四氧化三铁磁性纳米颗粒对人角质形成细胞超微结构的影响 被引量：3

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作者 汤莹 范晓燕 +3 位作者 羊富光 林方兴 金婵 杨勇骥 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期703-706,共4页

目的研究四氧化三铁(磁性Fe3O4)纳米颗粒对人角质形成细胞(HaCaT)超微结构的影响。方法将不同浓度的Fe3O4磁性纳米颗粒悬液加入培养的HaCaT细胞中,在37℃、5%CO2的细胞培养箱中共同孵育4h,收集细胞进行常规透射电镜制样,在透射电镜下观... 目的研究四氧化三铁(磁性Fe3O4)纳米颗粒对人角质形成细胞(HaCaT)超微结构的影响。方法将不同浓度的Fe3O4磁性纳米颗粒悬液加入培养的HaCaT细胞中,在37℃、5%CO2的细胞培养箱中共同孵育4h,收集细胞进行常规透射电镜制样,在透射电镜下观察纳米Fe3O4颗粒进入细胞的方式及细胞超微结构的改变。结果 Fe3O4磁性纳米颗粒平均粒径为12nm。在不同浓度下Fe3O4磁性纳米颗粒均能以吞噬的方式进入细胞,进入细胞后再从吞噬泡中释出,主要对其附近的线粒体造成影响,线粒体出现肿胀,线粒体嵴溶解。结论 Fe3O4磁性纳米颗粒主要对HaCaT细胞中颗粒附近的线粒体结构有损伤,且存在浓度依赖性。 展开更多

关键词 磁性纳米颗粒 四氧化三铁 HACAT细胞 超微结构

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纳米二氧化钛颗粒体外对人肺腺癌A549细胞的毒性效应 被引量：3

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作者 李晓林 张艳芳 +5 位作者 唐凯 汤莹 晋若冰 叶煦亭 金婵 杨勇骥 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1091-1095,共5页

目的探讨不同作用时间下粒径为25nm的锐钛矿型二氧化钛(TiO2)颗粒对人肺腺癌A549细胞的毒性效应。方法将100μg/ml的纳米TiO2颗粒悬液与A549细胞在37℃、5%CO2的细胞培养箱中分别孵育1h、4h、8h和24h后,收集细胞。通过乳酸脱氢酶(LDH)... 目的探讨不同作用时间下粒径为25nm的锐钛矿型二氧化钛(TiO2)颗粒对人肺腺癌A549细胞的毒性效应。方法将100μg/ml的纳米TiO2颗粒悬液与A549细胞在37℃、5%CO2的细胞培养箱中分别孵育1h、4h、8h和24h后,收集细胞。通过乳酸脱氢酶(LDH)检测实验检测纳米TiO2颗粒对细胞膜的损伤情况;通过ATP检测实验检测纳米TiO2颗粒对线粒体产生的影响;通过超氧化物歧化酶(SOD)活性检测实验检测纳米TiO2颗粒对细胞的氧化损伤情况;采用透射电子显微镜观察纳米TiO2颗粒引起细胞超微结构的变化;利用CCK-8法检测纳米TiO2颗粒对细胞存活率的影响。结果随着纳米TiO2颗粒作用时间的延长,细胞外液中LDH活性增强,细胞内ATP浓度降低,SOD活性降低,细胞存活率呈现明显下降(P<0.05),且细胞线粒体和内质网出现不同程度的肿胀和扩张。结论纳米TiO2颗粒体外能够引起肺腺癌细胞氧化损伤,抑制细胞生长,且对细胞的毒性效应存在时间依赖性。 展开更多

关键词 纳米粒子 二氧化钛 肺肿瘤 细胞毒性

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心力衰竭时大鼠心肌细胞肌浆网钙回摄的变化 被引量：3

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作者 沈亚峰 袁青宁 +5 位作者 汤莹 雷长海 范晓燕 林方兴 张玉霞 杨勇骥 《电子显微学报》 CAS CSCD 2015年第1期55-61,共7页

