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萤火虫荧光素酶基因cDNA真核表达载体在细菌中的高效表达
被引量：
1
1
作者
李植峰
高丽杰
+2 位作者
曹韫旭
孙树秦
陆德如
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2001年第3期22-24,共3页
将萤火虫荧光素酶基因cDNA真核表达载体pGL2 导入大肠杆菌HB1 0 1、鼠伤寒杆菌LB50 0 0和X4 0 64中 ,它在这些原核细胞中均有较好的表达效果。它在大肠杆菌HB1 0 1的表达量是该基因cDNA原核表达载体 pUHF12 - 1的表达量的 3 0倍。采用...
将萤火虫荧光素酶基因cDNA真核表达载体pGL2 导入大肠杆菌HB1 0 1、鼠伤寒杆菌LB50 0 0和X4 0 64中 ,它在这些原核细胞中均有较好的表达效果。它在大肠杆菌HB1 0 1的表达量是该基因cDNA原核表达载体 pUHF12 - 1的表达量的 3 0倍。采用计算机PC/GENE程序包分析 ,pGL2 的SV4 0 早期启动子序列中含有SV4 0 基因组HindⅢB片断中一段长为 4 9bp的DNA序列 ,这一序列可能就是SV4 0 基因组HindⅢB片断的原核增强子功能的决定序列 ,正是该序列使pGL2 在细菌中获得了高效表达。
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关键词
荧光素酶基因
真核表达载体
原核增强子
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职称材料
Ribozyme对癌基因Ki-ras^(G12V) mRNA的剪切及其特异性
2
作者
吴国祥
方裕强
+2 位作者
许国铭
李兆申
陆德如
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
2000年第4期275-278,共4页
目的 :设计切割ki-rasG12V mRNA的特异性ribozyme(Rz2 17) ,明确其对癌基因ki-rasG12VmRNA的细胞内外切割活性 ,为以ki-rasG12VmRNA为特异性靶分子的基因治疗及癌基因ki-ras的功能研究提拱一种新的途径。方法 :依Symons总结的“锤头结...
目的 :设计切割ki-rasG12V mRNA的特异性ribozyme(Rz2 17) ,明确其对癌基因ki-rasG12VmRNA的细胞内外切割活性 ,为以ki-rasG12VmRNA为特异性靶分子的基因治疗及癌基因ki-ras的功能研究提拱一种新的途径。方法 :依Symons总结的“锤头结构”原理 ,设计一种能特异性切割ki-rasG12VmRNA的ribozyme ,利用DNA重组技术构建ki-rasG12V外显子 1和ri-bozymeRz2l7的体外转录质粒及ribozymeRz2 17的真核表达质粒 ,体外转录获得ribozymeRz2 17及ki-rasG12V外显子 1mRNA ,在含Mg2 + 溶液中ribozymeRz2 17对其靶RNA分子进行切割。以RT -PCR对转染ribozymeRz2 17真核表达质粒的细胞ki-rasG12VmRNA进行半定量分析。结果 :ki-rasG12V外显子 1体外转录mRNA分子 ,能被ribozymeRz2 17定点切割而野生型ki-ras外显子 1体外转录mRNA则不被切割 ;转染ribozymeRz2 17的胰癌细胞ki-rasG12VmRNA含量减少 ,而转染ri bozymeRz2 17的肝癌细胞其内源性ki-rasmRNA含量无明显变化。结论 :ribozymeRz2 17无论在细胞内外均能剪切突变型ki-rasmRNA(G12V)而且其切割作用为突变型ki-rasG12VmRNA特异性的。
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关键词
ki-ras^G12V
MRNA
癌基因
基因治疗
RIBOZYME
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职称材料
题名
萤火虫荧光素酶基因cDNA真核表达载体在细菌中的高效表达
被引量：
1
1
作者
李植峰
高丽杰
曹韫旭
孙树秦
陆德如
机构
解放军北京
军医
学院生物化学教研室
第二军医大学
分子
遗传
学
研究所
出处
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2001年第3期22-24,共3页
文摘
将萤火虫荧光素酶基因cDNA真核表达载体pGL2 导入大肠杆菌HB1 0 1、鼠伤寒杆菌LB50 0 0和X4 0 64中 ,它在这些原核细胞中均有较好的表达效果。它在大肠杆菌HB1 0 1的表达量是该基因cDNA原核表达载体 pUHF12 - 1的表达量的 3 0倍。采用计算机PC/GENE程序包分析 ,pGL2 的SV4 0 早期启动子序列中含有SV4 0 基因组HindⅢB片断中一段长为 4 9bp的DNA序列 ,这一序列可能就是SV4 0 基因组HindⅢB片断的原核增强子功能的决定序列 ,正是该序列使pGL2 在细菌中获得了高效表达。
关键词
荧光素酶基因
真核表达载体
原核增强子
Keywords
luciferase gene
eukaryotic expressing vector
prokaryotic enhancer.
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
Ribozyme对癌基因Ki-ras^(G12V) mRNA的剪切及其特异性
2
作者
吴国祥
方裕强
许国铭
李兆申
陆德如
机构
第二军医大学
长海医院消化内科
第二军医大学分子遗传研究所
出处
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
2000年第4期275-278,共4页
基金
~~
文摘
目的 :设计切割ki-rasG12V mRNA的特异性ribozyme(Rz2 17) ,明确其对癌基因ki-rasG12VmRNA的细胞内外切割活性 ,为以ki-rasG12VmRNA为特异性靶分子的基因治疗及癌基因ki-ras的功能研究提拱一种新的途径。方法 :依Symons总结的“锤头结构”原理 ,设计一种能特异性切割ki-rasG12VmRNA的ribozyme ,利用DNA重组技术构建ki-rasG12V外显子 1和ri-bozymeRz2l7的体外转录质粒及ribozymeRz2 17的真核表达质粒 ,体外转录获得ribozymeRz2 17及ki-rasG12V外显子 1mRNA ,在含Mg2 + 溶液中ribozymeRz2 17对其靶RNA分子进行切割。以RT -PCR对转染ribozymeRz2 17真核表达质粒的细胞ki-rasG12VmRNA进行半定量分析。结果 :ki-rasG12V外显子 1体外转录mRNA分子 ,能被ribozymeRz2 17定点切割而野生型ki-ras外显子 1体外转录mRNA则不被切割 ;转染ribozymeRz2 17的胰癌细胞ki-rasG12VmRNA含量减少 ,而转染ri bozymeRz2 17的肝癌细胞其内源性ki-rasmRNA含量无明显变化。结论 :ribozymeRz2 17无论在细胞内外均能剪切突变型ki-rasmRNA(G12V)而且其切割作用为突变型ki-rasG12VmRNA特异性的。
关键词
ki-ras^G12V
MRNA
癌基因
基因治疗
RIBOZYME
Keywords
ki-ras G12V mRNA
ribozyme
cleavage
分类号
R730.5 [医药卫生—肿瘤]
R73－36 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
萤火虫荧光素酶基因cDNA真核表达载体在细菌中的高效表达
李植峰
高丽杰
曹韫旭
孙树秦
陆德如
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2001
1
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职称材料
2
Ribozyme对癌基因Ki-ras^(G12V) mRNA的剪切及其特异性
吴国祥
方裕强
许国铭
李兆申
陆德如
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
2000
0
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职称材料
已选择
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