2018年,美国德克萨斯大学安德森癌症中心的詹姆斯·艾莉森(James P. Allison)教授与日本京都大学的本庶佑(Tasuku Honjo)教授因创建了新型癌症免疫治疗方法获得了诺贝尔生理学与医学奖。这一创新性研究成果充分体现了免疫学基础研...2018年,美国德克萨斯大学安德森癌症中心的詹姆斯·艾莉森(James P. Allison)教授与日本京都大学的本庶佑(Tasuku Honjo)教授因创建了新型癌症免疫治疗方法获得了诺贝尔生理学与医学奖。这一创新性研究成果充分体现了免疫学基础研究在重大免疫相关疾病发病机制研究及疾病防治中的基础性、支撑性作用。这一年,国内外免疫学研究在基础理论及临床应用各个方向蓬勃发展,对诸多免疫学根本性、关键性科学问题有了更为深入的认识,为免疫相关疾病发病机制研究和防治手段的革新带来了新的思路,特别是肿瘤治疗方面取得重大进展。特别值得一提的是,国内免疫学研究者做出了一系列受到领域同行认可的高水平、原创性科研成果,为免疫学研究的发展贡献了重要力量。本文中,我们回顾了2018年国内外免疫学研究领域的最新理论和应用成果,与各位同行共同探讨免疫学研究的前沿热点和重大挑战。展开更多
目的:探索一种适合于中试生产的重组人干细胞因子(recombinant human stem cell factor,rhSCF)的发酵表达与纯化工艺。方法:研究不同培养基和热诱导时间对rhSCF表达量影响;探索最佳纯化工艺和各因素对rhSCF得率和生物学活性的影响...目的:探索一种适合于中试生产的重组人干细胞因子(recombinant human stem cell factor,rhSCF)的发酵表达与纯化工艺。方法:研究不同培养基和热诱导时间对rhSCF表达量影响;探索最佳纯化工艺和各因素对rhSCF得率和生物学活性的影响。结果:rhSCF工程菌在含甘油、酪蛋白水解物、酵母浸出粉、胰蛋白胨及微量元素的培养基中表达量最高。灰度扫描显示热诱导后2h开始表达,6h表达量最高,目的蛋白约可达菌体总蛋白30%。高表达蛋白经复性后,可用酸沉淀作粗分离纯化,随后用阳离子交换层析分离,纯度达80%,经反相层析去除二聚体后,最后用DEAE柱浓缩后并经S200转换缓冲液,最终获得纯度>95%和经活性>6×10^5U/mg的rhSCF制品。结论:成功地建立了注射用rhSCF的中试生产工艺,为随后进行的临床前研究及临床试验奠定基础。展开更多
文摘2018年,美国德克萨斯大学安德森癌症中心的詹姆斯·艾莉森(James P. Allison)教授与日本京都大学的本庶佑(Tasuku Honjo)教授因创建了新型癌症免疫治疗方法获得了诺贝尔生理学与医学奖。这一创新性研究成果充分体现了免疫学基础研究在重大免疫相关疾病发病机制研究及疾病防治中的基础性、支撑性作用。这一年,国内外免疫学研究在基础理论及临床应用各个方向蓬勃发展,对诸多免疫学根本性、关键性科学问题有了更为深入的认识,为免疫相关疾病发病机制研究和防治手段的革新带来了新的思路,特别是肿瘤治疗方面取得重大进展。特别值得一提的是,国内免疫学研究者做出了一系列受到领域同行认可的高水平、原创性科研成果,为免疫学研究的发展贡献了重要力量。本文中,我们回顾了2018年国内外免疫学研究领域的最新理论和应用成果,与各位同行共同探讨免疫学研究的前沿热点和重大挑战。
文摘目的:探索一种适合于中试生产的重组人干细胞因子(recombinant human stem cell factor,rhSCF)的发酵表达与纯化工艺。方法:研究不同培养基和热诱导时间对rhSCF表达量影响;探索最佳纯化工艺和各因素对rhSCF得率和生物学活性的影响。结果:rhSCF工程菌在含甘油、酪蛋白水解物、酵母浸出粉、胰蛋白胨及微量元素的培养基中表达量最高。灰度扫描显示热诱导后2h开始表达,6h表达量最高,目的蛋白约可达菌体总蛋白30%。高表达蛋白经复性后,可用酸沉淀作粗分离纯化,随后用阳离子交换层析分离,纯度达80%,经反相层析去除二聚体后,最后用DEAE柱浓缩后并经S200转换缓冲液,最终获得纯度>95%和经活性>6×10^5U/mg的rhSCF制品。结论:成功地建立了注射用rhSCF的中试生产工艺,为随后进行的临床前研究及临床试验奠定基础。