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混合胸腺移植诱导免疫耐受和防止发生自身免疫性疾病的实验研究
被引量：
7
1
作者
王锡华
吴军
+4 位作者
解志杰
袁军
贺伟峰
陈希炜
易绍萱
《医学研究生学报》
CAS
2005年第6期499-502,共4页
目的:探讨混合胸腺移植诱导移植免疫耐受而不发生自身免疫性疾病的可行性。方法:BALB/c裸小鼠的肾包膜下植入胸腺,建立异种、同系与异种混合、同种与异种混合胸腺移植模型。4个月后,用流式细胞仪技术检测受者外周血中T细胞,用混合淋巴...
目的:探讨混合胸腺移植诱导移植免疫耐受而不发生自身免疫性疾病的可行性。方法:BALB/c裸小鼠的肾包膜下植入胸腺,建立异种、同系与异种混合、同种与异种混合胸腺移植模型。4个月后,用流式细胞仪技术检测受者外周血中T细胞,用混合淋巴细胞培养了解T细胞对刀豆素A(ConA)以及同种异种淋巴细胞的反应性,异基因皮肤移植观察皮肤移植物存活期。术后6个月内比较各组发生自身免疫性疾病情况,观察胃的组织学变化,用ELISA法检测受者血清中抗DNA自身抗体。结果:胸腺移植后,受者T细胞重建良好;T细胞对ConA及无关的SD鼠淋巴细胞的反应强,而对移植胸腺供者来源的淋巴细胞无增殖反应;受者对胸腺供者来源皮肤移植物不发生排斥,而对无关的SD鼠皮肤移植物发生排斥。异种组发生自身免疫性疾病率高,异种组胃组织有明显的炎性损害,血清中自身抗体明显高,而混合组未观察到明显的炎性改变。结论:同系或同种、异种胎胸腺混合移植,可诱导供者特异性免疫耐受和防止器官特异性自身体免疫性疾病。
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关键词
胸腺移植
免疫耐受
自身免疫
皮肤移植
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职称材料
人β1整合素近端和远端启动子报告基因载体的构建和鉴定及启动活性分析
被引量：
9
2
作者
陈卫
苏踊跃
+3 位作者
梁光萍
陈建
张曼辉
罗向东
《医学研究生学报》
CAS
2007年第2期135-137,141,共4页
目的:克隆整合素β1近端启动子和远端启动子基因序列,构建并鉴定整合素β1启动子调控的荧光素酶报告基因载体pGL3-261和pGL3-1442。方法:以本室构建的含整合素β1全长启动子基因序列(1756 bp)的重组载体pGL3-β1为模板,用含有酶切位点...
目的:克隆整合素β1近端启动子和远端启动子基因序列,构建并鉴定整合素β1启动子调控的荧光素酶报告基因载体pGL3-261和pGL3-1442。方法:以本室构建的含整合素β1全长启动子基因序列(1756 bp)的重组载体pGL3-β1为模板,用含有酶切位点的特异性引物扩增出整合素β1近端和远端启动子基因序列,克隆至荧光素酶表达载体pGL3-basic,构建含正确目的基因的表达载体pGL3-261和pGL3-1442,经NheⅠ、XhoⅠ酶切、聚合酶链式反应(PCR)扩增及测序鉴定;并用pGL3-261和pGL3-1442质粒与pGL3-β1质粒同时转染人表皮细胞株HaCaT进行活性分析。结果:酶切及序列测定表明,克隆获得的近端启动子261bp和远端启动子1442bp与GenBank DNA序列数据库对比分析序列一致,且插入方向正确;此三种质粒都有明显的启动子活性,远端启动子活性与全长启动子活性无显著差异,但明显高于近端启动子活性。结论:成功构建了整合素β1近端和远端启动子基因序列荧光素酶报告基因载体,整合素β1远端启动子在HaCaT细胞中起主要作用。为下一步研究人整合素β1启动子核心区、基因表达调控机制及其信号转导通路等奠定基础。
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关键词
整合素Β1
远端启动子
近端启动子
载体
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职称材料
β_1整合素启动子荧光素酶报告基因载体的构建与鉴定
被引量：
2
3
作者
陈卫
苏踊跃
+3 位作者
梁光萍
陈建
张曼辉
罗向东
《山西医科大学学报》
CAS
2006年第9期893-896,共4页
目的克隆β1整合素(CD29)启动子区基因全长序列,构建并鉴定β1整合素启动子全长序列荧光素酶报告基因载体pGL3-β1。方法以含β1整合素启动子基因全长序列的基因片段(2 735 bp)的重组pGEM-T easy载体为模板,用含有酶切位点的特异性引物...