目的:探讨心力衰竭时心肌细胞肌浆网钙回摄异常的机制。方法:结扎大鼠冠状动脉左前降支制备慢性心衰模型。4周后采用酶解法分离假手术组和心衰组大鼠心室肌细胞,利用激光扫描共聚焦显微镜检测心肌细胞肌浆网钙含量。采用western-blot技... 目的:探讨心力衰竭时心肌细胞肌浆网钙回摄异常的机制。方法:结扎大鼠冠状动脉左前降支制备慢性心衰模型。4周后采用酶解法分离假手术组和心衰组大鼠心室肌细胞,利用激光扫描共聚焦显微镜检测心肌细胞肌浆网钙含量。采用western-blot技术检测心肌细胞肌浆网钙调蛋白SERCA2a、PLN、PP1的表达水平。结果:心衰组的大鼠心肌细胞荧光强度小于假手术组,并且心衰组大鼠心肌细胞咖啡因诱导的钙瞬变也低于假手术组;心衰组大鼠心SERCA2a表达水平降低,PP1的水平升高,PLN总体水平不变,但磷酸化的PLN水平降低。结论:钙泵表达量下降和钙泵活性降低是心力衰竭时心肌细胞肌浆网钙回摄减少的主要原因。 展开更多

关键词 心力衰竭 钙瞬变 SERCA2A PLN PP1 激光扫描共聚焦显微技术

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PKA信号通路与ryanodine受体介导的心肌肌浆网钙泄漏关系的研究 被引量：2

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作者 刘关省 沈亚峰 +3 位作者 王永亮 胡淑婷 汤莹 杨勇骥 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期567-572,共6页

目的:研究β肾上腺素激活的PKA信号通路与成年大鼠心肌细胞RyR2介导的肌浆网Ca2+泄漏之间的关系,探讨治疗心力衰竭的新方法。方法:NiCl2(5mmol/L)和毒胡萝卜素(TG,100nmol/L)分别阻断成年大鼠心室肌细胞的钠钙交换体和钙泵,胞外灌流异... 目的:研究β肾上腺素激活的PKA信号通路与成年大鼠心肌细胞RyR2介导的肌浆网Ca2+泄漏之间的关系,探讨治疗心力衰竭的新方法。方法:NiCl2(5mmol/L)和毒胡萝卜素(TG,100nmol/L)分别阻断成年大鼠心室肌细胞的钠钙交换体和钙泵,胞外灌流异丙肾上腺素(ISO,1μmol/L)。采用激光扫描共聚焦显微镜记录灌流前后细胞内钙火花及[Ca2+]i的变化,并使用Ca2+通道阻断剂钌红(RR,5μmol/L)对β肾上腺素刺激作用进行逆转,进而阻断RyR2介导的肌浆网内钙泄漏。结果:ISO胞外灌流后,心肌细胞钙火花发生率和[Ca2+]i与对照组相比明显升高(n=10,P<0.05);加入RR后,心肌细胞内钙火花发生率与对照组比较显著降低(n=20,P<0.05),[Ca2+]i两组没有明显差别(n=20,P>0.05)。结论:ISO激活PKA信号通路后可诱导心肌细胞RyR2介导的钙泄漏,RR可有效地逆转这种钙泄漏。 展开更多

关键词 PKA信号通路 RyR2 ISO RR 钙火花发生率 [CA2+]I

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CGP37157对静息期心肌细胞钙循环的影响 被引量：2

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作者 王永亮 沈亚峰 +3 位作者 刘关省 胡淑婷 汤莹 杨勇骥 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期239-243,共5页

