脑室注射脑源性神经营养因子对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的影响 被引量：5

1

作者 洪新如 郑铃 +1 位作者 侍坚 陈新民 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第8期680-682,共3页

为探讨脑源性神经营养因子 (BDNF)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的影响 ,以 7天龄大鼠一侧结扎颈总动脉联合低氧吸入形成缺氧缺血性脑损伤模型 ,伤后向脑室注射不同剂量 (0 2、0 5和 2 0 μg)BDNF ,观察对脑水肿、脑内脂质过氧化物 (M... 为探讨脑源性神经营养因子 (BDNF)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的影响 ,以 7天龄大鼠一侧结扎颈总动脉联合低氧吸入形成缺氧缺血性脑损伤模型 ,伤后向脑室注射不同剂量 (0 2、0 5和 2 0 μg)BDNF ,观察对脑水肿、脑内脂质过氧化物 (MDA)水平和细胞凋亡的影响。结果表明 ,给药后 2 4h0 5 μg组脑水肿程度显著降低 ;左脑MDA含量 2 0 μg组显著高于单纯损伤组和 0 5 μg组 ;3种不同剂量BDNF组细胞凋亡不同程度降低 ,其中 0 2 μg和 0 5 μg组降低更明显。提示BDNF对缺氧缺血性脑损伤后的皮层和海马具有显著的保护作用 。 展开更多

关键词 脑室注射 脑源性神经营养因子 新生儿窒息 HIE 新生儿缺氧缺血性脑病

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CNTF对应激大鼠行为障碍和海马CA1神经元损害的作用 被引量：8

2

作者 严进 路长林 +7 位作者 汤淑萍 何成 王成海 王雪琦 黄爱军 孟玲 鲍璇 张铁峰 《心理学报》 CSSCI CSCD 北大核心 2000年第2期210-216,共7页

实验采用 ｏｐｅｎ ｆｉｅｌｄ测定、 Ｎｉｓｓｌ染色、 Ｂｉｅｌｓｃｈｏｗｓｋｙ－Ｇｒｏｓ－Ｌａｗｒｅｎｔｊｅｗ染色和常规透射电镜技术，观察急性和慢性足底电击应激大鼠的ｏｐｅｎ ｆｉｅｌｄ行为和海马ＣＡ１神经元形态的变化... 实验采用 ｏｐｅｎ ｆｉｅｌｄ测定、 Ｎｉｓｓｌ染色、 Ｂｉｅｌｓｃｈｏｗｓｋｙ－Ｇｒｏｓ－Ｌａｗｒｅｎｔｊｅｗ染色和常规透射电镜技术，观察急性和慢性足底电击应激大鼠的ｏｐｅｎ ｆｉｅｌｄ行为和海马ＣＡ１神经元形态的变化，及双侧海马注射睫状神经营养因子（ＣＮＴＦ）对它的影响。结果表明，急性应激大鼠ｏｐｅｎ ｆｉｅｌｄ行为活动增加，海马ＣＡ１神经元形态无明显变化；慢性应激大鼠ｏｐｅｎ ｆｉｅｌｄ行为活动减少，海马ＣＡ１神经元出现明显的损伤性形态变化；睫状神经营养因子对对照组大鼠和急性应激大鼠的ｏｐｅｎ ｆｉｅｌｄ行为和海马ＣＡ１神经元形态均无明显作用，但可显著减轻慢性应激大鼠海马ＣＡ１神经元损伤程度，改善其行为障碍。实验结果提示睫状神经营养因子可能通过保护海马神经元从而改善慢性应激大鼠的行为障碍。 展开更多

关键词 CNTF 应激 海马 CA1神经元

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氢分子对H_2O_2体外诱导氧化损伤大鼠脊髓神经元的保护作用

3

作者 刘芳婷 李建 +3 位作者 李向南 徐盛眀 向正华 袁红斌 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期233-239,共7页

