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酵母双杂交随机肽库的设计及构建
被引量：
3
1
作者
胡承香
徐祥
+3 位作者
梁华平
王付龙
罗艳
王正国
《动物医学进展》
CSCD
2003年第2期61-63,共3页
构建一个含16个氨基酸的酵母双杂交随机肽库,设计合成编码16肽的随机DNA片段,PCR扩增随机DNA片段,经限制性内切酶BamHI和EcoRI酶切后克隆入酵母表达质粒pGADT7GH,构建酵母双杂交随机肽库质粒pGADT7GH-RP并检验其库容。结果表明,扩增获...
构建一个含16个氨基酸的酵母双杂交随机肽库,设计合成编码16肽的随机DNA片段,PCR扩增随机DNA片段,经限制性内切酶BamHI和EcoRI酶切后克隆入酵母表达质粒pGADT7GH,构建酵母双杂交随机肽库质粒pGADT7GH-RP并检验其库容。结果表明,扩增获得编码16肽的随机DNA片段,并成功将随机DNA片段克隆入酵母表达质粒pGADT7GH,与GAL4AD形成融合蛋白,其库容为1.28×107。从而成功地构建了酵母双杂交随机肽库。
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关键词
酵母双杂交随机肽库
设计
构建
酵母双杂交肽库筛选系统
蛋白质
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职称材料
酵母双杂交随机环肽库的构建、鉴定与扩增
2
作者
徐祥
梁华平
+2 位作者
王付龙
罗艳
王正国
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第5期437-439,共3页
目的 :构建含 16个氨基酸的酵母双杂交随机环肽库。方法 :以PCR扩增人工合成的随机DNA模板 ,经BamHI和EcoRI酶切后 ,克隆入酵母表达质粒pGADT7GH ,构建酵母双杂交随机环肽库并检验其库容及随机性 ,扩增、抽提并纯化酵母双杂交环肽库质...
目的 :构建含 16个氨基酸的酵母双杂交随机环肽库。方法 :以PCR扩增人工合成的随机DNA模板 ,经BamHI和EcoRI酶切后 ,克隆入酵母表达质粒pGADT7GH ,构建酵母双杂交随机环肽库并检验其库容及随机性 ,扩增、抽提并纯化酵母双杂交环肽库质粒。结果 :构建了酵母双杂交随机环肽库 ,库容为 1.2 8× 10 7,氨基酸分布与理论频数无显著差异 ,并扩增获得大量高纯度的环肽库质粒。结论 :成功地构建酵母双杂交随机环肽库 ,并获得大量高纯度的环肽库质粒。
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关键词
随机环肽库
酵母双杂交
pGADT7GH
构建
鉴定
扩增
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职称材料
一氧化碳释放分子3通过抑制肺泡上皮细胞凋亡减轻脂多糖诱导的新生鼠急性肺损伤
被引量：
1
3
作者
蔡康兴
汪丽
+4 位作者
王婷
罗莉
陈龙
王楠
史源
《中国循证儿科杂志》
CSCD
北大核心
2015年第6期458-462,共5页
目的探讨一氧化碳释放分子3(CORM3)对脂多糖(LPS)诱导的新生鼠急性肺损伤(ALI)肺泡上皮细胞凋亡的影响。方法 32只新生SD大鼠均分为对照组、LPS组、CORM3组和失活CORM3(i CORM3)组;LPS组、CORM3组和i CORM3组采用LPS气管内滴注建立新生...
目的探讨一氧化碳释放分子3(CORM3)对脂多糖(LPS)诱导的新生鼠急性肺损伤(ALI)肺泡上皮细胞凋亡的影响。方法 32只新生SD大鼠均分为对照组、LPS组、CORM3组和失活CORM3(i CORM3)组;LPS组、CORM3组和i CORM3组采用LPS气管内滴注建立新生鼠ALI模型,分别腹腔注射生理盐水、CORM3和i CORM3;对照组不建立ALI模型,腹腔注射生理盐水。于建模后12 h取肺组织,苏木素-伊红染色观察肺组织病理改变,湿干(W/D)比值测定,肺泡灌洗液(BALF)细胞计数及蛋白含量测定。体外培养A549细胞,LPS诱导细胞凋亡。MTT检测细胞活性,Tunel染色观察组织、细胞凋亡变化。结果 1与对照组相比,LPS组肺组织形态结构明显紊乱,肺泡压缩,肺间质大量炎性细胞浸润;CORM3组肺组织形态结构基本正常,间质炎性细胞浸润少;i CORM3组见肺组织水肿及大量炎性细胞浸润。2与对照组相比,LPS组肺组织W/D比值、BALF细胞数及蛋白含量明显升高,肺泡上皮细胞凋亡率明显增多[(37.3±4.5)%vs(3.0±1.0)%];A549细胞活力下降,凋亡率明显升高[(29.6±4.1)%vs(3.6±1.0)%],差异均有统计学意义(P<0.05)。CORM3组肺组织W/D比值、BALF细胞数和蛋白含量较LPS组显著下降,肺泡上皮细胞凋亡率减少[(19.3±4.6)%];A549细胞活力回升,凋亡率[(15.3±4.5)%]明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。LPS组与i CORM3组间上述指标差异均无统计学意义。结论 CO通过抑制肺泡上皮细胞凋亡减轻新生鼠ALI。
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关键词
一氧化碳释放分子3
脂多糖
肺损伤
凋亡
肺泡上皮细胞
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职称材料
题名
酵母双杂交随机肽库的设计及构建
被引量：
3
1
作者
胡承香
徐祥
梁华平
王付龙
罗艳
王正国
机构
第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所一室
出处
《动物医学进展》
CSCD
2003年第2期61-63,共3页
基金
国家重点基础研究规划项目(G1999054203)
国家自然科学基金资助项目(30080009)
重庆市科委基金项目(2000-6319)
