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壳聚糖纳米颗粒作为基因载体的初步研究 被引量:6
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作者 安江洪 敖绪军 +3 位作者 钱莘 卓文磊 孙建国 陈正堂 《医学研究生学报》 CAS 2008年第8期790-794,I0001,共6页
目的:采用适当粒径大小的壳聚糖纳米颗粒(CS-NP)连接质粒DNA,观察CS-NP结合DNA的能力及介导基因转染的效率。方法:利用静电吸附作用连接CS-NP与报告基因pEGFP—N1,形成pEGFP-N1-CS-NP复合物。用透射电镜及激光粒度分析仪观察pEGFP... 目的:采用适当粒径大小的壳聚糖纳米颗粒(CS-NP)连接质粒DNA,观察CS-NP结合DNA的能力及介导基因转染的效率。方法:利用静电吸附作用连接CS-NP与报告基因pEGFP—N1,形成pEGFP-N1-CS-NP复合物。用透射电镜及激光粒度分析仪观察pEGFP-N1-CS—NP的形态、粒径大小、分布及Zeta电位。用琼脂糖凝胶电泳分析CS-NP与DNA结合能力,以比色法检测其包封率;用DNase I消化实验观察pEGFP-N1-CS-NP抗核酸酶降解的能力。体外转染A549细胞观察pEGFP-N1-CS-NP的转染活性。结果:激光粒度分析仪及透射电镜观察到pEGFP-N1-CS-NP呈较均匀的不规则球形,平均粒径约为100~200nm,Ztea电位为16—22.8mV。WCS-NP/WDNA≥4时,能有效地结合DNA,包封率〉90%。CS-NP能有效介导pEGFP-N1转染A549细胞,并在A549细胞中表达绿色荧光蛋白。结论:CS-NP能有效地与质粒连接,并有很高的包封率,能保护DNA免受核酸酶的降解。CS-NP在体外能将报告基因转染入细胞内,并在细胞内表达。这些研究结果为采用CS-NP作为基因载体应用于活细胞及活体成像的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 壳聚糖 纳米颗粒 基因载体
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RNAi抑制PIAS3表达对胶质瘤U251细胞增殖和凋亡的影响 被引量:2
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作者 纪华 余巍 +2 位作者 陈宏 李光辉 王东林 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期94-97,共4页
目的:构建针对PIAS3的RNAi质粒载体,初步探讨抑制PIAS3表达对胶质瘤U251细胞增殖和凋亡的影响。方法:构建3个RNAi载体,用脂质体法将其转染胶质瘤细胞系CHG-5,通过半定量RT-PCR筛选干扰效率最高的重组RNAi质粒。将该RNAi质粒转染体外培... 目的:构建针对PIAS3的RNAi质粒载体,初步探讨抑制PIAS3表达对胶质瘤U251细胞增殖和凋亡的影响。方法:构建3个RNAi载体,用脂质体法将其转染胶质瘤细胞系CHG-5,通过半定量RT-PCR筛选干扰效率最高的重组RNAi质粒。将该RNAi质粒转染体外培养的人胶质瘤U251细胞株,用半定量RT-PCR和Western blot检测PIAS3的表达。Annexin V2 FITC和PI双染流式细胞术检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞增殖周期变化。结果:转染干扰质粒的细胞株PIAS3基因和蛋白表达均有减弱。流式细胞仪分析,抑制PIAS3表达能够诱导胶质瘤U251细胞拮抗凋亡(P<0.01),同时出现细胞周期改变,表现为G2期细胞比例升高,S期细胞比例降低,具有显著性差异(P<0.05)。结论:下调PIAS3基因表达使U251阻滞在G2期,拮抗细胞凋亡。 展开更多
关键词 PIAS3 RNAI 胶质瘤 细胞周期 凋亡
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经导管化疗栓塞联合经皮微波消融治疗老年中晚期肝癌临床效果
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作者 黄彩英 《中国医学前沿杂志(电子版)》 2015年第8期62-65,共4页
目的分析经导管化疗栓塞(transcatheter arterial chemoembolization,TACE)联合经皮微波消融治疗老年中晚期肝癌的临床效果。方法选取本院2009年2月至2012年2月收治的104例老年中晚期肝癌患者为研究对象,行TACE联合经皮微波消融治疗,观... 目的分析经导管化疗栓塞(transcatheter arterial chemoembolization,TACE)联合经皮微波消融治疗老年中晚期肝癌的临床效果。方法选取本院2009年2月至2012年2月收治的104例老年中晚期肝癌患者为研究对象,行TACE联合经皮微波消融治疗,观察患者治疗前后肝功能变化、免疫功能变化、临床疗效、不良反应发生情况及分级。结果患者治疗后谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及总胆红素(TBIL)水平较治疗前均逐渐降低(P<0.05),治疗1个月后AST水平恢复正常,ALT、TBIL水平仍高于正常值。治疗后CD3+T、CD4+T、CD4+T/CD8+T均逐渐上升,CD8+T逐渐下降(P<0.05)。104例患者中完全缓解0例,部分缓解29例,稳定71例,进展4例,总有效率为96.2%。多数患者不良反应分级集中于I级。104例患者均获得有效随访,6个月、1年、2年生存率分别为98.1%(102/104)、89.4%(93/104)、74.0%(77/104)。结论 TACE联合经皮微波消融能够有效改善老年中晚期肝癌患者肝功能及免疫功能,具有良好的临床疗效,且不会导致严重不良反应,是一种安全、有效的治疗方案。 展开更多
关键词 经导管化疗栓塞 经皮微波消融 中晚期肝癌 临床疗效 免疫功能
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