目的证明氢分子对过氧化氢(H2O2)诱导氧化损伤的大鼠脊髓神经元具有保护效应,并初步探讨其相关机制。方法将纯化培养7d后的大鼠脊髓神经元分为4组:(1)常规培养液(NM)对照组:以NM培养;(2)富氢培养液(HM)组:以HM培养;(3)NM+H2O2组:以NM培... 目的证明氢分子对过氧化氢(H2O2)诱导氧化损伤的大鼠脊髓神经元具有保护效应,并初步探讨其相关机制。方法将纯化培养7d后的大鼠脊髓神经元分为4组:(1)常规培养液(NM)对照组:以NM培养;(2)富氢培养液(HM)组:以HM培养;(3)NM+H2O2组:以NM培养2h后,加入100μmol/L H2O2和15μmol/L FeCl2继续培养;(4)HM+H2O2组:以HM培养2h后,加入100μmol/L H2O2和15μmol/L FeCl2继续培养。各组处理后每6h更换各自培养液及氧化剂,在12h后停止处理并检测神经元胞内活性氧(ROS)生成的水平、细胞凋亡情况,以及糖元合成激酶3β(GSK-3β)和p-GSK-3β的表达水平。结果与NM相比,HM可降低H2O2氧化损伤后神经元胞内ROS尤其是羟自由基(HO·)的生成(P<0.01),减少神经元凋亡的数量(P<0.01),下调caspase-3的表达(P<0.01),促进GSK-3β的磷酸化(P<0.01)。结论氢分子对H2O2氧化损伤的神经元具有保护效应,其机制与降低神经元胞内ROS尤其是HO·的生成、减少神经元凋亡的数量和抑制凋亡信号通路的激活以及促进GSK-3β的磷酸化利于神经元生长有关。 展开更多

关键词 氧化损伤 过氧化氢 活性氧 氢 神经元 细胞凋亡 糖原合成激酶3β

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可卡因-苯丙胺调节转录肽(CART)及其突变体的表达纯化及生物活性观察

4

作者 周京晶 路长林 由振东 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期319-321,共3页

目的:表达纯化可卡因-苯丙胺调节转录肽(CART)及其突变体,观察其对大鼠进食行为的影响。方法:PCR扩增CART活性片段CART55-102cDNA,构建表达CART55-102原核表达载体,并对其68位和94位半胱氨酸残基突变,构建表达CART55-102(Cys68Ser)和CAR... 目的:表达纯化可卡因-苯丙胺调节转录肽(CART)及其突变体,观察其对大鼠进食行为的影响。方法:PCR扩增CART活性片段CART55-102cDNA,构建表达CART55-102原核表达载体,并对其68位和94位半胱氨酸残基突变,构建表达CART55-102(Cys68Ser)和CART55-102(Cys94Ser)原核表达菌株,经IPTG诱导表达后,亲和层析纯化3种小肽;行为学技术检测原核表达小肽对大鼠进食行为的影响。结果:获得的重组CART55-102及其突变体的纯度在95%以上,产物得率约75%;CART55-102可显著抑制饥饿大鼠的进食行为,而68和94位突变体对饥饿大鼠的进食行为无明显影响。结论:原核表达系统可以成功制备高纯度CART活性小肽和突变体,68位和94位突变导致CART抑制进食的作用消失。 展开更多

关键词 可卡因一苯丙胺调节转录肽 突变体 基因表达 纯化 二硫键

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白细胞介素2镇痛功能位点氨基酸残基相对空间位置的重要性研究 被引量：2

5

作者 蒋春雷 徐荻 +2 位作者 曹蕾 路长林 刘新垣 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期83-85,共3页

免疫调节因子白细胞介素－２（ＩＬ－２）具有中枢镇痛作用，其功能位点由ＩＬ－２分子的第４４、４５和１０７、１１７位氨基酸残基共同组成。采用基因定点突变和ＰＣＲ技术，缺失ＩＬ－２分子第６６～９９位残基，改变第４４、４５位... 免疫调节因子白细胞介素－２（ＩＬ－２）具有中枢镇痛作用，其功能位点由ＩＬ－２分子的第４４、４５和１０７、１１７位氨基酸残基共同组成。采用基因定点突变和ＰＣＲ技术，缺失ＩＬ－２分子第６６～９９位残基，改变第４４、４５位残基与１０７、１１７位残基的相对空间位置，发现其镇痛功能消失。结果提示了组成ＩＬ－２分子镇痛功能位点的氨基酸残基间相对空间位置排列的重要性。 展开更多