目的:研究离子通道阻断剂CGP37157对成年大鼠静息期心肌细胞钙循环的影响。方法:(1)32只雄性SD大鼠随机等分为4组,用于测定心肌组织中cAMP的含量。对照组不灌流CGP37157,实验组分3个时间梯度:用10μmol/L CGP37157灌流心脏15 min、30 mi... 目的:研究离子通道阻断剂CGP37157对成年大鼠静息期心肌细胞钙循环的影响。方法:(1)32只雄性SD大鼠随机等分为4组,用于测定心肌组织中cAMP的含量。对照组不灌流CGP37157,实验组分3个时间梯度:用10μmol/L CGP37157灌流心脏15 min、30 min和60 min;(2)20只雄性SD大鼠随机均分为两组,对照组和实验组(细胞池中加入10μmol/L CGP37157)采用常规酶解法分离心肌细胞,激光扫描共聚焦显微镜记录钙瞬变;利用SPSS11.5统计软件进行数据处理,所有数据以均数±标准差(x珋±SD)表示,两组间均数的比较采用t检验。P<0.05为差异有统计学意义。结果:(1)心肌组织中cAMP含量的比较:CGP37157引起心肌组织cAMP的含量显著增加(n=8,P<0.05),对照组、15 min、30 min和60 min各组测得的cAMP的含量分别为(791±35)pmol/g、(1 101±55)pmol/g、(1 525±40)pmol/g、(2 017±60)pmol/g;60 min组较30 min组cAMP含量显著增加(n=8,P<0.05);(2)对静息期肌浆网钙循环的影响:实验组钙存储改变量(20.2±0.8)显著高于对照组(0.3±0.3;n=10,P<0.01);实验组钙释放速率变化(5.02±0.015)比对照组显著增大(1.01±0.006;n=10,P<0.01);实验组钙回摄速率变化(1.08±0.15)与对照组没有差异(0.99±0.09;n=10,P>0.05)。结论:CGP37157导致静息期心肌细胞钙循环的异常,原因可能为其导致PKA通路异常。 展开更多

关键词 CGP37157 心肌细胞 钙循环

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膜片钳-激光扫描共聚焦显微镜同步实时控制系统的建立及其在心肌细胞膜钙离子通道研究中的应用

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作者 刘红 王晔 +3 位作者 汤莹 沈亚峰 杨勇骥 雷长海 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期123-129,共7页

目的建立膜片钳-激光扫描共聚焦显微镜同步实时控制系统,并将其应用于体外心肌细胞膜钙离子通道的研究,验证其应用效果。方法通过在激光扫描共聚焦显微镜上加装膜片钳装置,采用计算机自动控制技术建立膜片钳与激光扫描共聚焦显微镜的同... 目的建立膜片钳-激光扫描共聚焦显微镜同步实时控制系统,并将其应用于体外心肌细胞膜钙离子通道的研究,验证其应用效果。方法通过在激光扫描共聚焦显微镜上加装膜片钳装置,采用计算机自动控制技术建立膜片钳与激光扫描共聚焦显微镜的同步实时控制系统;将建立好的装置应用于观察体外雄性大鼠心肌细胞膜钙离子通道,并分析观察结果。结果成功建立膜片钳-激光扫描共聚焦显微镜同步实时控制系统;当刺激心肌细胞时,激光扫描共聚焦显微镜-膜片钳同步实时控制系统在通过激光扫描共聚焦显微镜观察钙火花的同时可通过膜片钳记录心肌细胞膜钙离子通道电流信号。定量分析结果表明相邻两个钙火花之间的时间间距分别为(10.055±0.021)、(10.079±0.021)、(10.087±0.021)s,符合膜片钳设定的刺激间隔(10 s);单个钙火花在空间上均局限于2μm直径范围,在时间上平均经历了约30 ms,从出现至达到最高浓度平均需10 ms,从达到最高浓度到消失平均需20 ms,与钙火花理论吻合。结论成功建立膜片钳-激光扫描共聚焦显微镜同步实时控制系统,在心肌细胞实现了在利用膜片钳进行全细胞记录观测和测定钙离子通道电流及其开闭时程的同时,利用激光扫描共聚焦显微镜获得了钙火花的显微结构形态图像,测定钙离子的位点变化,有助于进一步了解质膜钙离子通道的内部机制。 展开更多

关键词 膜片钳术 共焦显微镜检查 同步控制 钙通道

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槐定碱对心肌梗死大鼠心功能及心肌细胞超微结构的影响 被引量：3

