急性缺氧对大鼠肠系膜微循环白细胞流变学行为的影响 被引量：12

1

作者 张钢 高钰琪 刘福玉 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期320-322,共3页

目的　研究急性缺氧对大鼠肠系膜微循环白细胞流变学行为的影响。方法　运用活体显微镜结合计算机图像分析系统观察分析急性缺氧大鼠肠系膜微循环中白细胞的流变行为。结果　常氧状态下肠系膜微静脉中有少量白细胞粘附 ,部分白细胞沿管... 目的　研究急性缺氧对大鼠肠系膜微循环白细胞流变学行为的影响。方法　运用活体显微镜结合计算机图像分析系统观察分析急性缺氧大鼠肠系膜微循环中白细胞的流变行为。结果　常氧状态下肠系膜微静脉中有少量白细胞粘附 ,部分白细胞沿管壁滚动 ,滚动速度较快 ,白细胞与内皮细胞接触时间 (TLECT)短 ,急性缺氧后白细胞粘附数显著增加 ,白细胞沿壁滚动大量增多 ,滚动速度明显减慢 ,TLECT显著延长 (P <0 0 5 )。结论　急性缺氧严重影响微循环中白细胞的流变学行为 ,TLECT显著延长 ,反映了白细胞与内皮细胞相互作用程度加重 。 展开更多

关键词 急性缺氧 白细胞流变学 肠系膜微循环 细胞粘附 影响

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线粒体基因组4977bp异质性缺失与高原肺水肿易感性无关 被引量：7

2

作者 罗勇军 陈郁 高钰琪 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第23期2537-2538,共2页

目的研究线粒体基因组4 977 bp大片段异质性缺失与高原肺水肿(high altitude pulmonary edema,HAPE)易感性的关系。方法选择本室收集的HAPE标本36例及与其匹配的健康对照标本36例,采用定量PCR(SYBR)的方法研究线粒体基因组4 977 bp大片... 目的研究线粒体基因组4 977 bp大片段异质性缺失与高原肺水肿(high altitude pulmonary edema,HAPE)易感性的关系。方法选择本室收集的HAPE标本36例及与其匹配的健康对照标本36例,采用定量PCR(SYBR)的方法研究线粒体基因组4 977 bp大片段异质性缺失与高原肺水肿易感性的关系。结果在高原肺水肿的病例组及对照组中均没有发现4 977 bp异质性缺失。结论线粒体基因组4 977 bp异质性缺失与高原肺水肿易感性无关。 展开更多

关键词 线粒体DNA 4977BP缺失 高原肺水肿 异质性

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缺氧大鼠心肌毛细血管密度与VEGF变化的研究 被引量：6

3

作者 黄庆愿 高钰琪 +4 位作者 史景泉 刘福玉 陈建 曹利飞 孙秉庸 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期633-636,共4页

目的　观察大鼠在缺氧习服过程中心肌组织毛细血管密度和血管内皮细胞生长因子 (VEGF)及其受体的变化规律。方法　大鼠在 50 0 0m模拟高原缺氧 5、1 5和 30d后 ,用碱性磷酸酶 (ALP)组织化学方法显示心肌组织毛细血管并进行图像分析 ;用... 目的　观察大鼠在缺氧习服过程中心肌组织毛细血管密度和血管内皮细胞生长因子 (VEGF)及其受体的变化规律。方法　大鼠在 50 0 0m模拟高原缺氧 5、1 5和 30d后 ,用碱性磷酸酶 (ALP)组织化学方法显示心肌组织毛细血管并进行图像分析 ;用原位杂交和免疫组织化学技术观察心肌组织中VEGFmRNA、VEGF、FLK和Flt 1蛋白表达情况。结果　缺氧 1 5d时 ,右室心肌单位面积内毛细血管数与肌纤维数的比值 (C/M)显著增高。左室心肌随着缺氧时间的延长 ,毛细血管密度和C/M比值逐渐增高 ,缺氧30d时毛细血管密度和C/M比值较常压对照组显著增加。原位杂交和免疫组织化学结果显示 ,VEGFmRNA主要存在于心肌细胞中 ,而VEGF蛋白主要分布于心肌细胞的胞浆、胞膜及心肌细胞间隙中。机体缺氧时心肌组织中VEGF的表达普遍增强 ,5d时达高峰。FLK和Flt 1主要分布于微血管内皮细胞 ,各组中FLK和Flt 1表达无显著差异。结论　大鼠在缺氧习服过程中 ,左、右室心肌毛细血管出现增生 ,其机制可能与VEGF的表达上调有关。 展开更多

关键词 缺氧 新生血管化 血管内皮细胞生长因子 心脏 习服 VEGF大鼠

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内毒素脂多糖对培养肾小管上皮细胞凋亡和增殖的影响 被引量：7