目的克隆β1整合素(CD29)启动子区基因全长序列,构建并鉴定β1整合素启动子全长序列荧光素酶报告基因载体pGL3-β1。方法以含β1整合素启动子基因全长序列的基因片段(2 735 bp)的重组pGEM-T easy载体为模板,用含有酶切位点的特异性引物扩增出整合素β1启动子基因全长序列1 756 bp,克隆至荧光素酶表达载体pGL3-basic,构建含正确目的基因的表达载体pGL3-β1,并NheⅠ、XhoⅠ酶切、PCR及测序鉴定;并以该质粒转染人表皮细胞株HaCaT进行活性检测。结果酶切、PCR及序列测定表明,克隆获得的1 756 bp与GenBank DNA序列数据库对比分析序列一致,插入方向正确;且pGL3-β1启动子在人表皮细胞株HaCaT中有明显转录活性。结论成功构建了β1整合素启动子基因全长序列荧光素酶报告基因载体,为下一步研究人β1整合素启动子的活性分析、基因表达调控机制及其信号转导通路等研究奠定基础。
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关键词
抗原
CD29
启动区
遗传载体
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职称材料
题名
混合胸腺移植诱导免疫耐受和防止发生自身免疫性疾病的实验研究
被引量：
7
1
作者
王锡华
吴军
解志杰
袁军
贺伟峰
陈希炜
易绍萱
机构
第三军医大学西南医院烧伤研究所创伤烧伤复合伤国家重点实验室
出处
《医学研究生学报》
CAS
2005年第6期499-502,共4页
基金
国家自然科学青年基金资助项目(批准号:30200261)
文摘
目的:探讨混合胸腺移植诱导移植免疫耐受而不发生自身免疫性疾病的可行性。方法:BALB/c裸小鼠的肾包膜下植入胸腺,建立异种、同系与异种混合、同种与异种混合胸腺移植模型。4个月后,用流式细胞仪技术检测受者外周血中T细胞,用混合淋巴细胞培养了解T细胞对刀豆素A(ConA)以及同种异种淋巴细胞的反应性,异基因皮肤移植观察皮肤移植物存活期。术后6个月内比较各组发生自身免疫性疾病情况,观察胃的组织学变化,用ELISA法检测受者血清中抗DNA自身抗体。结果:胸腺移植后,受者T细胞重建良好;T细胞对ConA及无关的SD鼠淋巴细胞的反应强,而对移植胸腺供者来源的淋巴细胞无增殖反应;受者对胸腺供者来源皮肤移植物不发生排斥,而对无关的SD鼠皮肤移植物发生排斥。异种组发生自身免疫性疾病率高,异种组胃组织有明显的炎性损害,血清中自身抗体明显高,而混合组未观察到明显的炎性改变。结论:同系或同种、异种胎胸腺混合移植,可诱导供者特异性免疫耐受和防止器官特异性自身体免疫性疾病。
关键词
胸腺移植
免疫耐受
自身免疫
皮肤移植
Keywords
Thymus transplantation
Immune tolerance
Autoimmunity
Skin transplantation
分类号
R655.7 [医药卫生—外科学]
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职称材料
题名
人β1整合素近端和远端启动子报告基因载体的构建和鉴定及启动活性分析
被引量：
9
2
作者
陈卫
苏踊跃
梁光萍
陈建
张曼辉
罗向东
机构
第三军医大学西南医院
烧伤
研究所
创伤
烧伤
与
复合
伤
国家
重点
实验室
解放军第二六三
医院
超声科
出处
《医学研究生学报》
CAS
2007年第2期135-137,141,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(批准号:10332060)
国家重点基础研究发展规划资助项目(批准号:2005CB522601)
文摘
