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实时荧光定量RT-PCR检测原发性肝细胞癌中Dicer mRNA的表达
被引量：
2
1
作者
王玉兰
王爱华
+2 位作者
陈允硕
侯丽娜
王华梁
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第8期842-844,共3页
目的:建立Dicer mRNA表达量检测的实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(reverse transcriptase polymerase chainreaction,RT-PCR)系统,检测肝癌细胞系与20例原发性肝细胞癌(primary hepatocellular carcinoma,PHC)组织中Dicer mR-NA的表达...
目的:建立Dicer mRNA表达量检测的实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(reverse transcriptase polymerase chainreaction,RT-PCR)系统,检测肝癌细胞系与20例原发性肝细胞癌(primary hepatocellular carcinoma,PHC)组织中Dicer mR-NA的表达水平。方法:根据Dicer mRNA的全序列设计特异性引物,结合荧光染料SYBR GreenⅠ,RT-PCR扩增目的片段并实时检测产物的荧光强度,进行熔解曲线分析排除非特异性扩增,根据标准品绘制标准曲线,由软件自动计算出待测样品Dicer mRNA的准确含量,并以Dicer mRNA和18S rRNA含量的比值作为Dicer表达水平的指标。结果:该方法检测的线性范围为5×102~5×109copies/μl,样本的批内变异系数与批间变异系数为4.13%~19.72%和6.25%~18.76%。Dicer mR-NA在HBV阳性肝癌细胞系HepG2.2.15和HBV阴性肝癌细胞系HepG2的表达水平明显低于正常肝细胞系WRL-68(P<0.05);在PHC组织的表达水平明显低于癌旁配对组织(P<0.05)。结论:该方法具有较好的灵敏度、特异性和重复性。Dic-er mRNA表达量在肝癌细胞系和PHC组织中的检测为以后更好的研究PHC的发病机制奠定了理论基础。
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关键词
DICER
癌
肝细胞
实时荧光定量RT-PCR
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职称材料
非那西丁在二乙基亚硝胺诱发肝癌大鼠的代谢
被引量：
1
2
作者
崔贞福
张国庆
+7 位作者
罗明
王华梁
王健
阎振林
贺平
钱其军
吴孟超
郭亚军
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2000年第2期202-204,共3页
目的 ①研究非那西丁在二乙基亚硝胺 (DEN)诱发肝癌大鼠中的代谢 ,以及其它评估肝脏功能指标的改变 ;②血浆结合型代谢产物含量改变对非那西丁试验的影响。方法 饮用DEN诱发大鼠肝癌 ,观察血液非那西丁及利多卡因代谢产物 ,白蛋白和...
目的 ①研究非那西丁在二乙基亚硝胺 (DEN)诱发肝癌大鼠中的代谢 ,以及其它评估肝脏功能指标的改变 ;②血浆结合型代谢产物含量改变对非那西丁试验的影响。方法 饮用DEN诱发大鼠肝癌 ,观察血液非那西丁及利多卡因代谢产物 ,白蛋白和胆红素含量 ,凝血酶原时间的改变 ;采用HPLC法测定血浆中非那西丁结合型和游离型代谢产物含量。结果 与正常对照组相比 ,DEN组大鼠肝脏出现多发性癌结节 ,肝 /体重比增加 3 3倍 ,血浆谷丙转氨酶、γ 谷氨酰转肽酶和碱性磷酸酶含量明显升高 ,但凝血酶原时间、血浆白蛋白、非那西丁和利多卡因代谢产物含量无明显改变。DEN组大鼠血浆非那西丁游离型代谢产物含量高于正常对照组 43 9% (P <0 0 1) ,但结合型 +游离型代谢产物总量无明显差别。结论 在DEN诱发肝癌大鼠 ,肝细胞严重受损 ,肝脏体积增大 ,非那西丁代谢等肝功能试验无明显改变。同时测定游离型及结合型代谢产物含量 ,才能正确反映肝脏的生物转化功能。
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关键词
肝癌
非那西丁
利多卡因试验
DEN
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职称材料
题名
实时荧光定量RT-PCR检测原发性肝细胞癌中Dicer mRNA的表达
被引量：
