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SARS-CoVS蛋白功能性受体ACE2在人、兔角膜、结膜中的表达被引量：26: 1; 作者孙琰潘欣 +1 位作者柳林倪灿荣《眼科新进展》 CAS 2004年第5期332-336,共5页; 目的　SARS冠状病毒 (SARS CoV)的S蛋白介导了病毒与宿主细胞的结合 ,最近已鉴定出SARS CoVS蛋白的功能性受体是血管紧张素转化酶 2 (angiotensin convertingenzyme 2 ,ACE2 )。本研究检测了ACE2在人、兔眼结膜、角膜中的表达 ,由此来... 展开更多; 关键词 SARS-CoV S蛋白功能性受体血管紧张素转化酶2 角膜结膜; 在线阅读下载PDF 职称材料

SARS-CoV S240蛋白与眼部ACE2受体作用机制的研究被引量：9: 2; 作者孙琰柳林 +1 位作者潘欣景明《国际眼科杂志》 CAS 2006年第4期783-786,共4页; 目的:研究SARS冠状病毒(SARS-CoV)S240蛋白与眼部功能性受体-血管紧张素转化酶2(ACE2)作用的机制。方法:构建SARS-CoVS蛋白融合基因pS240-EGFP,并在哺乳动物细胞中表达;半定量RT-PCR和免疫组化鉴定ACE2在结膜、角膜中的表达;酶联免疫吸... 展开更多; 关键词严重急性呼吸综合征冠状病毒 S240蛋白受体血管紧张素转化酶2 结合作用; 在线阅读下载PDF 职称材料

乙型肝炎病毒X蛋白对肝癌细胞生长的影响被引量：5: 3; 作者李卫华缪晓辉 +2 位作者戚中田朱诗应赵克开《生物医学工程与临床》 CAS 2008年第3期235-239,F0002,共6页; 目的探讨乙型肝炎病毒X蛋白(hepatitis Bvirus Xprotein,HBx)对肝癌细胞恶性程度的影响。方法构建携带HBVx基因真核表达载体pcDNA3/HBx,以脂质体介导转染HepG2肝癌细胞,建立可稳定表达HBx的肝癌细胞系HepG2-HBx细胞,同时设空载体pcDNA3... 展开更多; 关键词肝癌细胞乙型肝炎病毒 X蛋白细胞周期细胞凋亡; 在线阅读下载PDF 职称材料

SARS-CoV S666蛋白与眼部ACE2受体的结合作用被引量：4: 4; 作者孙琰柳林潘欣《眼科新进展》 CAS 2007年第4期250-253,共4页; 目的研究SARS冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus,SARS-CoV)S666蛋白与眼部功能性受体-血管紧张素转化酶2(angiotensin-converting enzyme2,ACE2)的结合作用。方法构建SARS-CoV S666蛋白融合基因pS666-EGFP,并在... 展开更多; 关键词严重急性呼吸综合征冠状病毒 S666蛋白血管紧张素转化酶2 结膜角膜; 在线阅读下载PDF 职称材料

人翼状胬肉组织HMG-CoA还原酶和LDL受体基因的表达被引量：1: 5; 作者喻谦柳林王永志《国际眼科杂志》 CAS 2009年第2期284-285,共2页; 目的:研究LDL-R基因和HMG-CoA-R基因在翼状胬肉组织中的表达。方法:随机选取原发性和复发性翼状胬肉组织各10例,正常结膜组织10眼。实时荧光定量PCR技术分析结膜中HMG-CoA-R和LDL-R的相对mRNA含量。结果:原发性和复发性翼状胬肉中的HMG-... 展开更多; 关键词翼状胬肉低密度脂蛋白受体羟甲基戊二酰辅酶A还原酶实时荧光定量逆转录聚合酶链反应基因表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