7

作者 路红 沈亚峰 +3 位作者 曹密 宋晓伟 汤莹 杨勇骥 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期470-473,共4页

目的研究槐定碱对心肌梗死大鼠心功能及心肌细胞超微结构的影响。方法采用结扎冠状动脉左前降支方法制备SD大鼠心肌梗死模型,随机分为模型对照组和槐定碱低、中、高(5、10、20 mg/kg)剂量组,另设假手术组,每组10只。实验结束后测定左室... 目的研究槐定碱对心肌梗死大鼠心功能及心肌细胞超微结构的影响。方法采用结扎冠状动脉左前降支方法制备SD大鼠心肌梗死模型,随机分为模型对照组和槐定碱低、中、高(5、10、20 mg/kg)剂量组,另设假手术组,每组10只。实验结束后测定左室舒张末压(LVEDP),左室内压最大上升、下降速率(±dp/dtmax)和心脏质量指数(HM/BM),用透射电子显微镜观察各组大鼠心肌细胞超微结构的变化。结果与假手术组相比,模型对照组的±dp/dtmax降低,LVEDP升高,HM/BM升高(P均<0.01);与模型对照组相比,加药各组的±dp/dtmax升高,LVEDP降低,HM/BM降低,除低剂量组-dp/dtmax外,余者与模型对照组相比差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05);电镜结果显示假手术组大鼠心肌细胞肌丝排列整齐,线粒体结构正常。模型对照组大鼠心肌细胞肌丝溶解,线粒体肿胀,嵴模糊不清,有显著的病理学改变;槐定碱低剂量组的肌丝溶解有轻微恢复,中、高剂量组肌丝溶解现象消失,肌丝排列整齐。结论槐定碱能改善心肌梗死大鼠的心功能,减轻心肌细胞超微结构的损伤。 展开更多

关键词 槐定碱 心肌梗死 心脏功能 超微结构

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槐定碱对心力衰竭大鼠心肌细胞钙诱导钙释放的影响 被引量：2

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作者 路红 沈亚峰 +4 位作者 曹密 胡淑婷 宋晓伟 汤莹 杨勇骥 《电子显微学报》 CAS CSCD 2012年第3期235-242,共8页

目的:研究槐定碱对心力衰竭大鼠心肌细胞钙诱导钙释放的影响。方法:结扎大鼠冠状动脉左前降支制备心力衰竭模型,随机分为假手术组、心力衰竭组、槐定碱5 mg/kg、10 mg/kg和20 mg/kg剂量组。4周后酶解法分离各组大鼠心室肌细胞,采用膜片... 目的:研究槐定碱对心力衰竭大鼠心肌细胞钙诱导钙释放的影响。方法:结扎大鼠冠状动脉左前降支制备心力衰竭模型,随机分为假手术组、心力衰竭组、槐定碱5 mg/kg、10 mg/kg和20 mg/kg剂量组。4周后酶解法分离各组大鼠心室肌细胞,采用膜片钳和激光扫描共聚焦显微镜同步实时记录系统记录心肌细胞的L-型钙电流(ICa.L)及胞浆内的钙瞬变。结果:心力衰竭组大鼠心肌细胞的ICa.L、钙火花发生率及钙瞬变峰值明显低于假手术组;槐定碱中剂量和高剂量组大鼠心肌细胞的ICa.L、钙火花发生率及钙瞬变峰值明显高于心力衰竭组;槐定碱低剂量组与心力衰竭组相比差异不显著。结论:一定浓度的槐定碱对改善心力衰竭大鼠心肌细胞钙诱导钙释放功能具有重要的作用。 展开更多

关键词 槐定碱 心肌细胞 心力衰竭 钙诱导钙释放 L-型钙电流 激光扫描共聚焦显微镜

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白介素17的进化及结构分析 被引量：1

9

作者 李君 宋军健 +2 位作者 马川 杨勇骥 赵华强 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期17-23,共7页

