慢性丙型肝炎(CHC)的药物主要是聚乙二醇干扰素(PEG-IFN)和利巴韦林的联合用药。本文将就HCV的细胞入侵、复制、逃避宿主的固有和获得性免疫,以及抗HCV临床试验药物的最新进展做一综述。 展开更多

关键词 肝炎 丙型 肝炎病毒属

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重组人γ~2-干扰素对肝癌患者IgGFc段受体的调控研究

17

作者 缪晓辉 陈士葆 +4 位作者 孔宪涛 李石 李亚利 杜平 吴清璇 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1991年第6期431-434,共4页

用重组人γ-干扰素(rIFNγ)处理肝癌病人外周血单个核细胞(PBMC),观察细胞膜表面IgG Fc段受体(FcγR)的表达情况。ABC-ELISA方法检测FcγR。结果显示,肝癌病人内源性IFNγ水平及FcγR基础水平均低下。rIFNγ处理后,肝癌患者PBMC FcγR... 用重组人γ-干扰素(rIFNγ)处理肝癌病人外周血单个核细胞(PBMC),观察细胞膜表面IgG Fc段受体(FcγR)的表达情况。ABC-ELISA方法检测FcγR。结果显示,肝癌病人内源性IFNγ水平及FcγR基础水平均低下。rIFNγ处理后,肝癌患者PBMC FcγR表达明显增强,并与rIFNγ的剂量呈正相关。但对rIFNγ的增强效应显著低于正常对照组。推测,在肝癌病人,IFNγ的产生及FcγR的表达均有缺陷,外源性rIFNγ可通过增强FcγR表达发挥其免疫调节作用,是抗肿瘤机制之一。 展开更多

关键词 肝肿瘤 Γ-干扰素 FC受体

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细胞素功能本态论述

18

作者 杜平 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1996年第2期160-161,共2页

本文论述了CK基因按其职能应属于“应激基因类”,提出了根据IL-1的特点认为该CK成员可能是CK“网络活化枢纽”的论点;并根据这两点及稳定论(homeostastis)的观点论述了CK功能的本态或实质——即机体在应激状态下的调节平衡,CK即“调节... 本文论述了CK基因按其职能应属于“应激基因类”,提出了根据IL-1的特点认为该CK成员可能是CK“网络活化枢纽”的论点;并根据这两点及稳定论(homeostastis)的观点论述了CK功能的本态或实质——即机体在应激状态下的调节平衡,CK即“调节平衡素”。 展开更多

关键词 细胞素 功能本态 应激基因类 网络活化枢纽 调节平衡素

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干扰素临床应用评述 被引量：5

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作者 杜平 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1994年第1期15-17,共3页

干扰素(Interferons，IFNs)是现今公认的首要细胞素(Cytokine)。IFNs的研究范围很广，主要包括临床干扰素学、干扰素分子生物学、干扰素遗传学、干扰素生物化学、干扰素免疫学和干扰素生物学等。IFNs的临床效用是它的“生命”。就临床... 干扰素(Interferons，IFNs)是现今公认的首要细胞素(Cytokine)。IFNs的研究范围很广，主要包括临床干扰素学、干扰素分子生物学、干扰素遗传学、干扰素生物化学、干扰素免疫学和干扰素生物学等。IFNs的临床效用是它的“生命”。就临床干扰素学而言，其历史、现状和未来，可作如下概括和评述。 展开更多

关键词 干扰素 临床应用 干扰素分子生物学 干扰素遗传学 干扰素生物化学 干扰素免疫学 干扰素学

全文增补中

用随机6肽库筛选HGVE2抗原表位 被引量：8

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作者 柯屾 戚中田 +3 位作者 施明 王建安 姚志建 沈倍奋 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 2000年第4期533-536,共4页

利用抗 HGV E2区的 3株单克隆抗体 M6、M1 3、M30作为筛选配基 ,对随机 6肽库进行亲和筛选 . 3轮筛选的投入产出比逐轮升高至 3.5× 1 0 -3、假阳性率逐轮降低至 0 .4% ,提示具有良好的富集效果 .从第 3轮随机挑出 1 2个克隆进行功... 利用抗 HGV E2区的 3株单克隆抗体 M6、M1 3、M30作为筛选配基 ,对随机 6肽库进行亲和筛选 . 3轮筛选的投入产出比逐轮升高至 3.5× 1 0 -3、假阳性率逐轮降低至 0 .4% ,提示具有良好的富集效果 .从第 3轮随机挑出 1 2个克隆进行功能鉴定 ,结果表明 8个克隆与 M6抗体有较强的特异性结合力并有较好的竞争抑制作用 ,测序发现它们的外源肽具有核心序列 :WA( W/Y) WXH,该序列与 HGV同源性低 ;用外源肽与核心序列相似的噬菌体克隆 P6GC9做竞争抑制试验 ,约 3×1 0 10个噬菌体即可较好地抑制 M6单抗与 HGV抗原结合 .该多肽可能是 HGV E2区识别 M6单抗并具有一定功能的模拟表位 . 展开更多

关键词 噬菌体随机肽库 抗原表位 HGV

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