截短的丙型肝炎病毒核心蛋白基因和绿色荧光蛋白基因在Sf9细胞中的融合表达: 6; 作者沈剑平朱诗应《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期267-269,共3页; 目的构建含截短的HCV核心蛋白基因和绿色荧光蛋白基因的重组杆状病毒表达载体,探讨其在Sf9细胞中的表达和抗原性。方法用PCR法扩增截短的HCV核心蛋白基因片段(Ct)和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因,将其插入转座子载体pFastBac1,构建成重... 展开更多; 关键词丙型肝炎病毒截短的核心蛋白绿色荧光蛋白昆虫Sf9细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名SARS-CoVS蛋白功能性受体ACE2在人、兔角膜、结膜中的表达被引量：26: 1; 作者孙琰潘欣柳林倪灿荣; 机构第二军医大学附属长海医院眼科第二军医大学微生物教研室第二军医大学附属长海医院病理科; 出处《眼科新进展》 CAS 2004年第5期332-336,共5页; 基金国家自然科学基金资助 (编号 :30 1 70 891 30 2 71 391 ) +3 种基金编号 :0 57) 编号 :2 0 0 3CB51 4 1 2 9)~~; 文摘目的　SARS冠状病毒 (SARS CoV)的S蛋白介导了病毒与宿主细胞的结合 ,最近已鉴定出SARS CoVS蛋白的功能性受体是血管紧张素转化酶 2 (angiotensin convertingenzyme 2 ,ACE2 )。本研究检测了ACE2在人、兔眼结膜、角膜中的表达 ,由此来初步推断SARS CoV由眼部入侵的可能。方法　分别采取 :(1)成人眼球破裂伤摘除的眼角膜和结膜组织 ;(2 ) 4～ 6月中期引产胎儿的眼角膜、结膜、心、肺组织 ;(3)兔眼角膜、结膜、心、肺组织 ;(4 )培养的人结膜成纤维细胞和兔角膜上皮细胞。分别采用RT PCR和免疫组化方法检测各组织、细胞中ACE2的表达。取尸体解剖的成人心、肺组织作为对照。结果　RT PCR法在上述各种组织和细胞中均检测到ACE2的扩增条带 ,其中胎儿、成人和兔的角膜、结膜扩增条带较心、肺稍弱 ,兔各组织的扩增条带亮度与对应的人体组织的扩增条带亮度相近。ACE2免疫组化反应产物主要位于胞浆和胞膜 ,呈棕黄色或棕褐色。角膜和结膜的上皮细胞及角膜内皮细胞呈明显的阳性表达 ,角膜和结膜的成纤维细胞呈弱阳性表达 ,培养的人结膜成纤维细胞和兔角膜上皮细胞亦可见阳性表达。兔组织中的ACE2表达强度及组织定位与人相近。结论　本研究从mRNA和蛋白质水平证实了眼组织存在SARS冠状病毒S蛋白的功能性受体ACE2 ,由?; 关键词 SARS-CoV S蛋白功能性受体血管紧张素转化酶2 角膜结膜; Keywords SARS coronavirus S protein functional recept or angiotensin-converting enzyme 2 cornea conjunctiva; 分类号 Q959.836 [生物学—动物学] R772 [医药卫生—眼科]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名SARS-CoV S240蛋白与眼部ACE2受体作用机制的研究被引量：9: 2; 作者孙琰柳林潘欣景明; 机构第二军医大学附属长海医院眼科第二军医大学微生物教研室解放军第四一一医院眼科; 出处《国际眼科杂志》 CAS 2006年第4期783-786,共4页; 文摘目的:研究SARS冠状病毒(SARS-CoV)S240蛋白与眼部功能性受体-血管紧张素转化酶2(ACE2)作用的机制。方法:构建SARS-CoVS蛋白融合基因pS240-EGFP,并在哺乳动物细胞中表达;半定量RT-PCR和免疫组化鉴定ACE2在结膜、角膜中的表达;酶联免疫吸附实验、流式细胞仪检测法进行SARS-CoVS240蛋白与结膜、角膜细胞的体外结合研究。结果:构建了融合基因pS240-EGFP;证实ACE2在结膜、角膜有表达;结膜、角膜细胞与SARS-CoVS240蛋白能够结合。结论:结膜、角膜中存在SARS冠状病毒的功能性受体,SARS-CoVS240蛋白与结膜、角膜细胞能够结合。本研究对了解SARS的病理机制及进一步研究SARS的防护和治疗具有一定的参考意义。; 关键词严重急性呼吸综合征冠状病毒 S240蛋白受体血管紧张素转化酶2 结合作用; Keywords SARS-CoV S240 protein ACE2 receptor mechanism; 分类号 R77 [医药卫生—眼科] R373 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名乙型肝炎病毒X蛋白对肝癌细胞生长的影响被引量：5: 3; 作者李卫华缪晓辉戚中田朱诗应赵克开; 机构第二军医大学附属长征医院感染科第二军医大学微生物教研室; 出处《生物医学工程与临床》 CAS 2008年第3期235-239,F0002,共6页; 基金上海市国际科技合作项目(055407036) 中国博士后基金资助项目(20060390594); 文摘目的探讨乙型肝炎病毒X蛋白(hepatitis Bvirus Xprotein,HBx)对肝癌细胞恶性程度的影响。