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运用激光捕获显微切割对肝细胞癌与肝内胆管癌蛋白质组的分析 被引量:4
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作者 周福平 胡和平 +3 位作者 艾建华 陆豪杰 王红阳 吴孟超 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1111-1114,共4页
目的:分析肝细胞癌和肝内胆管癌蛋白质的表达差异,获取鉴别两者的分子标志物。方法:通过激光捕获显微切割技术分离肝细胞癌和肝内胆管癌的纯细胞,通过双向电泳和质谱的方法检测两者表达的差异蛋白,再通过免疫组化染色的方法证实差异蛋... 目的:分析肝细胞癌和肝内胆管癌蛋白质的表达差异,获取鉴别两者的分子标志物。方法:通过激光捕获显微切割技术分离肝细胞癌和肝内胆管癌的纯细胞,通过双向电泳和质谱的方法检测两者表达的差异蛋白,再通过免疫组化染色的方法证实差异蛋白表达的情况。结果:肝细胞癌和肝内胆管癌图谱分别检测到(1124±110)、(938±90)个蛋白点。分析发现78个差异蛋白点,通过质谱鉴定出28个有意义的蛋白,20个蛋白仅在肝细胞癌表达或表达明显增高,8个蛋白仅在肝内胆管癌中表达或者高表达。同时免疫组化证实BK125H2.1在肝细胞癌中表达强阳性,而肝内胆管癌中缺失表达。结论:激光捕获显微切割是蛋白质组研究中的一个突破性的技术,可以有效地解决组织异质性的问题;本实验检测到的差异蛋白例如BK125H2.1可能成为鉴别肝细胞癌与肝内胆管癌特异性的分子标记物。 展开更多
关键词 肝细胞 胆管肿瘤 蛋白质组 激光捕获显微切割
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丝裂霉素C对肝癌细胞中NF-κB基因表达和分布的影响 被引量:2
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作者 唐亮 满晓波 +5 位作者 曹惠芳 邱秀华 刘淑琴 谈冶雄 吴孟超 王红阳 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2003年第2期97-100,共4页
目的 :探讨丝裂霉素C(MMC)对肝癌细胞中NF κB分布和基因表达的影响。方法 :应用细胞免疫组织化学检测不同浓度的MMC对SK HEP 1细胞中NF κB分布的影响 ,Western blot检测 5 0 μg/mlMMC作用不同时间的NF κB蛋白水平 ,RT PCR方法比较 5... 目的 :探讨丝裂霉素C(MMC)对肝癌细胞中NF κB分布和基因表达的影响。方法 :应用细胞免疫组织化学检测不同浓度的MMC对SK HEP 1细胞中NF κB分布的影响 ,Western blot检测 5 0 μg/mlMMC作用不同时间的NF κB蛋白水平 ,RT PCR方法比较 5 0 μg/mlMMC持续处理细胞不同时间和作用 2h停止用药后不同时间NF κB基因表达水平的影响。结果 :不同剂量的MMC能够不同程度地使细胞核中NF κB免疫组化染色增强 ,5 0 μg/ml的MMC导致了NF κB蛋白蛋白印迹水平升高 ,并在MMC处理 8h的细胞中升至最高 ,RT PCR方法检测NF κB基因mRNA水平在MMC持续处理的细胞中也上升 ,在第 2小水平最高 ,随后下降 ,但是在MMC处理 2h停止用药后NF κB基因mRNA水平没有下降反而继续上升 ,并持续到第 12小。结论 :MMC能够促进NF κB自细胞浆进入细胞核 ,5 0 μg/ml的MMC导致了NF κB自身表达升高并在撤除用药后仍旧存在 ,提示NF κB同细胞抗MMC活性密切相关。 展开更多
关键词 丝裂霉素C 肝癌细胞 NF-KB 基因表达 分布 影响
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spp1基因在肺癌组织中表达的定量检测及其意义 被引量:2
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作者 曹惠芳 满晓波 +6 位作者 蒋虹 徐志飞 唐亮 邱秀华 谈冶雄 吴孟超 王红阳 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2003年第2期119-121,共3页