目的:克隆整合素β1近端启动子和远端启动子基因序列,构建并鉴定整合素β1启动子调控的荧光素酶报告基因载体pGL3-261和pGL3-1442。方法:以本室构建的含整合素β1全长启动子基因序列(1756 bp)的重组载体pGL3-β1为模板,用含有酶切位点的特异性引物扩增出整合素β1近端和远端启动子基因序列,克隆至荧光素酶表达载体pGL3-basic,构建含正确目的基因的表达载体pGL3-261和pGL3-1442,经NheⅠ、XhoⅠ酶切、聚合酶链式反应(PCR)扩增及测序鉴定;并用pGL3-261和pGL3-1442质粒与pGL3-β1质粒同时转染人表皮细胞株HaCaT进行活性分析。结果:酶切及序列测定表明,克隆获得的近端启动子261bp和远端启动子1442bp与GenBank DNA序列数据库对比分析序列一致,且插入方向正确;此三种质粒都有明显的启动子活性,远端启动子活性与全长启动子活性无显著差异,但明显高于近端启动子活性。结论:成功构建了整合素β1近端和远端启动子基因序列荧光素酶报告基因载体,整合素β1远端启动子在HaCaT细胞中起主要作用。为下一步研究人整合素β1启动子核心区、基因表达调控机制及其信号转导通路等奠定基础。
关键词
整合素Β1
远端启动子
近端启动子
载体
Keywords
Integrin β1
Proximal promoter
Distal promoter
Vector
分类号
Q782 [生物学—分子生物学]
在线阅读
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职称材料
题名
β_1整合素启动子荧光素酶报告基因载体的构建与鉴定
被引量：
2
3
作者
陈卫
苏踊跃
梁光萍
陈建
张曼辉
罗向东
机构
第三军医大学西南医院
烧伤
研究所
创伤
烧伤
与
复合
伤
国家
重点
实验室
北京军区
出处
《山西医科大学学报》
CAS
2006年第9期893-896,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(10332060)
国家重点基础研究发展规划资助项目(2005CB522601)
文摘
目的克隆β1整合素(CD29)启动子区基因全长序列,构建并鉴定β1整合素启动子全长序列荧光素酶报告基因载体pGL3-β1。方法以含β1整合素启动子基因全长序列的基因片段(2 735 bp)的重组pGEM-T easy载体为模板,用含有酶切位点的特异性引物扩增出整合素β1启动子基因全长序列1 756 bp,克隆至荧光素酶表达载体pGL3-basic,构建含正确目的基因的表达载体pGL3-β1,并NheⅠ、XhoⅠ酶切、PCR及测序鉴定;并以该质粒转染人表皮细胞株HaCaT进行活性检测。结果酶切、PCR及序列测定表明,克隆获得的1 756 bp与GenBank DNA序列数据库对比分析序列一致,插入方向正确;且pGL3-β1启动子在人表皮细胞株HaCaT中有明显转录活性。结论成功构建了β1整合素启动子基因全长序列荧光素酶报告基因载体,为下一步研究人β1整合素启动子的活性分析、基因表达调控机制及其信号转导通路等研究奠定基础。
关键词
抗原
CD29
启动区
遗传载体
Keywords
CD29 antigene
promoter region
genetic vectors
分类号
Q782 [生物学—分子生物学]
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
混合胸腺移植诱导免疫耐受和防止发生自身免疫性疾病的实验研究
王锡华
吴军
解志杰
袁军
贺伟峰
陈希炜
易绍萱
《医学研究生学报》
CAS
2005
7
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
人β1整合素近端和远端启动子报告基因载体的构建和鉴定及启动活性分析
陈卫
苏踊跃
梁光萍
陈建
张曼辉
罗向东
《医学研究生学报》
CAS
2007
9
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
β_1整合素启动子荧光素酶报告基因载体的构建与鉴定
陈卫
苏踊跃
梁光萍
陈建
张曼辉
罗向东
《山西医科大学学报》
CAS
2006
2
在线阅读
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职称材料
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