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Nogo-66受体RNA干扰质粒的构建及其干扰效率鉴定
被引量：
2
1
作者
范有明
蔡明春
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第13期1285-1288,共4页
目的构建及筛选高效率针对Nogo-66受体(Nogo-66receptor,NgR)进行RNA干扰(RNAi)的质粒。方法RT-PCR克隆NgR,插入表达质粒中,构建NgR-GFP融合蛋白表达质粒。根据NgR序列,设计4对针对NgRmRNA进行RNAi的寡核苷酸。退火后,插入短发夹RNA(sho...
目的构建及筛选高效率针对Nogo-66受体(Nogo-66receptor,NgR)进行RNA干扰(RNAi)的质粒。方法RT-PCR克隆NgR,插入表达质粒中,构建NgR-GFP融合蛋白表达质粒。根据NgR序列,设计4对针对NgRmRNA进行RNAi的寡核苷酸。退火后,插入短发夹RNA(shorthairpinRNA,shRNA)表达质粒中,构建shRNA表达质粒。将NgR-GFP融合蛋白表达质粒与shRNA表达质粒共转染AAV-293细胞。通过对GFP表达量的观察及Westernblotting定量检测NgR-GFP融合蛋白表达量,鉴定shRNA表达质粒对NgR的干扰效率。结果针对NgR进行RNAi的4个序列中,有1个序列的干扰效率大于90%以上。结论成功构建了1个针对NgR的高效RNAi表达质粒。
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关键词
Nogo-66受体
RNA干扰
质粒
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职称材料
题名
Nogo-66受体RNA干扰质粒的构建及其干扰效率鉴定
被引量：
2
1
作者
范有明
蔡明春
机构
汕头
大学
香港中文
大学
联合汕头国际眼科中心
第三军医大学高原军事医学系病理生理学及高原生理学教研室全军高原医学重点实验室
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第13期1285-1288,共4页
基金
中国博士后科学基金(2005037624)
国家自然科学基金面上项目(30672038)~~
文摘
目的构建及筛选高效率针对Nogo-66受体(Nogo-66receptor,NgR)进行RNA干扰(RNAi)的质粒。方法RT-PCR克隆NgR,插入表达质粒中,构建NgR-GFP融合蛋白表达质粒。根据NgR序列,设计4对针对NgRmRNA进行RNAi的寡核苷酸。退火后,插入短发夹RNA(shorthairpinRNA,shRNA)表达质粒中,构建shRNA表达质粒。将NgR-GFP融合蛋白表达质粒与shRNA表达质粒共转染AAV-293细胞。通过对GFP表达量的观察及Westernblotting定量检测NgR-GFP融合蛋白表达量,鉴定shRNA表达质粒对NgR的干扰效率。结果针对NgR进行RNAi的4个序列中,有1个序列的干扰效率大于90%以上。结论成功构建了1个针对NgR的高效RNAi表达质粒。
关键词
Nogo-66受体
RNA干扰
质粒
Keywords
Nogo-66 receptor
RNA interference
plasmid
分类号
R392-33 [医药卫生—免疫学]
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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作者
出处
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被引量
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1
Nogo-66受体RNA干扰质粒的构建及其干扰效率鉴定
范有明
蔡明春
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007
2
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