4

作者 闫振成 贾昆霞 +2 位作者 张建国 黄庆愿 朱妙珍 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第11期1276-1278,共3页

目的　观察肾小管上皮细胞 (Tubularepitheliacell,TEC)在含内毒素脂多糖 (Lipopolysaccharide ,LPS)微环境中细胞凋亡和功能改变 ,探讨LPS直接损害肾小管的机制。方法　在含内毒素LPS的介质中体外培养肾小管上皮细胞 ,检测不同时相细... 目的　观察肾小管上皮细胞 (Tubularepitheliacell,TEC)在含内毒素脂多糖 (Lipopolysaccharide ,LPS)微环境中细胞凋亡和功能改变 ,探讨LPS直接损害肾小管的机制。方法　在含内毒素LPS的介质中体外培养肾小管上皮细胞 ,检测不同时相细胞凋亡、增殖能力及分泌肿瘤坏死因子 α(Tumornecrosisfactorα ,TNF α)能力的变化。结果　LPS有明显的抑制TEC增殖 ,促进TEC分泌TNF α ,且随着LPS浓度的增大 ,其作用更为明显 ;LPS还具有明显促细胞凋亡作用 ,呈剂量依赖性 ;相关分析表明 ,细胞凋亡与LPS促TEC分泌TNF α的量有明显正相关。结论　LPS可抑制TEC增殖 ,促进细胞凋亡 ,可能是通过TNF α而起作用 ,这可能是LPS导致脓毒症性肾衰或急性间质性肾炎小管间质损害的机制之一。 展开更多

关键词 肾小管上皮细胞 肾损害 内毒素脂多糖 细胞凋亡 细胞增殖

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高糖对培养肾小球内皮细胞细胞膜流动性影响的研究 被引量：6

5

作者 闫振成 贾昆霞 +3 位作者 张建国 黄庆愿 朱妙珍 丁涵露 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期723-725,共3页

目的　观察高糖状态下肾小球内皮细胞过氧化损伤与内皮细胞膜流动性改变的关系。方法　采用体外人肾小球内皮细胞培养 ,八木组织测量之TBA法测定脂质过氧化产物丙二醛 ,Prendergast法测定细胞膜流动性 ,Fura 2双波长荧光法检测细胞内钙... 目的　观察高糖状态下肾小球内皮细胞过氧化损伤与内皮细胞膜流动性改变的关系。方法　采用体外人肾小球内皮细胞培养 ,八木组织测量之TBA法测定脂质过氧化产物丙二醛 ,Prendergast法测定细胞膜流动性 ,Fura 2双波长荧光法检测细胞内钙离子含量的变化。结果　高糖对肾小球内皮细胞可致过氧化损伤 ,使细胞膜流动性明显增高 ,细胞内钙含量增加 ,随着培养时间的延长 ,糖浓度愈高 ,作用愈明显。结论　高糖致内皮细胞过氧化损伤影响细胞膜流动性改变 ,可能是糖尿病肾病发生的始动因素。 展开更多

关键词 葡萄糖 内皮细胞 肾小球 脂质过氧化作用 细胞膜流动性 高糖

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早期糖尿病肾病相关微小RNA在小鼠肾脏的表达变化 被引量：7

6

作者 张政 罗勇军 +1 位作者 彭惠民 何晓燕 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第13期1383-1386,共4页

目的建立db/db小鼠早期糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)微小RNA(microRNA,miRNA)的差异表达谱。方法采用12只9周龄高血糖且24h尿白蛋白显著增高的db/db小鼠作为早期糖尿病肾病组,12只9周龄db/m小鼠作为正常对照组,用于miRNA芯片和... 目的建立db/db小鼠早期糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)微小RNA(microRNA,miRNA)的差异表达谱。方法采用12只9周龄高血糖且24h尿白蛋白显著增高的db/db小鼠作为早期糖尿病肾病组,12只9周龄db/m小鼠作为正常对照组,用于miRNA芯片和实时荧光定量RT-PCR检测。Trizol法抽提肾脏总RNA,YM-100微离心滤器富集小RNA,芯片技术检测DN组和对照组miRNAs的差异表达谱。应用实时荧光定量RT-PCR验证部分差异miRNAs,运用生物信息学技术预测部分相关miRNAs的靶基因。结果芯片结果显示,66个miRNA在DN组和对照组存在差异表达(P<0.01),其中35个miRNAs在DN组呈高表达,31个miRNAs在DN组呈低表达,差异倍数从1.08～10.20。实时荧光定量RT-PCR进一步验证部分miRNA的表达,结果显示3个miRNAs在DN组表达上调,分别为:miR-196a、miR-98和miR-29c;4个表达在DN组下调,分别为miR-21、miR-451、miR-709和miR-187,差异显著(P<0.01)。结论部分miRNAs在DN和正常对照肾脏组织中存在差异表达,可能参与了DN发生的分子机制。 展开更多