2
1
作者
王玉兰
王爱华
陈允硕
侯丽娜
王华梁
机构
第二军医大学东方肝胆外科医院检验科
上海市市东
医院
出处
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第8期842-844,共3页
文摘
目的:建立Dicer mRNA表达量检测的实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(reverse transcriptase polymerase chainreaction,RT-PCR)系统,检测肝癌细胞系与20例原发性肝细胞癌(primary hepatocellular carcinoma,PHC)组织中Dicer mR-NA的表达水平。方法:根据Dicer mRNA的全序列设计特异性引物,结合荧光染料SYBR GreenⅠ,RT-PCR扩增目的片段并实时检测产物的荧光强度,进行熔解曲线分析排除非特异性扩增,根据标准品绘制标准曲线,由软件自动计算出待测样品Dicer mRNA的准确含量,并以Dicer mRNA和18S rRNA含量的比值作为Dicer表达水平的指标。结果:该方法检测的线性范围为5×102~5×109copies/μl,样本的批内变异系数与批间变异系数为4.13%~19.72%和6.25%~18.76%。Dicer mR-NA在HBV阳性肝癌细胞系HepG2.2.15和HBV阴性肝癌细胞系HepG2的表达水平明显低于正常肝细胞系WRL-68(P<0.05);在PHC组织的表达水平明显低于癌旁配对组织(P<0.05)。结论:该方法具有较好的灵敏度、特异性和重复性。Dic-er mRNA表达量在肝癌细胞系和PHC组织中的检测为以后更好的研究PHC的发病机制奠定了理论基础。
关键词
DICER
癌
肝细胞
实时荧光定量RT-PCR
Keywords
Dicer
carcinoma,hepatocellular
real time fluorescent quantitative RT-PCR
分类号
R735.7 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
非那西丁在二乙基亚硝胺诱发肝癌大鼠的代谢
被引量：
1
2
作者
崔贞福
张国庆
罗明
王华梁
王健
阎振林
贺平
钱其军
吴孟超
郭亚军
机构
第二军医大学
东方
肝胆
外科
医院
肿瘤免疫基因治疗中心
第二军医大学
东方
肝胆
外科
医院
药械
科
第二军医大学东方肝胆外科医院检验科
出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2000年第2期202-204,共3页
文摘
目的 ①研究非那西丁在二乙基亚硝胺 (DEN)诱发肝癌大鼠中的代谢 ,以及其它评估肝脏功能指标的改变 ;②血浆结合型代谢产物含量改变对非那西丁试验的影响。方法 饮用DEN诱发大鼠肝癌 ,观察血液非那西丁及利多卡因代谢产物 ,白蛋白和胆红素含量 ,凝血酶原时间的改变 ;采用HPLC法测定血浆中非那西丁结合型和游离型代谢产物含量。结果 与正常对照组相比 ,DEN组大鼠肝脏出现多发性癌结节 ,肝 /体重比增加 3 3倍 ,血浆谷丙转氨酶、γ 谷氨酰转肽酶和碱性磷酸酶含量明显升高 ,但凝血酶原时间、血浆白蛋白、非那西丁和利多卡因代谢产物含量无明显改变。DEN组大鼠血浆非那西丁游离型代谢产物含量高于正常对照组 43 9% (P <0 0 1) ,但结合型 +游离型代谢产物总量无明显差别。结论 在DEN诱发肝癌大鼠 ,肝细胞严重受损 ,肝脏体积增大 ,非那西丁代谢等肝功能试验无明显改变。同时测定游离型及结合型代谢产物含量 ,才能正确反映肝脏的生物转化功能。
关键词
肝癌
非那西丁
利多卡因试验
DEN
Keywords
diethylnitrosamine
hepatoma
phenacetin test
lidocaine test
rat
分类号
R735.7 [医药卫生—肿瘤]
R921.1 [医药卫生—药学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
实时荧光定量RT-PCR检测原发性肝细胞癌中Dicer mRNA的表达
王玉兰
王爱华
陈允硕
侯丽娜
王华梁
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
非那西丁在二乙基亚硝胺诱发肝癌大鼠的代谢
崔贞福
张国庆
罗明
王华梁
王健
阎振林
贺平
钱其军
吴孟超
郭亚军
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2000
1
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