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题名酵母双杂交随机肽库的设计及构建
被引量:3
- 1
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作者
胡承香
徐祥
梁华平
王付龙
罗艳
王正国
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机构
第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所一室
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出处
《动物医学进展》
CSCD
2003年第2期61-63,共3页
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基金
国家重点基础研究规划项目(G1999054203)
国家自然科学基金资助项目(30080009)
重庆市科委基金项目(2000-6319)
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文摘
构建一个含16个氨基酸的酵母双杂交随机肽库,设计合成编码16肽的随机DNA片段,PCR扩增随机DNA片段,经限制性内切酶BamHI和EcoRI酶切后克隆入酵母表达质粒pGADT7GH,构建酵母双杂交随机肽库质粒pGADT7GH-RP并检验其库容。结果表明,扩增获得编码16肽的随机DNA片段,并成功将随机DNA片段克隆入酵母表达质粒pGADT7GH,与GAL4AD形成融合蛋白,其库容为1.28×107。从而成功地构建了酵母双杂交随机肽库。
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关键词
酵母双杂交随机肽库
设计
构建
酵母双杂交肽库筛选系统
蛋白质
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Keywords
random peptide library
yeast two-hybrid system
pGADT_7 GH
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分类号
Q78
[生物学—分子生物学]
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题名引物二聚体在目的基因克隆中的应用初探
被引量:2
- 2
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作者
徐祥
刘昕
梁华平
代佳平
毛琼国
罗艳
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机构
第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所一室
第三军医大学分子遗传教研室
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出处
《临床检验杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第3期135-136,共2页
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基金
国家重点基础研究规划项目!
No.G19990 5 42 0 3
+3 种基金
国家自然科学基金!资助项目
No.3 0 0 80 0 0 9
重庆市科委基金!项目
No .2
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文摘
目的 根据引物二聚体形成原理 ,建立一种新的克隆目的基因的方法。方法 人工合成两条或两条以上 3′端互补配对的寡核苷酸链 ,寡核苷酸链、Taq酶和dNTP按一定比例混合 ,PCR扩增延伸 ,琼脂糖凝胶电泳鉴定结果。结果 PCR产物经电泳鉴定 ,可见一条清晰的特异条带。结论 此方法能合成 5 0 0bp以下的短片段目的基因。
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关键词
引物二聚体
基因克隆
聚合酶链反应
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Keywords
Primer dimer
Gene clone
PCR
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分类号
Q789
[生物学—分子生物学]
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