关键词 糖尿病肾病 MICRORNA microRNA芯片 差异表达

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高效液相色谱法检测大鼠脑线粒体的腺苷酸 被引量：3

7

作者 潘峰 孙玮 +3 位作者 路菊 张正治 柳君泽 李兵 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第24期2481-2482,共2页

目的建立大鼠脑线粒体腺苷酸简便、快速、有效的高效液相色谱法。方法采用HypersilBDSC18(5μm,250mm×4.6mm)色谱柱对标准品和样品进行色谱分析。结果腺苷酸(AMP、ADP、ATP)在0.25～40.0μg/ml的范围内,线性关系良好,加标平均回收... 目的建立大鼠脑线粒体腺苷酸简便、快速、有效的高效液相色谱法。方法采用HypersilBDSC18(5μm,250mm×4.6mm)色谱柱对标准品和样品进行色谱分析。结果腺苷酸(AMP、ADP、ATP)在0.25～40.0μg/ml的范围内,线性关系良好,加标平均回收率大于(97.59±2.47)%,相对标准差(RSD)小于3.84%。结论本法操作简便,线性关系好,回收率高、准确可靠,适于线粒体内腺苷酸的检测分析。 展开更多

关键词 线粒体 腺苷酸 高效液相色谱法 检测

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哺乳动物核呼吸因子研究进展 被引量：3

8

作者 宋熔 柳君泽 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期183-185,共3页

核呼吸因子(NRFs)包括核呼吸因子1(NRF 1)和核呼吸因子2(NRF 2),是DNA转录调节因子,调节细胞核基因组编码的呼吸链亚基和与线粒体复制、转录过程中有关的组分,如线粒体转录因子A、线粒体RNA核酸加工内切酶以及血红素合成限速酶等的表达... 核呼吸因子(NRFs)包括核呼吸因子1(NRF 1)和核呼吸因子2(NRF 2),是DNA转录调节因子,调节细胞核基因组编码的呼吸链亚基和与线粒体复制、转录过程中有关的组分,如线粒体转录因子A、线粒体RNA核酸加工内切酶以及血红素合成限速酶等的表达。NRFs在协调线粒体与细胞核两基因组的表达中起重要作用,并与细胞的生长、增殖及染色体的维护等密切相关。 展开更多

关键词 研究进展 哺乳动物 转录调节因子 线粒体RNA 核基因组 转录因子 DNA 呼吸链 节细胞 限速酶 血红素 内切酶 细胞核 染色体 表达 复制 核酸

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兔眼准分子激光角膜原位磨镶术后眼压变化及眼压测量的研究 被引量：3

9

作者 黄小勇 贺翔鸽 谭小玲 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期79-81,共3页

目的　探讨兔眼在准分子激光角膜原位磨镶术 (excimerLaserin situkeratomileusis,LASIK)术后眼压的变化及其与影响眼压测量的各因素之间的关系。方法　 2 6兔 5 2眼随机分为对照组和LASIK手术组 ,单盲法 ,用电子直接眼压计和Schi tz眼... 目的　探讨兔眼在准分子激光角膜原位磨镶术 (excimerLaserin situkeratomileusis,LASIK)术后眼压的变化及其与影响眼压测量的各因素之间的关系。方法　 2 6兔 5 2眼随机分为对照组和LASIK手术组 ,单盲法 ,用电子直接眼压计和Schi tz眼压计测量手术前后的眼压 ,检查中央角膜厚度 (centralcornealthickness,CCT)和角膜曲率。结果　兔眼手术前后电子直接眼压读数无显著差异 ;术后电子直接、Schi tz眼压值的差值和切削等值球镜度 (D)显著相关。结论　兔眼术后实际眼内压并无变化 ,术后Schi tz眼压测量值的偏低量与切削等值球镜度 (D) 展开更多

关键词 兔眼 准分子激光 角膜原位磨镶术 眼压测量

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烫伤诱导大鼠心肌细胞缺氧诱导因子-1α定位表达的研究 被引量：2

10

作者 党永明 黄跃生 陈丽峰 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第18期1602-1605,共4页