方法构建携带HBVx基因真核表达载体pcDNA3/HBx,以脂质体介导转染HepG2肝癌细胞,建立可稳定表达HBx的肝癌细胞系HepG2-HBx细胞,同时设空载体pcDNA3转染细胞HepG2-pcDNA3及未转染HepG2细胞为对照组。PCR法扩增Neo基因检测插入的质粒DNA片段,免疫荧光检测HBx的表达。通过生长曲线测定、平板克隆形成实验、MTT比色实验、Hoechst33342核形态学染色观察及流式细胞仪测定,了解稳定转染细胞的生物学行为变化。结果与对照组相比,转染pcDNA3/HBx的HepG2-HBx细胞生长速度加快,其倍增时间缩短(28h对32.5h或34h,P<0.05),克隆形成率增加[(10.12±0.23)%对(5.33±0.19)%或(5.19±0.28)%,P<0.05],细胞周期分析显示由G0/G1期-S期的进程明显加快。细胞凋亡检测显示HepG2-HBx细胞可抵抗放线菌素D(ActD)诱导的凋亡作用。结论HBx可提高肝癌细胞的增殖活性,并增强肝癌细胞的抗凋亡能力,增加了肝癌细胞的恶性表型。; 关键词肝癌细胞乙型肝炎病毒 X蛋白细胞周期细胞凋亡; Keywords liver cancer cells hepatitis B virus X protein cell cycle cell apoptosis; 分类号 R735.7 [医药卫生—肿瘤] Q7 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名SARS-CoV S666蛋白与眼部ACE2受体的结合作用被引量：4: 4; 作者孙琰柳林潘欣; 机构解放军第第二军医大学附属长海医院眼科第二军医大学微生物教研室; 出处《眼科新进展》 CAS 2007年第4期250-253,共4页; 基金国家自然科学基金资助(编号:30271391 30170891) +1 种基金国家重点基础研究发展计划项目(编号:2003CB514129)~~; 文摘目的研究SARS冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus,SARS-CoV)S666蛋白与眼部功能性受体-血管紧张素转化酶2(angiotensin-converting enzyme2,ACE2)的结合作用。方法构建SARS-CoV S666蛋白融合基因pS666-EGFP,并在哺乳动物细胞(293T细胞)中表达;酶联免疫吸附实验及流式细胞仪检测法进行SARS-CoV S666蛋白与结膜、角膜细胞及心、肺组织的体外结合研究。结果构建了融合基因pS666-EG-FP,琼脂糖凝胶电泳、SDS-PAGE及Western Blot分析证明SARS-CoV pS666-EGFP融合基因构建正确,基因表达产物与理论推算值相符,相对分子量约为100.7×103。酶联免疫吸附实验结果经析因方差分析显示:S666-EGFP蛋白与角膜上皮细胞、结膜成纤维细胞、结膜上皮细胞及结膜、角膜组织的结合能力比EGFP蛋白强(有统计学差异,P<0·001)。流式细胞仪检测结果显示:结膜上皮细胞、结膜成纤维细胞、角膜上皮细胞与S666-EGFP蛋白结合,但与EGFP蛋白均无结合。上述细胞及组织的结合能力较vero E6细胞及心、肺组织的结合能力稍弱。结合反应能够被ACE2抗体所阻滞,证实其为特异性结合。结论SARS-CoV S666蛋白与结膜、角膜细胞能够结合,对了解SARS的病理机制及进一步研究SARS的防护和治疗具有一定的参考意义。; 关键词严重急性呼吸综合征冠状病毒 S666蛋白血管紧张素转化酶2 结膜角膜; Keywords severe acute respiratory syndrome coronavirus S666 protein angiotensin converting enzyme 2 conjunctiva cornea; 分类号 R777.44 [医药卫生—眼科]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人翼状胬肉组织HMG-CoA还原酶和LDL受体基因的表达被引量：1: 5; 作者喻谦柳林王永志; 机构成都医学院第一附属医院眼科上海第二军医大学第一附属医院眼科上海第二军医大学微生物教研室; 出处《国际眼科杂志》 CAS 2009年第2期284-285,共2页; 文摘目的:研究LDL-R基因和HMG-CoA-R基因在翼状胬肉组织中的表达。