目的 :探讨定量检测骨桥蛋白编码基因在原发性肺癌中的表达及其意义。方法 :制备 2 4例肺癌患者癌及癌周正常肺组织中总RNA ,采用RT PCR及实时荧光定量PCR技术分析spp1基因的mRNA表达水平。 结果 :在所有 2 4例肺癌中肺癌组织的骨桥蛋... 目的 :探讨定量检测骨桥蛋白编码基因在原发性肺癌中的表达及其意义。方法 :制备 2 4例肺癌患者癌及癌周正常肺组织中总RNA ,采用RT PCR及实时荧光定量PCR技术分析spp1基因的mRNA表达水平。 结果 :在所有 2 4例肺癌中肺癌组织的骨桥蛋白表达高于相邻的癌周正常肺组织 ,并且全部在 6倍以上 ,其中 7例在 10 0倍以上。结论 :肺癌组织中骨桥蛋白的表达明显升高 ,是肺癌诊断的重要标志物。 展开更多
关键词 spp1基因 肺癌组织 表达 定量检测
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Ir-MEK/ir-LEK在N-硝基-L-精氨酸抑制吗啡耐受形成中的作用 被引量:2
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作者 万兴旺 黄矛 +4 位作者 何雅琴 万丽 李万亥 由振东 路长林 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期119-120,共2页
关键词 Ir-MEK/ir-LEK N-硝基-L-精氨酸 吗啡耐受 吗啡 一氧化氮 脑啡肽
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牛初乳免疫球蛋白 A的纯化与原子力显微镜观测 被引量:6
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作者 傅骁勇 谭璐 +3 位作者 徐敬 朱国栋 李杰 王红阳 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期108-110,共3页
目的 :纯化牛初乳免疫球蛋白 A(Ig A)并在原子力显微镜 (AFM)下进行观测。 方法 :应用逐级盐析、透析和离子交换层析等生化手段 ,从牛初乳中提取 Ig A,SDS- PAGE鉴定纯化结果。应用 AFM对吸附在新剥离云母或多聚赖氨酸 (PL L)处理云母... 目的 :纯化牛初乳免疫球蛋白 A(Ig A)并在原子力显微镜 (AFM)下进行观测。 方法 :应用逐级盐析、透析和离子交换层析等生化手段 ,从牛初乳中提取 Ig A,SDS- PAGE鉴定纯化结果。应用 AFM对吸附在新剥离云母或多聚赖氨酸 (PL L)处理云母片基上的 Ig A进行空气相的结构观测。 结果 :考马斯亮蓝染色鉴定纯化的蛋白含有重链、轻链和分泌片 ;正常生理条件下的 Ig A以寡聚体结构为主 ,单体大约 2 .6 nm× 1 8.0 nm× 2 0 .2 nm,与电镜结果基本吻合 ;Ig A在 PL L 处理云母片基上的吸附呈现树枝状聚集 ,随孵育时间的延长 ,聚集现象更趋明显。 结论 :结合生化方法和 AFM观测 ,可对 Ig A等免疫球蛋白分子进行天然结构状态的微观探测 。 展开更多
关键词 牛初乳 免疫球蛋白A 纯化 原子力显微镜 观测 生理调控
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嵌合抗原受体修饰T细胞在实体肿瘤治疗中的应用
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作者 马韵涵 潘宇飞 +1 位作者 董立巍 谈冶雄 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期482-487,共6页
嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)是一种人工修饰的T细胞表面受体,它可以模拟天然的T细胞受体(T cell receptor,TCR)的功能。使用转基因技术可以在T细胞表面稳定表达CAR。CAR修饰T细胞(CAR-T细胞)利用抗体的肿瘤特异性识别... 嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)是一种人工修饰的T细胞表面受体,它可以模拟天然的T细胞受体(T cell receptor,TCR)的功能。使用转基因技术可以在T细胞表面稳定表达CAR。CAR修饰T细胞(CAR-T细胞)利用抗体的肿瘤特异性识别能力,靶向发挥T细胞的效应功能。目前CAR-T细胞在临床治疗白血病、淋巴瘤、黑素瘤等恶性肿瘤中取得了令人鼓舞的效果。但由于实体肿瘤的某些特点,CAR-T细胞在临床治疗实体肿瘤的实践中存在部分障碍。随着研究的深入,三代CAR-T细胞、双重特异性CAR-T细胞等的应用将为CAR-T细胞临床治疗实体肿瘤开拓道路。本文就近年来CAR-T细胞在实体肿瘤中的应用作一综述。 展开更多
关键词 嵌合抗原受体 T淋巴细胞 实体肿瘤 免疫疗法
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