文摘
构建一个含16个氨基酸的酵母双杂交随机肽库,设计合成编码16肽的随机DNA片段,PCR扩增随机DNA片段,经限制性内切酶BamHI和EcoRI酶切后克隆入酵母表达质粒pGADT7GH,构建酵母双杂交随机肽库质粒pGADT7GH-RP并检验其库容。结果表明,扩增获得编码16肽的随机DNA片段,并成功将随机DNA片段克隆入酵母表达质粒pGADT7GH,与GAL4AD形成融合蛋白,其库容为1.28×107。从而成功地构建了酵母双杂交随机肽库。
关键词
酵母双杂交随机肽库
设计
构建
酵母双杂交肽库筛选系统
蛋白质
Keywords
random peptide library
yeast two-hybrid system
pGADT_7 GH
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
酵母双杂交随机环肽库的构建、鉴定与扩增
2
作者
徐祥
梁华平
王付龙
罗艳
王正国
机构
第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所一室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第5期437-439,共3页
基金
国家重点基础研究规划 (973)资助(No .G1 9990 542 0 3)
国家自然科学基金资助项目(No .30 0 80 0 0 9)
重庆市科委基金资助项目(No.2 0 0 0 631 9)
文摘
目的 :构建含 16个氨基酸的酵母双杂交随机环肽库。方法 :以PCR扩增人工合成的随机DNA模板 ,经BamHI和EcoRI酶切后 ,克隆入酵母表达质粒pGADT7GH ,构建酵母双杂交随机环肽库并检验其库容及随机性 ,扩增、抽提并纯化酵母双杂交环肽库质粒。结果 :构建了酵母双杂交随机环肽库 ,库容为 1.2 8× 10 7,氨基酸分布与理论频数无显著差异 ,并扩增获得大量高纯度的环肽库质粒。结论 :成功地构建酵母双杂交随机环肽库 ,并获得大量高纯度的环肽库质粒。
关键词
随机环肽库
酵母双杂交
pGADT7GH
构建
鉴定
扩增
Keywords
random cycle peptide library
yeast two hybrid system
pGADT 7 GH
分类号
R373.9 [医药卫生—病原生物学]
R341.43 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
一氧化碳释放分子3通过抑制肺泡上皮细胞凋亡减轻脂多糖诱导的新生鼠急性肺损伤
被引量：
1
3
作者
蔡康兴
汪丽
王婷
罗莉
陈龙
王楠
史源
机构
第三军医大学
附属
大坪
医院
儿科
第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所一室
出处
《中国循证儿科杂志》
CSCD
北大核心
2015年第6期458-462,共5页
基金
重庆市科技计划项目:cstc2013yykf A0193
国家自然科学基金:81100458
文摘
目的探讨一氧化碳释放分子3(CORM3)对脂多糖(LPS)诱导的新生鼠急性肺损伤(ALI)肺泡上皮细胞凋亡的影响。方法 32只新生SD大鼠均分为对照组、LPS组、CORM3组和失活CORM3(i CORM3)组;LPS组、CORM3组和i CORM3组采用LPS气管内滴注建立新生鼠ALI模型,分别腹腔注射生理盐水、CORM3和i CORM3;对照组不建立ALI模型,腹腔注射生理盐水。于建模后12 h取肺组织,苏木素-伊红染色观察肺组织病理改变,湿干(W/D)比值测定,肺泡灌洗液(BALF)细胞计数及蛋白含量测定。体外培养A549细胞,LPS诱导细胞凋亡。MTT检测细胞活性,Tunel染色观察组织、细胞凋亡变化。结果 1与对照组相比,LPS组肺组织形态结构明显紊乱,肺泡压缩,肺间质大量炎性细胞浸润;CORM3组肺组织形态结构基本正常,间质炎性细胞浸润少;i CORM3组见肺组织水肿及大量炎性细胞浸润。2与对照组相比,LPS组肺组织W/D比值、BALF细胞数及蛋白含量明显升高,肺泡上皮细胞凋亡率明显增多[(37.3±4.5)%vs(3.0±1.0)%];A549细胞活力下降,凋亡率明显升高[(29.6±4.1)%vs(3.6±1.0)%],差异均有统计学意义(P<0.05)。CORM3组肺组织W/D比值、BALF细胞数和蛋白含量较LPS组显著下降,肺泡上皮细胞凋亡率减少[(19.3±4.6)%];A549细胞活力回升,凋亡率[(15.3±4.5)%]明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。LPS组与i CORM3组间上述指标差异均无统计学意义。结论 CO通过抑制肺泡上皮细胞凋亡减轻新生鼠ALI。
关键词
一氧化碳释放分子3
脂多糖
肺损伤
凋亡
肺泡上皮细胞
Keywords
Carbon monoxide-releasing molecule 3
Lipopolysaccharid
Lung injury
Apoptosis
Alveolar epithelial cell
分类号
R722.1 [医药卫生—儿科]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
酵母双杂交随机肽库的设计及构建
胡承香
徐祥
梁华平
王付龙
罗艳
王正国
《动物医学进展》
CSCD
2003
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
酵母双杂交随机环肽库的构建、鉴定与扩增
徐祥
梁华平
王付龙
罗艳
王正国
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
一氧化碳释放分子3通过抑制肺泡上皮细胞凋亡减轻脂多糖诱导的新生鼠急性肺损伤
蔡康兴
汪丽
王婷
罗莉
陈龙
王楠
史源
《中国循证儿科杂志》
CSCD
北大核心
2015
1
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