目的从系统发生学和结构生物信息学的角度探讨脊椎动物白介素17(IL-17)基因的起源及其蛋白质结构。方法从美国国家生物技术信息中心(NCBI)及联合基因组研究所(JGI)数据库搜索得到全部已知的人、斑马鱼和文昌鱼IL-17蛋白质序列,同时从另... 目的从系统发生学和结构生物信息学的角度探讨脊椎动物白介素17(IL-17)基因的起源及其蛋白质结构。方法从美国国家生物技术信息中心(NCBI)及联合基因组研究所(JGI)数据库搜索得到全部已知的人、斑马鱼和文昌鱼IL-17蛋白质序列,同时从另外几个数据库中搜索得到鸡、海鞘等7种常见模式生物的部分IL-17蛋白质序列。利用MEGA软件为这些蛋白质序列构建系统发生树,并用MODELLER软件预测斑马鱼、文昌鱼、海鞘、线虫IL-17的三维结构,再与已有的人IL-17F晶体结构进行比较分析。结果虽然所有IL-17蛋白质序列中都含有4个保守的可能形成一个"半胱氨酸结"构象的半胱氨酸残基,但文昌鱼展示出两种不同的分布模式,其中一种与脊椎动物的分布模式相似,另一种是文昌鱼自身特有。系统发生树显示,脊椎动物IL-17基因的直系同源(ortholog)在文昌鱼基因组中没有出现,而出现于海鞘基因组中。IL-17蛋白质三维模型的比较结果与系统发生树一致。结论文昌鱼的IL-17可能是IL-17进化的分歧点,脊椎动物IL-17基因的直系同源可能最早出现于尾索动物。 展开更多

关键词 白介素17 比较基因组学 系统发生树 蛋白质结构

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单壁碳纳米管的肺毒性及氧化应激机制 被引量：1

10

作者 吕高建 汤莹 +4 位作者 沈亚峰 雷长海 赵文茹 陈新 杨勇骥 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期815-820,共6页

目的研究单壁碳纳米管(single-wall carbon nanotubes,SWCNTs)的肺毒性,并探讨其毒性机制,为安全生产和应用SWCNTs提供实验依据。方法 A549细胞用质量浓度为0、25、50、100、150、200μg/mL的SWCNTs溶液孵育24h,用CCK-8和乳酸脱氢酶(lac... 目的研究单壁碳纳米管(single-wall carbon nanotubes,SWCNTs)的肺毒性,并探讨其毒性机制,为安全生产和应用SWCNTs提供实验依据。方法 A549细胞用质量浓度为0、25、50、100、150、200μg/mL的SWCNTs溶液孵育24h,用CCK-8和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)试剂盒分别检测SWCNTs对A549细胞活性和细胞膜的影响,Hoechst33342和PI荧光双染法检测细胞死亡情况,透射电镜(TEM)观察细胞超微结构变化,并检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平、谷胱甘肽(glutathione,GSH)浓度和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力以评估氧化应激情况。分别将0.5mg/mL和1mg/mL的SWCNTs溶液通过气管灌流的方法使大鼠肺部染毒,3d后取大鼠肺脏,常规H-E染色,检测肺组织病理学变化。结果 SWCNTs对A549细胞表现出明显毒性,使细胞活性降低,死亡细胞增多,细胞膜和细胞结构损伤严重,细胞内ROS水平升高,GSH浓度和SOD活力降低。体内毒性检测结果表明SWCNTs在大鼠肺组织内积累,造成肺泡壁水肿增厚。结论体外细胞毒性检测和动物毒性检测结果表明SWCNTs具有较大的肺毒性,其主要毒性机制是氧化应激反应。 展开更多

关键词 单壁碳纳米管 肺毒性 氧化性应激 氧化还原平衡

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膜蛋白电镜结构检测的研究进展 被引量：3

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作者 袁青宁 雷长海 杨勇骥 《电子显微学报》 CAS CSCD 2015年第2期149-153,共5页