目的　探讨 40 %Ⅲ度烫伤大鼠早期心肌组织中缺氧诱导因子 1α(HIF 1α)的蛋白表达的变化规律及其定位分布意义。方法　采用 40 %TBSAⅢ度烫伤大鼠模型 ,蛋白免疫印迹法 (Western blot)测定HIF 1α蛋白水平表达 ,免疫组化法定位显示HI... 目的　探讨 40 %Ⅲ度烫伤大鼠早期心肌组织中缺氧诱导因子 1α(HIF 1α)的蛋白表达的变化规律及其定位分布意义。方法　采用 40 %TBSAⅢ度烫伤大鼠模型 ,蛋白免疫印迹法 (Western blot)测定HIF 1α蛋白水平表达 ,免疫组化法定位显示HIF 1α表达。结果　烫伤后大鼠心肌组织内HIF 1α蛋白表达量明显升高。左、右心室HIF 1α蛋白表达不同 ,HIF 1α蛋白表达增加主要定位于细胞核。结论　严重烧伤可以诱导心肌组织HIF 1α蛋白表达增加。左心室对照组HIF 1蛋白含量明显高于右心室。HIF 1α蛋白表达增加主要分布于心肌细胞核内 ,诱导下游因子表达。 展开更多

关键词 烧伤 心肌缺血 缺氧诱导因子—1α 免疫印迹 免疫组化

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肝细胞和肝癌细胞粘弹性的对比研究 被引量：2

11

作者 张钢 龙勉 吴泽志 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期751-751,共1页

关键词 肝细胞 肝癌细胞 粘弹性 比较

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光密度的有效测定及其影响因素的分析 被引量：2

12

作者 张钢 夏志坚 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第7期785-785,共1页

关键词 光密度 有效测定 影响因素

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新生大鼠心肌细胞内Ca^(2+)的空间分布及调控的离体研究 被引量：1

13

作者 刘健 何作云 王培勇 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第7期806-809,共4页

目的　观察心肌细胞胞浆和核Ca2 + 的空间分布和钙变化的形式。方法　以Fluo 4/AM荧光指示剂负载培养的心肌细胞 ,应用激光共聚焦扫描显微镜观察心肌细胞的钙信号形式及胞浆和核内 [Ca2 + ]i的变化。结果　心肌细胞核的荧光强度明显高... 目的　观察心肌细胞胞浆和核Ca2 + 的空间分布和钙变化的形式。方法　以Fluo 4/AM荧光指示剂负载培养的心肌细胞 ,应用激光共聚焦扫描显微镜观察心肌细胞的钙信号形式及胞浆和核内 [Ca2 + ]i的变化。结果　心肌细胞核的荧光强度明显高于细胞浆 ,并存在小幅度的钙震荡 ,AngⅡ使钙震荡幅度增大 ,其作用可被NO所完全抑制。Ca2 + ATPase抑制剂Thapsigargin ( 10 -6mol/L)、钙释放通道Ryanodine受体 2激动剂咖啡因 ( 5mmol/L)和大剂量L 型Ca2 + 通道阻滞剂Verapamil( 5 0 0 μmol/L)使心肌细胞胞浆内和核膜上出现钙闪烁现象。EGTA首先螯合心肌细胞内的游离Ca2 + ,继之螯合钙库Ca2 + ,最后仅显示心肌细胞核膜腔Ca2 + 库影。L 型Ca2 + 通道阻滞剂Verapamil引起心肌细胞自发的钙波传递消失 ,核和胞浆内荧光强度一过性升高后下降。结论　心肌细胞内存在钙闪烁、钙波以及钙震荡等多种钙信号形式 ,胞浆和核Ca2 + 库对Ca2 + 的摄取和释放在细胞功能的调节中起重要作用。 展开更多

关键词 钙信号 心肌细胞 细胞核

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血管内皮生长因子mRNA在激光视网膜损伤后的表达

14

作者 陈少军 阴正勤 高钰琪 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第9期821-821,827,共2页

关键词 缺血性视网膜病变 激光视网膜损伤 血管内皮生长因子 MRNA 原位杂交

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建立尿素-SDS-PAGE分离COX亚基技术

15

作者 谭小玲 柳君泽 黄小勇 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期166-167,共2页

目的　建立以线粒体蛋白为样本的COX亚基分离方法。方法　用四种不同的蛋白变性液 ,通过尿素变性及非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 ,结合免疫印迹法分析线粒体蛋白中COX亚基分离效果。结果　A液处理的线粒体蛋白经尿素 SDS PAGE分离COX亚基... 目的　建立以线粒体蛋白为样本的COX亚基分离方法。方法　用四种不同的蛋白变性液 ,通过尿素变性及非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 ,结合免疫印迹法分析线粒体蛋白中COX亚基分离效果。结果　A液处理的线粒体蛋白经尿素 SDS PAGE分离COX亚基效果最好。结论　尿素 SDS PAGE是分离线粒体蛋白中COX亚基的理想方法 ,尿素和EDTA是蛋白质变性液中的必需成分。 展开更多

关键词 尿素-SDS-PAGE 分离 COX亚基 线粒体蛋白

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