方法:随机选取原发性和复发性翼状胬肉组织各10例,正常结膜组织10眼。实时荧光定量PCR技术分析结膜中HMG-CoA-R和LDL-R的相对mRNA含量。结果:原发性和复发性翼状胬肉中的HMG-CoA-R及LDL-R的mRNA水平均明显高于正常球结膜组织,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:HMG-CoA-R和LDL-R基因可能参与翼状胬肉的发病过程。; 关键词翼状胬肉低密度脂蛋白受体羟甲基戊二酰辅酶A还原酶实时荧光定量逆转录聚合酶链反应基因表达; Keywords pterygium low-density lipoprotein receptors hydroxy methylglutaryl coenzyme A-reductase QRT-PCR gene expression; 分类号 R777.3 [医药卫生—眼科]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名截短的丙型肝炎病毒核心蛋白基因和绿色荧光蛋白基因在Sf9细胞中的融合表达: 6; 作者沈剑平朱诗应; 机构安庆市第一人民医院检验科第二军医大学微生物教研室; 出处《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期267-269,共3页; 基金国家自然科学基金项目(30080020); 文摘目的构建含截短的HCV核心蛋白基因和绿色荧光蛋白基因的重组杆状病毒表达载体,探讨其在Sf9细胞中的表达和抗原性。方法用PCR法扩增截短的HCV核心蛋白基因片段(Ct)和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因,将其插入转座子载体pFastBac1,构建成重组表达载体pFastCt-EGFP,转化大肠埃希菌DH10Bac,获得重组杆状病毒穿梭质粒BacmidCt-EGFP,转染昆虫Sf 9细胞。结果SDS-PAGE和western blot鉴定表明成功表达了分子量约40 000的融合蛋白。以ELISA法检测发现该融合蛋白能与28份抗HCV抗体阳性血清中的15份发生反应,阳性率为53.6%。结论该融合蛋白在昆虫Sf 9细胞中成功表达并具有一定的抗原性。; 关键词丙型肝炎病毒截短的核心蛋白绿色荧光蛋白昆虫Sf9细胞; Keywords hepatitis C virus truncated core protein gene EGFP fusion protein insect Sf 9 cells; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	SARS-CoVS蛋白功能性受体ACE2在人、兔角膜、结膜中的表达	孙琰潘欣柳林倪灿荣	《眼科新进展》 CAS	2004	26	在线阅读下载PDF 职称材料
2	SARS-CoV S240蛋白与眼部ACE2受体作用机制的研究	孙琰柳林潘欣景明	《国际眼科杂志》 CAS	2006	9	在线阅读下载PDF 职称材料
3	乙型肝炎病毒X蛋白对肝癌细胞生长的影响	李卫华缪晓辉戚中田朱诗应赵克开	《生物医学工程与临床》 CAS	2008	5	在线阅读下载PDF 职称材料
4	SARS-CoV S666蛋白与眼部ACE2受体的结合作用	孙琰柳林潘欣	《眼科新进展》 CAS	2007	4	在线阅读下载PDF 职称材料
5	人翼状胬肉组织HMG-CoA还原酶和LDL受体基因的表达	喻谦柳林王永志	《国际眼科杂志》 CAS	2009	1	在线阅读下载PDF 职称材料
6	截短的丙型肝炎病毒核心蛋白基因和绿色荧光蛋白基因在Sf9细胞中的融合表达	沈剑平朱诗应	《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心	2009	0	在线阅读下载PDF 职称材料