膜蛋白是生物蛋白家族的重要组成部分,由于膜蛋白所处的特殊的空间位置,对膜蛋白结构和功能的研究越来越多。单颗粒研究方法和冷冻断层方法是利用电子显微镜结构解析研究膜蛋白结构的两种主要方法。近些年以来,由于数据处理能力以及制... 膜蛋白是生物蛋白家族的重要组成部分,由于膜蛋白所处的特殊的空间位置,对膜蛋白结构和功能的研究越来越多。单颗粒研究方法和冷冻断层方法是利用电子显微镜结构解析研究膜蛋白结构的两种主要方法。近些年以来,由于数据处理能力以及制样技术的迅速进步,膜蛋白的电镜结构研究已经取得了巨大的进展。本文主要对膜蛋白结构研究方法中的冷冻断层成像技术和单颗粒研究方法作了一个简单的介绍。 展开更多

关键词 膜蛋白 三维重构 单颗粒方法 冷冻断层方法

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多普勒彩超辐照对不同孕期胎鼠脑组织超微结构的影响 被引量：2

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作者 朱海燕 袁青宁 杨勇骥 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1025-1028,共4页

目的采用多普勒彩超辐照不同孕期大鼠,观察超声对胎鼠脑组织超微结构的影响。方法采用多普勒彩超照射不同孕期大鼠(孕12d、15d、18d)30min,仪器采用PREIRUS型彩色电脑声像仪,照射条件:EUP-LTM4探头,二维频率5.0 MHz,组织热指数(Tis)=0.4... 目的采用多普勒彩超辐照不同孕期大鼠,观察超声对胎鼠脑组织超微结构的影响。方法采用多普勒彩超照射不同孕期大鼠(孕12d、15d、18d)30min,仪器采用PREIRUS型彩色电脑声像仪,照射条件:EUP-LTM4探头,二维频率5.0 MHz,组织热指数(Tis)=0.4,机械指数(Micd)=1.2。照射后24h取胚胎脑组织标本,利用透射电镜(TEM)观察细胞器超微结构变化。结果经过多普勒彩超辐照30min后,孕期12d胎鼠神经元细胞器超微结构改变不明显,偶见线粒体嵴溶解,内质网未见明显扩张,细胞核形状较规则,胞质中有较小的空泡出现;孕期15d胎鼠神经元细胞器超微结构改变明显,细胞器损伤程度重于12d胎鼠;孕期18d胎鼠可见明显超微结构改变,内质网明显扩张,细胞核形态严重不规则,线粒体嵴溶解更明显,核周间隙扩张,胞质中出现较大空泡。结论多普勒彩超辐照对不同孕期胎鼠脑组织中细胞器超微结构的影响不同,胎鼠孕期越早,相同的辐照对其影响越小。 展开更多

关键词 胚胎发育 彩色多普勒超声检查 脑 超微结构

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Presenilin1基因对心肌细胞肌浆网钙容量的影响

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作者 王飞飞 吕园园 +9 位作者 沈亚峰 袁青宁 李天 胡适 范晓燕 汤莹 林方兴 叶煦亭 雷长海 杨勇骥 《电子显微学报》 CAS CSCD 2017年第2期147-152,共6页

目的:探讨Presenilin1基因对心肌细胞肌浆网钙容量的影响。方法:本实验以AAV-9为载体构建心肌特异性PS1-shRNA重组腺相关病毒,通过尾静脉注射PS1-shRNA重组腺相关病毒干扰大鼠心肌组织中Presenilin1基因的表达,并利用激光扫描共聚焦显... 目的:探讨Presenilin1基因对心肌细胞肌浆网钙容量的影响。方法:本实验以AAV-9为载体构建心肌特异性PS1-shRNA重组腺相关病毒,通过尾静脉注射PS1-shRNA重组腺相关病毒干扰大鼠心肌组织中Presenilin1基因的表达,并利用激光扫描共聚焦显微镜检测并记录心肌细胞肌浆网钙容量及舒张期自发钙释放事件的变化;同时,采用western blot技术分析各组大鼠心肌组织中雷诺丁受体及钙泵表达水平的改变。结果:与对照组相比,PS1-shRNA重组腺相关病毒干预组大鼠心肌细胞肌浆网钙容量显著降低,自发钙释放事件明显增加;雷诺丁受体表达水平略降低,钙泵表达水平无显著性变化。结论:Presenilin1基因表达水平降低会引起心肌细胞钙泄漏,从而造成心肌细胞肌浆网钙容量降低。 展开更多

