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合成寡核苷酸对病毒目标序列特异结合反应及其影响因素研究
1
作者
王思雄
熊鸿燕
李莉
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第4期410-412,共3页
目的 观察人工合成的反义寡核苷酸 (ASON)、三螺旋结构寡核苷酸 (TFO)分别对人甲肝病毒 (HAV) 5′非编码区和鸭乙肝病毒 (DHBV) DNAX C区目标基因序列特异结合效应及受影响因素作用的变化。方法 在设定条件下 ,将人工合成的ASON和TF...
目的 观察人工合成的反义寡核苷酸 (ASON)、三螺旋结构寡核苷酸 (TFO)分别对人甲肝病毒 (HAV) 5′非编码区和鸭乙肝病毒 (DHBV) DNAX C区目标基因序列特异结合效应及受影响因素作用的变化。方法 在设定条件下 ,将人工合成的ASON和TFO与目标基因片断混合反应 ,采用电泳转移印迹技术观察特异结合产物及其产量。结果 所设计的ASON与TFO能与目标基因片段直接特异结合 ;在结合缓冲液中 ,ASON与目标片段的结合最佳比例是 2 5～ 5 0∶1,TFO与目标片段的结合最佳比例是 60 0∶1;在最适加入剂量比例下 ,结合反应 60min即有大量TFO的复合物形成 ,复合物产量随作用时间延长而增加 ,180～ 2 40min时结合产物完全稳定形成。但ASON的结合复合物大量形成需要 180～ 2 40min。结论 本试验所设计的ASON和TFO能与HAV和DHBV的目标基因序列发生特异的结合 。
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关键词
三螺旋结构寡核苷酸
反义寡核苷酸
鸭乙肝病毒
甲肝病毒
影响因素
ASON
TFO
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职称材料
题名
合成寡核苷酸对病毒目标序列特异结合反应及其影响因素研究
1
作者
王思雄
熊鸿燕
李莉
机构
第三军医预防医学系流行病学教研室
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第4期410-412,共3页
基金
国家自然科学基金资助项目 ( 39870 6 93)
全军"九五"科技课题基金资助项目 ( 98M0 96 )
文摘
目的 观察人工合成的反义寡核苷酸 (ASON)、三螺旋结构寡核苷酸 (TFO)分别对人甲肝病毒 (HAV) 5′非编码区和鸭乙肝病毒 (DHBV) DNAX C区目标基因序列特异结合效应及受影响因素作用的变化。方法 在设定条件下 ,将人工合成的ASON和TFO与目标基因片断混合反应 ,采用电泳转移印迹技术观察特异结合产物及其产量。结果 所设计的ASON与TFO能与目标基因片段直接特异结合 ;在结合缓冲液中 ,ASON与目标片段的结合最佳比例是 2 5～ 5 0∶1,TFO与目标片段的结合最佳比例是 60 0∶1;在最适加入剂量比例下 ,结合反应 60min即有大量TFO的复合物形成 ,复合物产量随作用时间延长而增加 ,180～ 2 40min时结合产物完全稳定形成。但ASON的结合复合物大量形成需要 180～ 2 40min。结论 本试验所设计的ASON和TFO能与HAV和DHBV的目标基因序列发生特异的结合 。
关键词
三螺旋结构寡核苷酸
反义寡核苷酸
鸭乙肝病毒
甲肝病毒
影响因素
ASON
TFO
Keywords
triple helix forming oligonucleotide
antisense oligonucleotide
duck hepatitis virus B
hepatitis virus A
分类号
R512.6 [医药卫生—内科学]
R373.21 [医药卫生—病原生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
合成寡核苷酸对病毒目标序列特异结合反应及其影响因素研究
王思雄
熊鸿燕
李莉
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002
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