关键词 白细胞介素2 氨基酸 残基 空间结构 镇痛

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静脉注射三种阿片肽拮抗剂对抗大鼠失血性休克效果的比较 被引量：6

6

作者 洪新如 李明 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第4期295-298,共4页

给♂ＳＤ大鼠颈动脉放血，使平均动脉压维持在６．６７ｋＰａ水平，形成出血性休克。从颈静脉给予不同阿片肽拮抗剂：β－内啡肽抗血清（１：３００００，１０μｌ）；β－ＦＮＡ（２ｍｇ）或促甲状腺素释放激素（ＴＲＨ，２ｍｇ），并... 给♂ＳＤ大鼠颈动脉放血，使平均动脉压维持在６．６７ｋＰａ水平，形成出血性休克。从颈静脉给予不同阿片肽拮抗剂：β－内啡肽抗血清（１：３００００，１０μｌ）；β－ＦＮＡ（２ｍｇ）或促甲状腺素释放激素（ＴＲＨ，２ｍｇ），并在随后１、２、３ｈ再给予上述剂量的半量。观察对出血性休克的影响。结果表明：β－内啡肽抗血清可回升动物血压，延缓心率的下降，改善血液生化指标，作用较持久，并可延长休克动物的存活时间；β－ＦＮＡ一定程度上改善休克动物的血压、心率和血液生化指标。ＴＲＨ对休克动物的血压有显著的提升作用，对心率也有延缓下降的作用，但作用短暂，后期心血管功能下降加快。这表明内源性阿片肽参与出血性休克，从不同层次拮抗其作用，有不同程度的抗休克效果，而以直接对抗β－内啡肽的抗休克效果最为明显。 展开更多

关键词 阿片肽拮抗剂 静脉注射 失血性 休克

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大鼠Nogo受体基因RNA干扰慢病毒载体的构建与鉴定 被引量：2

7

作者 吕碧涛 袁文 +2 位作者 徐盛明 刘百峰 曹莉 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期40-43,共4页

目的:构建大鼠Nogo受体(Nogoreceptor,NgR)基因RNA干扰慢病毒表达载体,并观察其对293T细胞感染效率。方法:应用基因工程技术,首先构建携带目的基因siNgR199的慢病毒穿梭质粒表达载体,然后使用慢病毒包装质粒混合物和构建好的慢病毒穿梭... 目的:构建大鼠Nogo受体(Nogoreceptor,NgR)基因RNA干扰慢病毒表达载体,并观察其对293T细胞感染效率。方法:应用基因工程技术,首先构建携带目的基因siNgR199的慢病毒穿梭质粒表达载体,然后使用慢病毒包装质粒混合物和构建好的慢病毒穿梭质粒共转染293T细胞,转染48h后收集上清离心过滤后冰浴保存,最后进行病毒滴度测定,与标准病毒液分别感染293T细胞,按MOI值分为5个梯度:1、3、5、10、20,以确定病毒滴度及适合感染的MOI值。其中采用PCR方法对重组载体进行鉴定,利用绿色荧光蛋白作为报告基因,对病毒滴度和感染效率进行检测。结果:酶切鉴定及PCR结果与病毒载体的预期结果一致,病毒滴度达1×108ifu/m1,适合感染的MOI值为3。结论:应用基因工程技术,成功构建了大鼠siNgR199慢病毒表达载体,为应用于治疗脊髓损伤后轴突再生创造了条件。 展开更多

关键词 慢病毒 NOGO受体 RNA干扰

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α-synuclein硝基化修饰在帕金森病中的研究进展 被引量：2