关键词 Presenilin1基因 肌浆网 钙容量 钙泄漏

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霍乱弧菌HutX蛋白的晶体结构

14

作者 李君 巩晶 +1 位作者 杨勇骥 黄琰 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期969-973,共5页

目的获取纯化的霍乱弧菌HutX蛋白晶体和衍射数据。方法通过基因克隆和蛋白表达得到HutX蛋白,通过镍柱亲和层析、Source Q阴离子交换柱层析和Superdex 200分子筛柱层析等纯化所得蛋白,并用蛋白质印迹法进行验证。将所获蛋白进行结晶条件... 目的获取纯化的霍乱弧菌HutX蛋白晶体和衍射数据。方法通过基因克隆和蛋白表达得到HutX蛋白,通过镍柱亲和层析、Source Q阴离子交换柱层析和Superdex 200分子筛柱层析等纯化所得蛋白,并用蛋白质印迹法进行验证。将所获蛋白进行结晶条件筛选及悬滴优化,X线衍射分析所得晶体的结构。结果蛋白质印迹分析间接证明所得到的蛋白为HutX蛋白,并得到HutX蛋白的晶体及衍射数据。结论为进一步研究HutX的蛋白结构及其在霍乱弧菌亚铁血红素利用机制中发挥的作用提供了参考。 展开更多

关键词 霍乱弧菌 HutX蛋白 X线结晶学 血红素利用

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可溯源电镜图像管理与检索信息系统的研究与应用

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作者 胡适 王晔 +5 位作者 沈亚峰 范晓燕 林方兴 李天 杨勇骥 雷长海 《电子显微学报》 CAS CSCD 2017年第1期31-36,共6页

针对电镜分析测试工作中存在的实验信息、样品资料和电镜图像间相互割裂,用户不能便捷地获取实验结果图像和难以进行溯源监管等问题,研发了可溯源电镜图像管理与检索信息系统,实现了实验信息、样品资料和电镜图像的一体化管理和电镜图... 针对电镜分析测试工作中存在的实验信息、样品资料和电镜图像间相互割裂,用户不能便捷地获取实验结果图像和难以进行溯源监管等问题,研发了可溯源电镜图像管理与检索信息系统,实现了实验信息、样品资料和电镜图像的一体化管理和电镜图像即时传递,采用以"图搜图"的反向图片搜索算法,实现电镜图像的可溯源管理。 展开更多

关键词 图像检索 溯源管理 信息系统

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早老素在扩张型心肌病中的作用研究进展

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作者 袁青宁 杨勇骥 雷长海 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期97-101,共5页

早老素(presenilin,PS)是在家族性早发型阿尔茨海默病中发现的一种跨膜蛋白,主要表达于细胞膜和细胞器膜上。PS作为γ-分泌酶的重要组成部分,参与细胞内多种蛋白的调控。近年研究发现在扩张型心肌病中存在PS基因突变,并且发现PS基因对... 早老素(presenilin,PS)是在家族性早发型阿尔茨海默病中发现的一种跨膜蛋白,主要表达于细胞膜和细胞器膜上。PS作为γ-分泌酶的重要组成部分,参与细胞内多种蛋白的调控。近年研究发现在扩张型心肌病中存在PS基因突变,并且发现PS基因对心脏的形成及心肌细胞中钙稳态的调控具有重要作用。本文综述了PS在心脏中的作用以及PS可能影响心肌细胞钙稳态的相关机制,后者包括β-淀粉样蛋白、1,4,5-三磷酸肌醇受体、Ryanodine受体、钙泵等,为家族性扩张型心肌病的研究提供参考。 展开更多

关键词 早老素类 扩张型心肌病 淀粉样前体蛋白 钙 Γ-分泌酶

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