8

作者 王彦 俞仲望 朱臻宇 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期423-428,共6页

帕金森病是以中脑黑质多巴胺能神经元病变和胞内路易小体形成为特征的疾病。氧化应激导致的α-synuclein蛋白硝基化修饰很可能与帕金森病发生、发展相关。本文简述了α-synuclein和硝基化α-synuclein的理化性质、结构特征,综述了近年... 帕金森病是以中脑黑质多巴胺能神经元病变和胞内路易小体形成为特征的疾病。氧化应激导致的α-synuclein蛋白硝基化修饰很可能与帕金森病发生、发展相关。本文简述了α-synuclein和硝基化α-synuclein的理化性质、结构特征,综述了近年来关于其在生理和病理条件下的作用和效应方面的研究进展,并进一步探讨了导致帕金森病发生、发展的可能机制,为防治帕金森病提供新的线索。 展开更多

关键词 帕金森病 Α突触核蛋白 硝基化

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桥脑内侧网状结构,值得重视的麻醉靶位

9

作者 王嘉锋 李文献 王雪琦 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期334-336,共3页

桥脑内侧网状结构是脑干网状结构的重要组成部分之一,近年来受到麻醉医师的广泛关注,因为该部位不仅与意识状态密切相关,与镇痛、肌松及自主神经反射抑制也有一定关联,而这些正是麻醉医师所关注的麻醉效应。有关桥脑内侧网状结构的深入... 桥脑内侧网状结构是脑干网状结构的重要组成部分之一,近年来受到麻醉医师的广泛关注,因为该部位不仅与意识状态密切相关,与镇痛、肌松及自主神经反射抑制也有一定关联,而这些正是麻醉医师所关注的麻醉效应。有关桥脑内侧网状结构的深入研究,可能对全身麻醉作用机制的探索提供有力依据,同时可能使其成为有效的麻醉靶位,从而在提供充分的麻醉效应的同时减少麻醉并发症的发生。 展开更多

关键词 桥脑内侧网状结构 胆碱能神经元 全身麻醉

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Tat穿膜肽的临床应用研究进展 被引量：2

10

作者 蒋怡彬 俞仲望 徐晓辉 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期215-217,共3页

穿膜肽Tat(transcriptional activator protein)是一种带正电荷的短肽,可以协助大分子物质进入哺乳动物细胞。最近的研究表明,多种与Tat融合的物质能够穿过细胞膜而且可以发挥其生物学功能。这项技术对结合物的大小没有严格的限制,即使... 穿膜肽Tat(transcriptional activator protein)是一种带正电荷的短肽,可以协助大分子物质进入哺乳动物细胞。最近的研究表明,多种与Tat融合的物质能够穿过细胞膜而且可以发挥其生物学功能。这项技术对结合物的大小没有严格的限制,即使是原本无法使用的大分子物质也有可能用于治疗疾病。Tat已经在肿瘤、糖尿病、免疫治疗等临床领域展现出很大的研究价值,并且已经取得了不少新的进展,具有广泛的应用前景。 展开更多

关键词 穿膜肽 Tat基因产物 治疗应用 药物运输

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表观遗传学修饰在多发性硬化症中作用的研究进展 被引量：1

11

作者 赵明 曹莉 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期774-779,共6页

多发性硬化症既是经典的神经免疫性疾病,又是神经退行性疾病。越来越多的证据表明,表观遗传学改变与多发性硬化症的发病相关。表观遗传学修饰可以影响基因的表达,但不会改变DNA的序列。DNA甲基化、组蛋白修饰和微小RNA相关基因转录和翻... 多发性硬化症既是经典的神经免疫性疾病,又是神经退行性疾病。越来越多的证据表明,表观遗传学改变与多发性硬化症的发病相关。表观遗传学修饰可以影响基因的表达,但不会改变DNA的序列。DNA甲基化、组蛋白修饰和微小RNA相关基因转录和翻译的调控是表观遗传的3种重要机制。表观遗传学可能通过调节多发性硬化症的病因(包括遗传易感性和环境危险因素)和发病机制(包括炎症脱髓鞘和神经退行性变化的机制)的多个环节影响多发性硬化症的发病。本文综述了表观遗传学修饰在多发性硬化症发生中的作用,并为从表观遗传学角度治疗多发性硬化症提出建议。 展开更多

关键词 表观遗传学 多发性硬化 DNA甲基化 组蛋白类 微RNAS

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可卡因-苯丙胺调节转录肽蛋白疫苗在吗啡镇痛及其耐受中的作用

12

作者 宋娟 郭卫 +2 位作者 柴景蕊 由振东 路长林 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期349-352,共4页

目的:检测可卡因-苯丙胺调节转录肽(CART)蛋白疫苗在吗啡镇痛及其耐受中的作用。方法:利用基因克隆技术构建pGE-4T3-CART_(55-102)表达质粒,通过谷胱甘肽S转移酶(GST)亲和层析法纯化出GST-CART蛋白。实验分为6组:空白对照组,生理盐水组,... 目的:检测可卡因-苯丙胺调节转录肽(CART)蛋白疫苗在吗啡镇痛及其耐受中的作用。方法:利用基因克隆技术构建pGE-4T3-CART_(55-102)表达质粒,通过谷胱甘肽S转移酶(GST)亲和层析法纯化出GST-CART蛋白。实验分为6组:空白对照组,生理盐水组,GST+弗氏佐剂组,CART蛋白疫苗5μg组、10μg组和20μg组,免疫两次后热板法对各组进行痛反应检测。皮下注射6 mg/kg吗啡进行镇痛效应检测,计算最大镇痛效应百分率(MPE%)。随后建立吗啡耐受模型,并于末次给药12 h后皮下注射6 mg/kg吗啡进行耐受效应检测。结果:CART蛋白疫苗本身对基础痛阈没有影响(P>0.05)。10μg CART蛋白疫苗组显著降低了吗啡镇痛效应(P<0.05)。对比生理盐水组,疫苗组显示出抗耐受的潜力,其中10μg组MPE%增高具有显著性差异(P<0.05)。结论:CART蛋白疫苗本身对痛反应没有影响,但削弱了吗啡的镇痛效应,同时对吗啡镇痛耐受具有拮抗作用。 展开更多

关键词 可卡因-苯丙胺调节转录肽蛋白 疫苗 吗啡 镇痛 药物耐受性

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miRNA-449对SH-SY5Y细胞增殖活性的抑制作用

13

作者 王丹 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期512-517,522,共7页

目的寻找并验证miRNA-449的靶基因,探讨miRNA-449调控SH-SY5Y细胞增殖活性的分子机制。方法检测神经母细胞瘤及其癌旁组织中的miRNA-449及NOTCH1蛋白的表达并分析其相关性;生物信息学预测miRNA-449与NOTCH1基因3'UTR区的结合靶位,... 目的寻找并验证miRNA-449的靶基因,探讨miRNA-449调控SH-SY5Y细胞增殖活性的分子机制。方法检测神经母细胞瘤及其癌旁组织中的miRNA-449及NOTCH1蛋白的表达并分析其相关性;生物信息学预测miRNA-449与NOTCH1基因3'UTR区的结合靶位,并通过荧光素酶报告基因法进行验证;化学合成miRNA-449模拟物、miRNA-449抑制剂及miRNA-449错义序列,经脂质体转染至SH-SY5Y细胞,转染后48 h,real-time PCR检测细胞中miRNA-449表达,Western blotting检测细胞中NOTCH1蛋白表达;转染后24、48和72 h,CCK-8法检测肿瘤细胞增殖活性。结果与癌旁组织比较,肿瘤组织中miRNA-449表达明显升高,NOTCH1蛋白表达则明显降低,差异均有统计学意义(P=0.002和P=0.021)。miRNA-449在NOTCH1基因3'UTR区存在结合位点5'-CACTGCC-3',并且通过结合位点对NOTCH1基因表达进行负调控。miRNA-449模拟物转染SH-SY5Y细胞,明显抑制细胞内NOTCH1蛋白表达(P=0.006);而miRNA-449抑制剂转染细胞后可明显增强胞内NOTCH1蛋白表达(P=0.018)。在48和72 h时间点,miRNA-449模拟物可明显抑制SH-SY5Y细胞增殖活性,而miRNA-449抑制剂则使细胞增殖活性进一步增强。结论 miRNA-449可以通过抑制其靶基因NOTCH1表达抑制SH-SY5Y细胞增殖活性。 展开更多

关键词 mi RNA-449 SH-SY5Y细胞 荧光素酶 NOTCH1 细胞活性

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